Биореактивы

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду. Описание: РНК зависимая ДНК полимераза. Катализирует матричный синтез ДНК используя в качестве матрицы РНК или одноцепочечную ДНК. Необходим праймер. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для включения 1 нмоля dТTP в кислотонерастворимую фракцию, образуемую на матрице поли (rA) с олиго (dT)-праймера за 10 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер Обратная транскриптаза M-MuLV Условия хранения: 10 mM Калия фосфат (pH 7.5); 0,1 mM EDTA; 200 mM NaCl; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Примечание: Высокая концентрация фермента может привести к ингибированию ОТ-ПЦР. В этом случае следует разбавить препарат фермента в 5, 10 или 20 раз буфером для разбавления M-MuLV ревертазы (прилагается).

Окрашивание по Нисслю — широко используемый гистологический метод визуализации морфологии нервной ткани. Метод основан на взаимодействии основных красителей с нуклеиновыми кислотами клеток. Из-за интенсивного синтеза белка, перикарион нейронов имеет высокое содержание рибосомальной РНК в шероховатом эндоплазматическом ретикулуме (т.н. «вещество Ниссля»), и в следствие этого, окрашивание нейронов основными красителями в цитоплазме более выражено, чем в ядрах. На этом основании окрашенные по Нисслю нейроны можно отличить от глиальных клеток, а данный метод считается специфичным для обнаружения нейронов. Deep-Red Fluorescent Nissl Stain — непроникающий в живые клетки краситель, который не флуоресцирует в отсутствие нуклеиновых кислот. Краситель многократно усиливает свою флуоресценцию при связывании с РНК и ДНК. Длинноволновая флуоресценция Deep-Red Fluorescent Nissl Stain сильно отстоит от зеленого и красного каналов, что делает этот краситель идеальным для экспериментов с многоцветным флуоресцентным мечением.

KTN-полимераза — модифицированная Taq-полимераза, у которой отсутствует 5’ → 3’ экзонуклеазная активность. Реакционная смесь 5X KTNmix-HS применяется для ПЦР-РВ с флуоресцентными зондами или праймерами по технологиям, основанным на изменении конформации зонда без его разрушения (технологии Scorpion, Amplifluor, LUX и другие). Возможно применение с целью генотипирования. В состав 5X KTNmix-HS входят: KTN-полимераза, инактивированная специфичными моноклональными антителами; смесь dNTP, оптимизированный буфер и ионы магния. Для постановки ПЦР к смеси необходимо добавить праймеры, флуоресцентные пробы и ДНК-матрицу.

BDP 581/591 малеимид - краситель для конъюгации с тиолами, например, суфльгидрильными группами белков и пептидов. Флуорофор подходит для различных применений, в том числе для микроскопии, флуоресценто-поляризационного анализа и детекции активных форм кислорода (при реакции с ними происходит изменение спектра флуоресценции).

Cyanine7 ДБЦО — реагент, содержащий краситель для ближнего ИК-диапазона, конъюгированный с циклоалкином для стерически промотированного циклоприсоединения к азидам. Азодибензоциклооктин (DBCO, ADIBO) — стабильный, но при этом активный циклоалкиновый фрагмент, очень быстро реагирующий с азидами.

JOE - ксантеновый краситель, производное флуоресцеина, содержащие метоксигруппы и атомы хлора. Этот флуорофор представляет интерес для мечения олигонуклеотидов. Его спектры поглощения и эмиссии попадают в канал, промежуточный между FAM и TAMRA. Этот флуорофор можно ввести в олигонуклеотид с помощью фосфорамидита. Он совместим со стандартными условиями деблокирования. Этот продукт содержит чистый 5-изомер красителя JOE.

TODi-3 (гомодимер Тиазолового Красного, также известный как TOTO®-3) — димерный краситель на основе карбоцианина с флуоресценцией в дальней красной части спектра. TODi-3 — непроникающий в живые клетки ядерный краситель, который не флуоресцирует в отсутствие нуклеиновых кислот. Краситель многократно усиливает свою флуоресценцию при связывании с двуцепочечной ДНК. TODi-3 идеален для окрашивания нуклеиновых кислот на микрочипах, а также для контрастного окрашивания ядер и хромосом в экспериментах с многоцветным флуоресцентным мечением благодаря яркому сигналу и низкой фоновой флуоресценции. TODi-3 не цитотоксичен и может использоваться для долгосрочного мониторинга жизнеспособности клеток и обнаружения мертвых клеток в культуре. Длинноволновая флуоресценция TO-TAP-3 сильно отстоит от зеленого и красного каналов, что делает этот краситель идеальным для экспериментов с многоцветным флуоресцентным мечением.

Азидопроизводное красителя Cyanine3B для конъюгации с терминальными алкинами посредством медь-катализируемой клик-реакции или с напряженными алкинами посредством безмедной клик-реакции. Cyanine3B — цианиновый краситель с желтой эмиссией, являющийся улучшенной версией флуорофора Cyanine3, обладающий значительно более высокими квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью. За счет зафиксированной конформации Cyanine3B имеет самый высокий квантовый выход эмиссии в сравнении с другими красителями этой длины волны. Этот краситель — сульфированное производное, которое можно использовать для конъюгации в водных растворах.

YODi-3 (гомодимер Оксазолового Красного, также известный как YOYO®-3) — димерный краситель на основе карбоцианина с флуоресценцией в красной области спектра. YODi-3 — непроникающий в живые клетки ядерный краситель, который не флуоресцирует в отсутствие нуклеиновых кислот. Краситель значительно усиливает свою флуоресценцию при связывании с ДНК. YODi-3 идеален для окрашивания нуклеиновых кислот на микрочипах, а также для контрастного окрашивания ядер и хромосом в экспериментах с многоцветным флуоресцентным мечением благодаря яркому сигналу и низкой фоновой флуоресценции. Одновременное мечение с помощью YODi-3 (непроникающим в клетки) и LUCS 13 (проникающим в клетки прижизненным ядерным маркером) или аннексином V-AF488 можно использовать для оценки жизнеспособности клеток и апоптоза.

Молекула, содержащая карбоксильную группу (COOH) и алкилиодидную функциональность. Алкилиодиды являются мощнейшими алкилирующими агентами. Они реагируют с различными нуклеофилами — тиолами, аминами, алкоголятами и фенолятами. Эта молекула позволяет осуществлять конъюгации через гибкий линкер ПЭГ3 (триэтиленгликоль).

Краситель dsSafe — флуоресцентный краситель для прокраски нуклеиновых кислот в агарозных и полиакриламидных гелях. Данный краситель является лучшей безопасной альтернативой бромистому этидию (EtBr) — dsSafe не токсичен, не обладает мутагенной и канцерогенной активностью. dsSafe позволяет визуализировать нуклеиновые кислоты с чувствительностью, аналогичной бромистому этидию. Для возбуждения красителя подходят как классические трансиллюминаторы с УФ-излучением, так и более безопасные для глаз и образцов нуклеиновых кислот трансиллюминаторы с голубым светом. При использовании голубого света для возбуждения dsSafe фоновая флуоресценция ниже, чем при возбуждении бромистого этидия УФ-светом, при этом вырезаемые фрагменты ДНК для последующего клонирования не подвергаются повреждающему действию УФ-излучения, что повышает эффективность клонирования и снижает индуцируемое УФ число нежелательных мутаций. В комплексе с ДНК спектр красителя имеет два пика возбуждения: в ультрафиолетовом (280 нм) и в голубом диапазонах (502 нм), и максимум эмиссии в зеленом диапазоне ~530 нм. Краситель поставляется в виде концентрата 10 000× в ДМСО. Для прокраски геля необходимо добавить краситель в раствор расплавленной агарозы* или окрасить гель после гель-электрофореза в TAE/TBE буфере в течение 10-20 минут.

sulfo-Cyanine7.5 дикарбоновая кислота — бифункциональный флуоресцентный краситель для ближнего ИК-диапазона, содержащий две карбоксильные группы. Реагент можно применять для кросс-сшивки двух фрагментов с одновременным введением флуоресцентного красителя для ИК-диапазона. Активацию карбоксигрупп можно провести с помощью карбодиимида.