Биореактивы

Тиазоловый оранжевый (ТО) представляет собой асимметричный цианиновый краситель, флуоресценция которого сильно зависит от его ближнего окружения. ТО практически не светится в растворе, однако тысячекратно усиливает свою флуоресценцию при его введении в двухцепочечные ДНК и РНК. При гибридизации олигонуклеотида, меченного ТО, с комплементарной ему последовательностью, хромофор красителя интеркалирует в образующийся двухцепочечный фрагмент нуклеиновой кислоты. Флуоресценция ТО индуцируется как при взаимодействии с супрамолекулярными объектами, так и при взаимодействии с боковыми цепями аминокислот, что позволяет использовать его для обнаружения не только нуклеиновых кислот и белков, но и других аналитов, таких как ионы и небольшие молекулы. Максимум поглощения ТО с ДНК — 509 нм, максимум излучения — 532 нм. Активированный эфир ТО вступает в реакцию с аминами и хорошо подходит для мечения биомолекул (пептидов, белков, амино-ДНК и др.) в водной среде. ТО активированный эфир может быть полезен для изучения связывания нуклеиновых кислот с другими биомолекулами, например, ДНК-связывающими белками.

FAM (флуоресцеин) - это яркий флуорофор, который может применяться со многими установками, регистрирующими флуоресценцию. FAM - это универсальный краситель, который можно использовать для микроскопии, qPCR и многих других методов, так же как и d экспериментfах, связанных с FRET и анизотропией флуоресценции. Флуоресцеина малеимид (FAM малеимид) - производное FAM, способное вступать в реакцию с тиольными группами для мечения белков, пептидов и других тиолированных молекул.

AF 343 (Кумарин), флуоресцирующий в синей области, используется как лазерный краситель. Данный флуорофор может также использоваться как FRET-донор для красителя FAM (флуоресцеин). AF 343 (Кумарин) X карбоновая кислота имеет функциональную COOH-группу, которую можно активировать для присоединения к аминогруппам белков.

Водорастворимый активированный эфир красителя sulfo-Cyanine3. Предназначен для мечения белков в водных растворах без добавки органического растворителя. Отлично подходит для мечения антител красителем sulfo-Cyanine3, идентичным Cy3®. Этот продукт является полным аналогом активированного эфира Cy3®. Он также заменяет DyLight 549 для любых применений. Несульфированую версию этого реагента - активированный эфир Cyanine3 - рекомендуем для мечения пептидов и амино-олигонуклеотидов.

TET, тетрахлорфлуоресцеин — производное флуоресцеина с эмиссией в зеленой области спектра (максимум поглощения и эмиссии флуоресценции при 519 нм и 535 нм соответственно). TET обладает спектральными свойствами, сходными с R6G, JOE и VIC, широко используемых для мечения ПЦР-зондов красителей. Олигонуклеотиды, меченые TET, часто используются в ПЦР реального времени; получение таких олигонуклеотидов может быть выполнено с помощью клик-химии. Это производное — азид, чистый 6-изомер, для конъюгации TET с другими молекулами с помощью медь-катализируемых и безмедных клик-реакций.

JOE — ксантеновый краситель, производное флуоресцеина, содержащий метоксигруппы и атомы хлора. Его спектры поглощения и эмиссии попадают в канал между FAM и TAMRA/ROX. По этой причине этот флуорофор часто используется для мультиплексной детекции, в том числе при секвенировании ДНК. Это производное — активированный N-гидроксисукцинимидный эфир, использующийся для мечения белков, пептидов, амино-модифицированных олигонуклеотидов и других целевых молекул через конъюгацию с аминами.

Амино-FAM, аминопроизводное флуоресцеин, высокой изомерной чистоты (5-изомер). В отличие от флуорсцеинамина, этот реагента содержит линкер с алифатической аминогруппой, которая является более реакционноспособной. Может реагировать с электрофильными реагентами, такими как активированные эфиры или эпоксиды, вовлекается в ферментативное трансаминирование.

Cyanine2 - активированный эфир красителя для двумерного электрофореза, аналог Cy2® NHS ester minimal dye. Этот реагент расфасован с высокой точностью. Каждая пробирка содержит указанное количество активированного эфира с допуском 10%. Cyanine2 обычно используется в протеомике в качестве внутреннего стандарта в двумерных электрофоретических экспериментах с Cyanine3 и Cyanine5.

Иммуноглобулины IgG человека (H Igg), могут быть использованы в качестве высокоочищенного антигена для иммунизации, рефернс-стандарта, антигена для покрытия пластиковых поверхностей в ИФА и других иммунологических тестах, лиганда для приготовления иммуносорбентов. По данным SDS-Page электрофореза в препарате H Igg содержится: IgG человека > 95 % IgA, IgM человека 2 % Прочие сывороточные белки человека 2 % Иммуноглобулин IgG - основной вид сывороточных иммуноглобулинов, участвующих в иммунном ответе. Молекула IgG состоит из двух тяжелых и двух легких цепей и имеет молекулярную массу около 150 кДа. Биологическая роль IgG разнообразна. Это и антибактериальная защита через механизм комплементзависимого лизиса микробной клетки, и проникновение через плаценту с той же защитной для зародыша функцией, и «армирование» макрофагов, в результате чего они становятся цитотоксическим для трансплантатов и опухолей, и участие в повышенной реактивности аллергического типа.

SNPdetect — термостабильная высокоточная ДНК-полимераза с «горячим стартом», лишена экзонуклеазной активности. SNPdetect используется для детекции однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) и специфичной амплификации фрагментов ДНК длиной до 1 000 п.о. Область применения: • SNP генотипирование: аллель-специфичная ПЦР (AS-PCR), аллель-специфичное удлинение праймера (AS-PEX). • Высокоспецифичная ПЦР, в том числе мультиплексная ПЦР. • ПЦР-РВ с изменением конформации зондов без его разрушения, например, технологии Scorpion, Amplifluor, LUX и др. • HRM, плавление с использованием меченных и немеченных зондов. • ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями.

Буферы 10X Encyclo предназначен для работы со смесью полимераз Encyclo. Концентрация ионов магния в 10X Encyclo буфере составляет 35 мM. При использовании в рекомендованных разведениях каждый буфер обеспечивает 3,5 мM концентрацию ионов магния в ПЦР реакции. 10Х Encyclo буфер подходит для большинства приложений, может быть использован для проведения ПЦР в режиме реального времени с интеркалирующим красителем SYBR Green I или Eva Green.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCWWGG C↑CWWGG GGWWCC GGWWC↓C Источник: Erwinia rhapontici Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер 2W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 25 50 75 10 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2W, BSA. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.