Биореактивы

Азид для конъюгации с помощью медь-катализируемой и безмедной стерически промотируемой клик-реакций. Предназначен для мечения флуорофором BDP TR — ярким красителем с эмиссией в красной области спектра. Этот краситель на основе бордипиррометена содержит арильные заместители, подобранные для соответствия спектров его поглощения и эмиссии каналу ROX. В то время как краситель ROX склонен к окислению, BDP TR к нему устойчив. Он также характеризуется очень высокой яркостью и фотостабильностью.

ПЭГ3-тетразин — монореакционноспособное производное, позволяющее конъюгировать гидрофильный остаток триэтиленгликоля (ПЭГ3) посредством реакции Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями (IEDDA) с напряженными олефинами — транс-циклоалкенами и некоторыми циклоалкинами.

Твердофазный носитель, модифицированный красителем родаминового ряда TAMRA для синтеза олигонуклеотидов с 3'-концевой меткой. Содержит чистый 5-изомер флуоресцентного красителя, излучающего в красной области спектра. Этот носитель CPG 500 Å обеспечивает оптимальный выход олигонуклеотидов длиной до 50 оснований. Носители с TAMRA позволяют вводить репортер/тушитель в дважды меченые зонды, такие как TaqMan, для использования в ПЦР режима реального времени и в экспериментах с переносом энергии FRET.

SIMA-dT фосфорамидит используется при синтезе олигонуклеотидов для введения в последовательность красителя дихлордифенилфлуоресцеина (SIMA), как правило, за счёт замены природного дезокситимидина (dT). SIMA как более стабильный в основной среде краситель, чем HEX, позволяет проводить деблокирование в жестких условиях, используя как концентрированный раствор аммиака (до 6-8 часов при 55 градусах), так и AMA (смесь 1:1, концентрированный водный аммиак / 40% водный метиламин) при комнатной температуре или при 65 градусах.

Малеимид Cyanine3 - производное красителя, реагирующее с тиолами. Этот реагент используется для присоединения флуорофора Cyanine3 (аналога Cy3®) к белкам и пептидам, содержащим остатки цистеина, а также к другим молекулам, содержащим тиольную (меркаптановую) функциональную группу (например, олигонуклеотидам с тиольной модификации). Остатки цистина и другие дисульфиды перед проведением реакции следует восстановить до тиолов. Для этого хорошо подходит трис(карбоксиэтил)фосфин (TCEP), но не меркаптоэтанол и не дитиотреит, которые сами содержат тиольные группы. Мечение малеимидами происходит селективно и с высокой эффективностью. Для мечения антител и других белков, чувствительных к добавлению органических растворителей, мы рекомендуем Малеимид sulfo-Cyanine3 - это водорастворимый реагент, который позволяет проводить мечение в полностью водной среде.

sulfo-Cyanine5 — флуоресцентный краситель дальней красной области спектра, широко используемый для мечения биомолекул. Максимумы поглощения и эмиссии sulfo-Cyanine5 находятся на 646 и 662 нм, соответственно. Красители с максимумом флуоресценции в дальнем красном диапазоне (более 650 нм) широко используются в различных методах визуализации благодаря низкому уровню фоновой флуоресценции в данной области спектра. Кроме этого, они используются в мультиплексной детекции вместе с красителями ближнего красного, оранжевого, зеленого и синего диапазонов. Биотин, или водорастворимый витамин Н, играет важнейшую роль в реакциях клеточного метаболизма. Он с высокой аффинностью и некооперативно связывает авидин, гликопротеин белка куриного яйца, а также стрептавидин (бактериальный аналог авидина) и нейтравидин (дегликозилированный авидин). Таким образом, конъюгат sulfo-Cyanine5 с биотином может использоваться для качественной и количественной оценки сайтов связывания авидина в биологических образцах различного происхождения. Реагент хорошо растворим в воде, его флуоресценция не зависит от рН в диапазоне от pH 4 до pH 10. Гибкий ПЭГ3-линкер между биотином и sulfo-Cyanine5 предотвращает стерические затруднения при связывании конъюгата с авидином. Конъюгат sulfo-Cyanine5-биотин может использоваться в различных методах для визуализации целевых молекул (например, для мечения первичных и вторичных антител для Вестерн-блоттинга, иммуноанализа, цито- и гистохимии, проточной цитофлуориметрии), измерения констант связывания и диссоциации, биосенсоров на основе стрептавидина и т. д.

Смесь ProbeMaster®️ UNI подходит как для проведения количественной ПЦР, так и для амплификации ДНК с последующей детекцией результатов методом электрофореза. Объем 5-кратной смеси 500 мкл рассчитан на проведение 100 реакций объемом 25 мкл. Готовая 5-кратная реакционная смесь содержит необходимые компоненты для проведения ПЦР, ее состав оптимизирован для получения идеальных результатов по процессивности и специфичности амплификации (содержит Hot-start полимеразу). В случае постановки реакции кПЦР, для детекции флуоресценции следует использовать ДНК-зонд, меченный флуорофором и тушителем (гидролизуемые зонды, "молекулярные маяки", праймеры типа "скорпион") или два зонда, меченных флуорофорами, образующими FRET-пару (вы можете заказать синтез зондов в Lumiprobe). Помимо ДНК-зондов, для детекции флуоресценции может использоваться интеркалирующий краситель dsGreen (dsGreen). Из-за отсутствия в составе UDG/dUTP смесь PCR/qPCR может использоваться для рутинных задач по клонированию и других задач, требующих дальнейшего использования продукта ПЦР после амплификации. Для постановки реакции смешайте в пробирке смесь PCR/qPCR, праймеры, ДНК, воду и зонд/краситель (в случае кПЦР). Формат ПЦР: стандартная ПЦР (с последующим анализом методом гель-электрофореза), количественная ПЦР (ПЦР-РВ) с применением интеркалирующих красителей типа dsGreen или гидролизуемых зондов Состав реакционной смеси: HS Taq ДНК-полимераза, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, ПЦР-буфер (содержит Mg2+) Совместимость с оборудованием: совместим с амплификаторами любого типа Возможные приложения: кПЦР, стандартная ПЦР, ОТ-ПЦР, генотипирование, ПЦР для проверки колоний, получение продукта для ТА-клонирования и др.

Алкиновое производное красителя AF 488 для медь-катализируемой реакции циклоприсоединения к азидам (CuAAC). Используется для флуоресцентного мечения азидированных биомолекул, полимеров и поверхностей. AF 488 — сульфированный родамин, яркий, фотостабильный и гидрофильный флуорофор, излучающий в зеленом канале (максимум поглощения — 495 нм, максимум эмиссии — 519 нм).

Лаурдан (6-додеканоил-2-диметиламинонафталин) — проникающий в мембраны флуоресцентный индикатор, высокочувствительный к физическому состоянию окружающих его фосфолипидов. Лаурдан состоит из цепочки лауриновой кислоты, связанной с молекулой нафталина. Гидрофобный хвост жирной кислоты внедряет молекулу индикатора в липидный бислой мембраны. Нафталиновая часть молекулы локализуется на уровне глицериновых остовов мембранных фосфолипидов. Химическая структура и мембранное расположение Лаурдана делают его чувствительным к присутствию и подвижности молекул воды в липидном бислое. Количественное определение генерализованной поляризации Лаурдана можно использовать для идентификации фосфолипидной фазы. При возбуждении длиной волны 340 нм значения генерализованной поляризации составляют 0,6 для гелевой фазы и −0,2 для жидкокристаллической фазы. Генерализованная поляризация Лаурдана не зависит от полярной головной группы и pH в диапазоне от 4 до 10. Лаурдан подходит для визуализации мембран методами генерализованной поляризации и сканирующей флуоресцентной корреляционной спектроскопии. Его также можно использовать для визуализации липидных рафтов (липидных микродоменов) в живых и фиксированных клетках и целых тканях с помощью мультифотонной микроскопии. Максимумы эмиссии Лаурдана составляют 440 нм и 490 нм в гелевых и жидкокристаллических мембранах, соответственно. Чтобы приготовить концентрированный стоковый раствор Лаурдана с концентрацией до 20 мМ, растворите его либо в ДМФ, либо в ацетонитриле.

Тетраацетилированный N-(4-пентиноил)маннозамин (Ac4ManNAl) — меченый алкином моносахарид, который используется в качестве инструмента для исследования гликопротеинов путем метаболического мечения in vivo и последующего хемоселективного лигирования. Ac4ManNAl — проникающий внутрь клеток искусственный сахар, который метаболизируется и встраивается в клетку вместо своего природного моносахаридного аналога — N-ацетилманнозамина (ManNAc). Образующиеся при этом алкинсодержащие гликопротеины могут быть обнаружены с помощью медь-катализируемой (CuAAC) клик-реакции с флуоресцентно-мечеными азидами или биотин-азидом.

Антитела мыши к Аполипопротеину E человека, моноклональные, связываются с аполипопротеином Е человека и не реагируют с другими белками плазмы крови человека. Аполипопротеин (АпоЕ) входит в состав аполипоротеином липопротеинов низкой плотности имеет молекулярную массу 34 кДа. Данный белок преимущественно синтезируется в печени и макрофагах. АпоЕ играет важную роль в транспортировке триглицеридов в ткани печени и распределении холестерина между клетками. Одна из изоформ АпоЕ является важнейшим генетическим фактором риска болезни Альцгеймера.

Биотин-ПЭГ2-амин — бифункциональная молекула на основе диэтиленгликоля (ПЭГ2), содержащая биотин и первичную аминогруппу. Реагент позволяет метить различные биомолекулы (такие как ДНК, олигонуклеотиды и белки) биотином за счет реакции амино-группы с NHS-эфирами или карбоновыми кислотами в присутствии EDC или HATU. Биотин-меченые соединения могут быть затем связаны с авидином или стрептавидином для дальнейшей их очистки или детекции. Короткий ПЭГ2-линкер отделяет остаток биотина от молекулы-мишени, обеспечивая эффективное его связывание с авидином или стрептавидином. Линкер также повышает растворимость соединения в воде, облегчая тем самым биоконъюгацию.