Биореактивы

Азид-ПЭГ6-ОН (азидо-ПЭГ6-спирт) — водорастворимый гетеробифункциональный сшивающий агент с первичной гидроксильной группой, азидной группой и гидрофильным линкером ПЭГ6 между ними. Азидная группа вступает в клик-реакции с алкинами, BCN или DBCO с образованием стабильной триазольной связи. Гидроксильная группа позволяет производить дополнительную ее дериватизацию или замену альтернативными реакционноспособными функциональными группами.

Биотин-ПЭГ3-азид — соединение для биотинилирования методом клик-химии. Реагент позволяет метить алкинилированные молекулы (такие как ДНК, олигонуклеотиды и белки) биотином с помощью катализируемой медью или безмедной клик-реакций. Биомолекулы, меченные биотином, могут быть затем связаны с авидином или стрептавидином для дальнейшей их очистки или детекции. Данное азидопроизводное содержит длинный гидрофильный ПЭГ3-линкер, который разделяет в пространстве остаток биотина и связанную с ним биомолекулу для более эффективного связывания биотина со стрептавидином. Линкер также увеличивает растворимость вещества в воде, что упрощает его конъюгацию. Данный азид может конъюгироваться со многими молекулами.

Смесь OneTube RT-PCRmix предназначена для одноэтапного анализа РНК методом ПЦР-РВ. Смесь позволяет быстро и надежно проанализировать большое количество образцов РНК, в том числе в высокопроизводительных приложениях. Для амплификации используют праймеры, специфичные к кодирующим участкам генома, зонды типа TaqMan или интеркалирующий краситель, референсный краситель ROX (при необходимости) и универсальный ОT-ПЦР протокол. Частный вариант применения: одновременный анализ РНК и ДНК в образце. Этот формат удобен для определения в одном образце РНК- и ДНК-содержащих вирусов, количественной оценки нуклеиновых кислот.

Биотин может связываться со многими белками без потери биологической активности. Продукт биотинилирования обычно детектируется путем специфического связывания с авидином или стрептавидином, что применяется в ряду методов, таких как аффинная хроматография, ИФА, Вестерн-блоттинг, флуоресцентный сортинг (FACS) и внутриклеточное окрашивание. Биотин-X-NHS активированный эфир — производное с С6-спейсером для уменьшения стерических затруднений при конъюгировании с аминокислотами, пептидами или белками путем ковалентного связывания с первичными аминами. Данное соединение применяется для присоединения биотина по первичным аминогруппам в основной среде (pH 8–9).

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCTAGG C↑CTAGG GGATCC GGATC↓C Источник: Arthrobacter species A2 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (HindIII-digest) Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 50 75 100 75 10 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA, 50% глицерин. Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер W+. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Реакционная смесь 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX оптимизирована для постановки ПЦР с SYBR Green I в присутствии референсного красителя ROX, и позволяет получать результаты со значительным превышением уровня сигнала над фоновой флуоресценцией и низким порогом насыщения реакции (cycle threshold, Ct). В состав 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX входят все необходимые компоненты для ПЦР: HS Taq ДНК полимераза, интеркалирующий краситель SYBR Green I, референсный краситель ROX, смесь dNTP, Mg2+, ПЦР буфер. Для постановки ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, ДНК и воду. 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX подходит для Real-Time амплификаторов, требующих высокой концентрации красителя ROX в реакции (например, StepOne, StepOne Plus).

Готовый набор, содержащий все необходимые реагенты для мечения мембран клеток красителем PKH2 с целью последующей оценки клеточной миграции или пролиферации. В наборе используется цианиновый краситель PKH2. В его структуре есть липофильные группы, позволяющие быстро и нековалентно встраиваться в клеточные мембраны практически любых клеток, не влияя на клеточные рецепторы или трансмембранные белки. При этом клетки сохраняют свои биологические свойства и способность к пролиферации, что делает PKH2 отличным флуорофором для изучения как растительных, так и животных клеток in vivo и in vitro. Он также подходит для изучения мембранных везикул. PKH2 испускает свет в зеленой области спектра, с максимумом флуоресценции 504 нм, его можно использовать наряду с другими красителями в многоцветных исследованиях. PKH2 менее стабилен, чем PKH26, и меченные им клетки могут быть исследованы с использованием микроскопии или проточной цитометрии в течение 10-11 дней после окрашивания. Количество измерений, на которое рассчитан набор, может отличаться в зависимости от количества клеток в образце: Набор, содержащий 100 µL красителя PKH2, позволяет проанализировать 25 образцов по 20 миллионов клеток в каждом, при использовании финальной концентрации красителя PKH2 равной 2×10-6 M. Набор, содержащий 500 µL красителя PKH2, позволяет проанализировать 125 образцов по 20 миллионов клеток в каждом, при использовании финальной концентрации красителя PKH2 равной 2×10-6 M. Рекомендуется определить оптимальные количество клеток и концентрацию красителя исходя из типа (ов) клеток и экспериментальных задач. LumiTrace PKH2, набор для мечения клеточных мембран, 14201.

Активированный эфир sulfo-Cyanine5.5 - активированный эфир сульфированного дальнекрасного флуорофора sulfo-Cyanine5.5, аналога Cy5.5®. Этот реагент предназначен для мечения аминогрупп. Он в особенности подходит для модификации таких биомолекул, как антитела и белки, которые требуют конъюгации в водной среде без добавки существенных количеств органического растворителя. Краситель sulfo-Cyanine5.5 хорошо подходит как для неинвазивного имиджинга в ближнем ИК-диапазоне, так и для флуоресцентных приложений, требующих низкого уровня фоновой флуоресценции.

Тест-система для выявления ДНК жвачных животных (быки, бараны) в биологическом материале, пищевых продуктах и кормах для животных методом ПЦР.

BDP 630/650 - это краситель дальней красной области, флуорофор на основе бордипиррометенового ядра, аналог BODIPY 630/650. Краситель специально разработан под канал Cy5, и поэтому может быть использован как альтернатива to Cyanine5 и sulfo-Cyanine5. По сравнению с цианинами у BDP 630/650 большее время жизни флуоресценции, что применяется во флуоресцентно-поляризационном анализе. Яркость BDP 630/650 сравнима с цианиновыми красителями, но при этом у него исключительная фотостабильность. Производное красителя с аминогруппой используется в реакциях с электрофилами, а также для мечения в процессах трансаминирования, каталируемого ферментами.

AF 568 — синтетический флуорофор. Максимум возбуждения AF 568 соответствует 572 нм, максимум эмиссии — 598 нм. Краситель AF 568 может возбуждаться лазером с длиной волны 561 нм, его спектр находится в том же диапазоне, что и спектр техасского красного , TF4 (Tide Fluor™ 4) и sulfo-Cyanine3.5. Поскольку активированный эфир AF 568 обладает яркой и стабильной флуоресценцией и может быть конъюгирован с белками и пептидами, его можно использовать как средство визуализации, например, в вестерн-блоттинге, флуоресцентной микроскопии и проточной цитофлуориметрии.