Биореактивы

Cyanine5.5 — флуорофор, испускающий свет в дальней красной области спектра, который широко используется для мультиплексной количественной ПЦР. Коммерческие шестиканальные приборы для ПЦР в реальном времени часто имеют канал для Cyanine5.5. Этот фосфорамидит можно использовать для синтеза 5’-меченых олигонуклеотидов путем прямого мечения в олигонуклеотидном синтезаторе. Структура функциональной группы фосфорамидита, которая присоединена к вторичному атому углерода, обеспечивает дополнительную устойчивость к перегруппировке Арбузова. Это помогает проводить синтез в течение более длительного времени по сравнению с фосфорамидитами, полученными из первичных спиртов.

Описание фермента. TEV-протеаза расщепляет белки по специфическому сайту из семи аминокислотных остатков следующего состава: Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln ↓ Gly/Ser (E-N-L-Y-F-Q ↓ G/S). Данный продукт представляет собой рекомбинантную TEV протеазу, содержащую последовательность из шести гистидинов, позволяющую удалить фермент из реакционной смеси с помощью никель-хелатной хроматографии. Применение. Удаление аффинного тега после очистки белка. Происхождение фермента. Фермент получен из рекомбинантного штамма Еscherichia coli.

G-квадруплексы (G4s) представляют собой вторичные структуры, образующиеся в ДНК и РНК за счет неканонических водородных связей между четырьмя гуаниновыми основаниями [1,2]. В ядре ДНК G4s связаны с эпигенетической регуляцией экспрессии генов посредством их взаимодействия с регуляторными белками, такими как транскрипционные факторы и модификаторы хроматина [3,4]. РНК G4s связаны со сплайсингом, транспортом и регуляцией трансляции РНК, а также с РНК-опосредованными стрессовыми реакциями в цитоплазме клетки [5-7]. TOR-G4 — производное тиазолового оранжевого, недавно синтезированный флуоресцентный индикатор G4s [8]. TOR-G4 является низкомолекулярной альтернативой иммунохимии со специфичными к G4 антителами. TOR-G4 позволяет визуализировать G4s на основе изменений продолжительности флуоресценции индикатора при связывании им нуклеиновой кислоты. Продолжительность флуоресценции TOR-G4 самая высокая в присутствии G4s и значительно ниже с другими последовательностями. Внутри клеток TOR-G4 преимущественно колокализуется с РНК в цитоплазме и ядрышках, что делает его первым прижизненным зондом, валидированным для изучения роли РНК G4s в функционировании клеток. TOR-G4 подходит для визуализации РНК G4s с помощью FLIM [8].

Hoechst S769121 (Nuclear Yellow) — проникающий в клетки желтый флуоресцентный краситель, связывающийся с участками, богатыми аденином и тимином, в малой бороздке двухцепочечной ДНК. Хотя Nuclear Yellow может связываться со всеми нуклеиновыми кислотами, нити дцДНК, богатые АТ, значительно усиливают его флуоресценцию. Nuclear Yellow используется во флуоресцентной микроскопии, флуорометрии и проточной цитометрии для окрашивания и измерения ДНК-содержимого в живых и фиксированных клетках. Его обычно используют в сочетании с ретроградными трейсерами, такими как True Blue, для двухцветной визуализации нейронов. Nuclear Yellow также можно использовать для фотоконверсии диаминобензидина (DAB) в электронно-плотный продукт, что применяется в световой и электронной микроскопии. Рекомендуемая концентрация красителя для окрашивания бактерий или клеток эукариот составляет 0,1–10 мкг/мл.

Антитела козы к иммуноглобулину IgG человека: пероксидаза идеально подходят для использования в методах иммуноферментного анализа и вестерн блота. В ИФА имеют следующую специфичность: IgG человека 100 % IgA человека <5% IgM человека <5% IgG - основной вид сывороточных иммуноглобулинов, участвующих в иммунном ответе. Молекула IgG состоит из двух тяжелых и двух легких цепей и имеет молекулярную массу около 150 кДа. IgG составляет 70-75% всей фракции иммуноглобулинов. Благодаря своим размерам является единственной фракцией иммуноглобулинов, способной к транспорту через плацентарный барьер. Дефицит IgG в организме ослабляет сопротивляемость к инфекциям.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C. Допускается хранение буфера при 4-10°C в течение 3 месяцев. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Наименование показателя Норма Внешний вид Бесцветные кристаллы Температура плавления, °C 117-122 Потери при высушивании, %, не более 0.3 Массовая доля основного вещества в пересчете на абсолютно сухое вещество, % 99-101 (реакция с нитратом серебра). Содержание железа (Fe), не более 5 ppm Пропускание(1 см/6 M в воде ВЭЖХ класса) при 280 нм, не более 0.6 Пропускание(1 см/6 M в воде ВЭЖХ класса) при 300 нм, не более 0.1 pH (1 M) 4.7 – 7.0 ДНКазы и РНКазы, Не обнаруживаются.

Набор OneTube RT-PCR TaqMan предназначен для одноэтапного анализа РНК методом ПЦР-РВ с использованием флуоресцентных зондов типа TaqMan. Набор позволяет быстро и надежно проанализировать большое количество образцов РНК, в том числе в высокопроизводительных приложениях. Для амплификации используют праймеры и зонды типа TaqMan, специфичные к кодирующим участкам генома, референсный краситель ROX (при необходимости) и универсальный ОT-ПЦР протокол. Преимущества: • Использование флуоресцентных зондов типа TaqMan. • Простой контроль наличия геномной ДНК в пробах РНК: ревертаза OneTube добавляется в реакционную смесь отдельно, что позволяет включать в постановку ПЦР контроль «No RT» (реакция без обратной транскрипции). • Снижена вероятность контаминации по сравнению с использованием двухстадийного протокола синтеза кДНК и ПЦР. • Сокращение времени подготовки и проведения реакции

Сайт узнавания и позиция гидролиза: RAATTY R↑AATTY YTTAAR YTTAA↓R Источник: Arthrobacter citreus Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25 50 50 100 10 100 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 50°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Алкин тетраметилродамина (TAMRA), чистый 6-изомер. TAMRA – широко распространённый краситель, используемый в количественной ПЦР. Он образует FRET-пару с флуоресцеином (FAM) (где TAMRA – акцептор, FAM – донор). Это производное - терминальный алкин для катализируемой солями меди реакции клик-химии. В результате азид-алкинового циклоприсоединения (CuAAC) алкин TAMRA может быть конъюгирован с различными азидами.

Биотин-ПЭГ4-тетразин— соединение для биотинилирования методом безмедной клик-химии. Тетразины крайне быстро взаимодействуют с терминальными алкенами и транс-циклооктенами в реакциях Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями (Inverse electron demand Diels-Alder ligation, IEDDA). Тетразины также могут реагировать с некоторыми напряженными циклоалкинами. Биотин-меченые соединения могут быть связаны с авидином или стрептавидином для дальнейшей их очистки или детекции. Биотиновая группа имеет относительно небольшие размеры и не влияет на биологическую активность биотинилированных белков. Данный реагент содержит длинный линкер PEG4, который отделяет остаток биотина от молекулы-мишени, обеспечивая эффективное его связывание с авидином или стрептавидином. Линкер также повышает растворимость соединения в воде, облегчая тем самым биоконъюгацию.

Водорастворимый краситель sulfo-Cyanine3 в виде свободной карбоновой кислоты. Реагент можно использовать в качестве референсного красителя в канале Cy3®, в исследованиях фармакокинетики, а также в контрольных экспериментах параллельно с биомолекулами, мечеными sulfo-Cyanine3. Карбоксильную группу можно активировать карбодиимидами и использовать для ацилирования аминогрупп и этерификации по Штеглиху. Спектры поглощения и эмиссии идентичны флуорофору Cy3®.