Биореактивы

Буферы 2X Encyclo GC предназначен для работы со смесью полимераз Encyclo. Концентрация ионов магния в 2X Encyclo GC буфере составляет 7 мM. При использовании в рекомендованных разведениях каждый буфер обеспечивает 3,5 мM концентрацию ионов магния в ПЦР реакции. 2Х Encyclo GC буфер рекомендуется для работы со сложными для амплификации фрагментами, например, с фрагментами, богатыми GC участками (>65% GC). При замораживании в 2X Encyclo GC буфере может образовываться осадок. В этом случае перед применением буфер следует прогреть на 50°C до полного растворения осадка и перемешать на вортексе. При использовании Encyclo GC буфера следует внести следующие изменения в стандартную программу ПЦР: • увеличить продолжительность предварительной денатурации до 2 мин; • уменьшить температуру отжига праймера Tm на 2- 5°C относительно расчетной величины; • число циклов увеличить на 2–3 цикла ПЦР относительно ожидаемого, при отсутствии ПЦРпродукта следует добавить как минимум 10 циклов, после чего проанализировать продукт на геле.

TAMRA (известный также как TMR или тетраметилродамин) — ксантеновый краситель, используемый для мечения биомолекул на протяжении уже десятков лет. Ксантеновые красители доступны в виде двух изомеров (обозначаемых как 5- и 6-изомеры). Их фотофизические свойства практически идентичны, но изомеры требуют разделения для того, чтобы избежать «двоения» и размывания пиков меченых продуктов на хроматографии и полос на электрофорезе. Этот продукт — чистый 6-изомер ТАМРА малеимида, предназначенный для мечения белков и пептидов по тиольным (SH) группам.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GGTACC G↑GTACC CCATGG CCATG↓G Источник: Acinetobacter calcoaceticus 65 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда(dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dcm-) Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 25 75 100 10 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (СmCWGG): GGTACCWGG. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W. Для фасовок Turbo (E003T и E004T) прикладывается только буфер ROSE. Примечание: Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.

Антитела кролика к иммуноглобулину IgA человека: биотин идеально подходят для использования в методах иммуноферментного анализа. В ИФА имеют следующую специфичность: IgA человека 100 % IgM человека <5% IgG человека <5% Сывороточный IgA обычно существуют в виде мономеров, но могут присутствовать в виде димеров (около 15%). Димерные молекулы IgA удерживаются за счет J-цепи. Существует два подкласса IgA - IgA1 и IgA2 - различающиеся дисульфидными мостиками в шарнирной области. Молекулы IgA содержат много углеводных участков и не связывают комплемент.

Sulfo-Cyanine5.5 — краситель с эмиссией в дальней красной области, около ближнего ИК-диапазона. Он нашел применение в неинвазивном ИК-имиджинге целых организмов. Это производное — sulfo-Cyanine5.5 ДБЦО — содержит фрагмент азадибензоциклооктина (DBCO или АDIBO) для конъюгации с азидами в отсутствие катализатора. Благодаря структуре ДБЦО, его реакция с азидами протекает без катализатора невероятно быстро, на порядки быстрее, чем катализируемая реакция азидов с терминальными алкинами. Благодаря этому, данный реагент предпочтителен для конъюгации sulfo-Cyanine5.5 с различными молекулами, содержащими азидогруппы.

Стерильный раствор. Область применения: клеточная биология, медицина.Условия хранения: в защищенном от света месте при температуре 4-15 º С.Условия транспортировки: те же, что и для хранения, допускается кратковременная (несколько дней) перевозка при комнатной температуре. Срок годности 3 года.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCCGC(N)4 CCCGC(N)4↑ GGGCG(N)6 GGGCG(N)6↓ Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Fau I из Flavobacterium aquatili Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 25 50 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 55°С Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.

ПЭГ4 диазид - гидрофильный линкер с двумя азидогруппами. Их можно модифицировать с помощью клик-химии или реакции Штаудингера. С помощью этого диазида можно синтезировать димерные молекулы, соединенные гидрофильным линкером.

Тетраметилродамин (TAMRA) - ксантеновый краситель с эмиссией в оранжевой области. Этот краситель является FRET-акцептором для флуоресцеина (FAM) и иногда используется как тушитель для него. TAMRA, как и другие ксантены, существует в виде двух изомеров (5- и 6-), обладающих очень близкими спектральными свойствами. Этот азид - производное 6-TAMRA. Его можно конъюгировать с терминальными алкинами с помощью медь-катализируемой реакции клик-химии (CuААЦ) , а также с напряженными циклоалкинами (например, циклооктинами) по реакции стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения (СПААЦ).

Антитела козы к коллагену IV человека, аффинно-очищенные, идеально подходят для использования в методах вестерн-блота и иммуногистохимии (парафиновые срезы тканей), так как они связываются как с нативным, так и с термически денатурированным коллагеном IV типа. Коллаген IV типа - основной компонент базальных мембран. Одной из основных функций коллагена IV типа является поддержание структуры тканей в процессе эмбриогенеза, ремоделинга и регенерации. Молекула коллагена IV типа является лигандом для интегринов, рецепторов на поверхности клеток, обеспечивая клеточную адгезию, миграцию и дифференцировку.

Амино-11-ddUTP - терминирующий трифосфат для ферментативного мечения 3'-конца ДНК аминогруппой. Нуклеотид включается в ДНК Taq-полимеразой, секвеназой, фрагментом Кленова. ДНК с аминогруппой может быть помечена активированными эфирами, в том числе флуоресцентных красителей.

DusQ 3 - тушитель для дальнего красного и ближнего ИК-диапазона, например для красителя Cyanine5.5. Тушитель можно присоедининть к 3'-концу олигонуклеотида в процессе автоматизированного олигонуклеотидного синтеза, используя этот носитель. DusQ 3 чувствителен к нуклеофильным реагентам, поэтому отщепление надо проводить осторожно в контролируемых условиях. Мы рекомендуем использовать феноксиацетил-защищенные мономеры (Ultramild). Альтернативным вариантом является использование активированного эфира DusQ 3 для пост-синтетического введения тушителя.