Биореактивы

Иммуноглобулины IgG овцы (S Igg) выделены из сыворотки крови животного методом сульфатного осаждения, с последующей очисткой методом ион-обменной хроматографии. В препарате S Igg содержится около 95% иммуноглобулинов IgG овцы и незначительная примесь иммуноглобулинов IgA и иммуноглобулинов IgM (не более 2%).

BDP 558/568 азид - производное бордипиррометенового красителя, содержащее функциональную азидогруппу. Максимумы поглощения и эмиссии BDP 558/568 близки к соответствующим значениям для Cyanine3. BDP 558/568 использовался ранее главным образом для исследования липидов в виде C12 производного, но наличие азидогруппы позволяет легко конъюгировать этот краситель с разнообразными биомолекулами.

Бутирил-L-карнитин-(N-метил-d3) хлорид — один из эфиров карнитина, меченных стабильными изотопами, или C4 карнитин-d3, в котором три атома водорода заменены дейтерием (d3). Он используется для количественного определения ацилкарнитинов методами газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС) и жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС).

Амино-11-dCTP имеет модификацию по основанию в 5-м положении пиримидинового цикла для введения первичных аминов в ДНК в ходе ферментативного синтеза, для возможностей последующей модификации с помощью амин-реактивных агентов. Модифицированные нуклеотиды, включая дезоксицитидинтрифосфат (dCTP), используются для введения в ДНК модифицированных нуклеозидов с функциональными группами. Данный реагент является носителем аминогруппы на удлинённом линкере.

Референсный краситель для ПЦР реального времени (реалтайм-ПЦР). Рекомендуется использовать этот реагент для нормализации интенсивности флуоресценции зондов и интеркалирующих красителей типа dsGreen. Реагент содержит 25 μM родамина 101 в 10 мМ Tris-HCl (pH 8.6), 0.1 мМ EDTA и 0.01% Tween®-20. Референсный краситель ROX совместим со всеми амплификаторами, имеющими канал ROX. Большинство приборов рассчитаны на конечную концентрацию ROX от 50 до 500 нМ.

L-Метионин (S-метил-d3) — это меченная дейтерием аминокислота, с применением в области маркировки в ЯМР-спектроскопии и исследований структуры и динамики белков и пептидов.

ProteOrange - краситель для визуализации белков в гелях, аналог SYPRO Orange. Этот флуорофор стирольного типа, содержащий цвитерионный фрагмент. Он селективно связывается с белками в присутствии нуклеиновых кислот, полисахаридов и других молекул. Он подходит для визуализации белков в присутствии додецилсульфата натрия (SDS). Краситель взаимодействует с оболочкой белка, состоящей из SDS, поэтому он демонстрирует меньшую вариацию прокрашивания между различными белками в геле, чем окрашивание Кумасси, и никогда не дает негативного окрашивания. Он хорошо окрашивает гликопротеины. Прокрашивание гелей ProteOrange приблизительно на порядок чувствительнее, чем окрашивание с помощью Кумасси. Так, ProteOrange позволяет детектировать около 3 нг белка на полоску (для Кумасси предел детекции 30 нг). ProteOrange поставляется в виде 5000x раствора в ДМСО; 1 мл этого раствора достаточно для прокрашивания около 200 мини-гелей.

Набор ProteOrange на основе флуоресцентного красителя позволяет измерять концентрацию белка с большей чувствительностью по сравнению со спектрофотометрическим и другими классическими методами количественного анализа белков (Lowry, Bradford, BCA). Краситель ProteOrange, главный компонент данного набора, в свободном виде не обладает выраженной флуоресценцией. В растворе краситель формирует комплексы с молекулами белка, при образовании которых он начинает флуоресцировать. Максимум возбуждения красителя ProteOrange в комплексе с белком находится при ~485 нм, максимум испускания флуоресценции при ~590 нм. Набор можно использовать на любом типе флуориметра с соответствующим источником возбуждения и каналом детекции. В общем случае, рабочий диапазон измеряемых концентраций белка ограничивается чувствительностью прибора. При использовании кюветного флуориметра рекомендуемый измеряемый диапазон концентрации белка от 10 нг/мл до 10 мкг/мл, для планшетного флуориметра — от 100 нг/мл до 10 мкг/мл. В состав набора входит флуоресцентный краситель ProteOrange, буфер для приготовления рабочего раствора красителя и стандарт концентрации белка (БСА, 2 мг/мл). Для измерения концентрации исследуемого белка необходимо приготовить рабочий раствор красителя и развести в нем экспериментальные образцы и образцы с известной концентрацией белка для построения калибровочной кривой. Для приготовления стандартов концентрации белка используется или бычий сывороточный альбумин, входящий в состав набора, или (при наличии) белок, который находится в экспериментальных образцах. Готовые образцы инкубируют 10 минут при 95 °С для денатурации белков, и после остывания до комнатной температуры проводится измерение интенсивности флуоресценции. В зависимости от объема образца количество измерений варьирует от 200 (для объем образца 2,5 мл и объема для измерения 2 мл для стандартной флуориметрической кюветы) до 2000 (для объема образца 250 мкл и объема для измерения 200 мкл для 96-луночного планшета).

Краситель dsSafe — флуоресцентный краситель для прокраски нуклеиновых кислот в агарозных и полиакриламидных гелях. Данный краситель является лучшей безопасной альтернативой бромистому этидию (EtBr) — dsSafe не токсичен, не обладает мутагенной и канцерогенной активностью. dsSafe позволяет визуализировать нуклеиновые кислоты с чувствительностью, аналогичной бромистому этидию. Для возбуждения красителя подходят как классические трансиллюминаторы с УФ-излучением, так и более безопасные для глаз и образцов нуклеиновых кислот трансиллюминаторы с голубым светом. При использовании голубого света для возбуждения dsSafe фоновая флуоресценция ниже, чем при возбуждении бромистого этидия УФ-светом, при этом вырезаемые фрагменты ДНК для последующего клонирования не подвергаются повреждающему действию УФ-излучения, что повышает эффективность клонирования и снижает индуцируемое УФ число нежелательных мутаций. В комплексе с ДНК спектр красителя имеет два пика возбуждения: в ультрафиолетовом (280 нм) и в голубом диапазонах (502 нм), и максимум эмиссии в зеленом диапазоне ~530 нм. Краситель поставляется в виде концентрата 10 000× в ДМСО. Для прокраски геля необходимо добавить краситель в раствор расплавленной агарозы* или окрасить гель после гель-электрофореза в TAE/TBE буфере в течение 10-20 минут.

dsGreen - чувствительный ДНК-связывающий краситель, специфичный в отношении двухцепочечной ДНК и ДНК-РНК-дуплексов. Он широко используется для детекции нуклеиновых кислот в агарозных и полиакриламидных гелях. В отличие от бромистого этидия, dsGreen высокоселективен в отношении двухцепочечных нуклеиновых кислот, не обладает выраженной мутагенной активностью и обеспечивает намного более высокую чувствительность обнаружения нуклеиновых кислот.

ProbeMaster® ROX — готовая 5-кратная реакционная смесь, содержащая все необходимые компоненты для проведения количественной ПЦР с применением интеркалирующих красителей или гидролизуемых зондов. Eе состав оптимизирован для получения идеальных результатов с минимальным значением порогового цикла и высоким уровнем отношения сигнал/фон. Формат готовой реакционной смеси снижает риск контаминации образцов. ProbeMaster® ROX позволяет решать большое количество задач с минимальными затратами времени. Смесь подходит для точного определения содержания ДНК матрицы в пробе и может применяться для определения уровня копийности и экспрессии генов, генотипирования, детекции SNP и других приложений.

DREADD агонист 21 (Соединение 21, C21) представляет собой синтетическое соединение для селективной активации hM3Dq (возбуждающих) и hM4Di (ингибирующих) DREADD (Designer Receptor Exclusively Activated by Designer Drugs) рецепторов, полученных из мускаринового ацетилхолинового рецептора M3 (hM3) человека. DREADD агонист 21 не вызывает активацию самих hM3-рецепторов и проявляет крайне слабое сродство к гистаминовым H1, серотониновым 5-HT2A, 5-HT2C рецепторам и α1A-адренорецепторам (Ki = 6, 66, 170 и 280 нМ соответственно) [1]. DREADD агонист 21 обычно используется в качестве хемогенетического инструмента для удаленного управления активностью нейронов. Он демонстрирует хорошую проницаемость в мозг и способен in vivo активировать нейроны, экспрессирующие hM3Dq DREADD-рецепторы, и подавлять активность нейронов, экспрессирующих hM4Di DREADD-рецепторы [2]. Данный продукт представлен в виде дигидрохлорида, водорастворимой версии DREADD агониста 21.