Биореактивы

Дибензоциклооктин (ДБЦО, DBCO, ADIBO) - один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (т.н. SPAAC, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). Скорость взаимодействия ДБЦО с азидами значительно выше, чем у других циклооктинов, а также Cu-катализируемой клик-реакции (CuAAC). В отличие от других циклооктинов, DBCO не вступает во взаимодействие с тетразинами, что позволят использовать его в биоортогональных реакциях совместно с транс-циклооктенами и тетразинами. AF 555 — гидрофильный флуорофор с высокими квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью, альтернатива тетраметилродамину (TAMRA, TMR) и Cyanine3. AF 555 ДБЦО позволяет проводить флуоресцентное мечение азид-содержащих биомолекул внутри живых клеток, целых организмов и неживых образцах.

sulfo-Cyanine7.5 диметил — нефункционализированный водорастворимый краситель, обладающий яркой флуоресценцией в ближнем ИК-диапазоне. Обладает высоким коэффициентом мольной экстинкции, благодаря чему может использоваться как метка для различных технических применений.

Азидопроизводное флуоресцеина (FAM), чистый 5-изомер. Флуоресцеин до сих пор остается одним из наиболее популярных флуорофоров для мечения биомолекул. Большая часть приборов, предназначенных для детекции флуоресценции, начиная от планшетных сканеров флуоресценции и заканчивая флуоресцентными микроскопами, имеют FAM-канал для детекции флуоресцеина. Флуоресцеин часто используется в измерениях поляризации флуоресценции. Посредством клик-реакции азидопроизводное флуоресцеин можно присоединить к любой молекуле, имеющей алкиновую группу. FAM азид поставляется как в твердом виде, так и в виде раствора в DMSO для использования в нашем рекомендуемом протоколе.

JOE - ксантеновый краситель, производное флуоресцеина, содержащие метоксигруппы и атомы хлора. Этот флуорофор представляет интерес для мечения олигонуклеотидов. Его спектры поглощения и эмиссии попадают в канал, промежуточный между FAM и TAMRA. Этот флуорофор можно ввести в олигонуклеотид с помощью фосфорамидита. Он совместим со стандартными условиями деблокирования. Этот продукт содержит чистый 5-изомер красителя JOE.

TET фосфорамидит для синтеза флуоресцентно-меченых олигонуклеотидов, чистый 6-изомер. TET, тетрахлорфлуоресцеин — производное флуоресцеина с эмиссией в зеленой области спектра (максимум поглощения и эмиссии флуоресценции при 519 нм и 535 нм соответственно). TET фосфорамидит используется для синтеза флуоресцентно-меченых праймеров и гибридизационных зондов для количественной ПЦР. TET можно использовать в паре с тушителем флуоресценции DusQ1 (удобно использовать вместе с носителем DusQ1 CPG 500 с размером пор 500 Å). 5’-меченые праймеры используется в паре с немеченым обратным праймером для амплификации с помощью ПЦР микросателлитов и последующего фрагментного анализа. Продукты амплификации с TET-меткой можно анализировать на различных секвенаторах для проведения капиллярного электрофореза, в том числе на ABI PRISM® 310 Genetic Analyzer.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCATGG C↑CATGG GGTACC GGTAC↓C Источник: Bacillus species 19 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер 2W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 50 75 10 5 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Bsp19I гидролизует полуметилированный по первому цитозину сайт 5`-(5mC)CATGG-3`/3`-GGTACC-5` и не гидролизует метилированные сайты 5`-(5mC)CATGG-3`/3`-GGTAC(5mC)-5` и 5`-(4mC)CATGG-3`/3`-GGTAC(4mC)-5`. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2W, BSA (кроме E047T и E048T). Для фасовок Turbo (E047T и E048T) прикладывается буфер 2W+. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Гетероциклическое соединение 4,4'-этилендиморфолин, известное также как 1,2-диморфолиноэтан (DME, ДМЭ) имеет в структуре морфолиновые циклы и служит лигандом для приготовления комплексов переходных металлов, таких как Mn(II), Fe(II), Co(II), Ni(II), Cu(II), Zn(II). Лиганд и соответствующие комплексы можно встретить в исследованиях, посвящённых разработке покрытий на основе координационных соединений переходных металлов и активных веществ с антибактериальными свойствами.

6-Флуоресцеиновое (FAM) производное уридинтрифосфата (UTP). FAM — флуорофор с высоким квантовым выходом, флуоресцирующий в зеленой области спектра с максимумом при 513 нм. 6-FAM-11-UTP может быть использован в качестве субстрата для РНК-полимераз T7, T3 и SP6 в процессе in vitro транскрипции. РНК-зонды, полученные с помощью этого метода, подходят для флуоресцентной гибридизации in situ, в том числе мультиплексной, и Нозерн-блота. Кроме этого, флуоресцентно-меченая кРНК может использоваться для анализа профилей экспрессии генов с использованием микрочипов.

Tersus полимераза представляет собой специально разработанную смесь термостабильных ДНК полимераз для высокоточной и специфичной амплификации фрагментов ДНК с широкого спектра матриц. Tersus полимераза комплектуется улучшенным Tersus Plus буфером, увеличивающим эффективность ПЦР. Область применения: • Амплификация фрагментов ДНК для переклонирования. • Сайт-направленный мутагенез. • Амплификации ДНК-фрагментов для дальнейшего секвенирования. • Высокоспецифичная ПЦР со сложных ДНК матриц. • ПЦР в реальном времени с интеркалирующими красителями

Азидопроизводное красителя AF 555 для конъюгации с терминальными алкинами посредством медь-катализируемой клик-реакции или с напряженными алкинами посредством безмедной безмедной клик-реакции. AF 555 — гидрофильный флуорофор с высокими квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью, альтернатива тетраметилродамину (TAMRA, TMR) и Cyanine3. Он предназначен для различных применений, включая цитометрию и микроскопию.

Готовые к работе лентивирусные частицы LVT-TagRFP, несущие ген флуоресцентного белка TagRFP, предназначены для трансдукции клеток. Лентивирусный вектор эффективно встраивается в геном клеток-мишеней, вызывая стабильную экспрессию флуоресцентного белка TagRFP через 48-72 часа после добавления к клеточной культуре.

5X буфер для синтеза первой цепи кДНК предназначен для использования с ревертазами MMLV, Mint и Magnus.