Биореактивы

10X Taq Turbo буфер для Taq и HS Taq ДНК полимераз (кат. ## PK113S/L/H, PK114, PK017S/L/H, PK018) подходит для использования в большинстве приложений ПЦР, включая ПЦР в режиме реального времени с интеркалирующими красителями SYBR Green I или Eva Green, а также ПЦР с любыми флуоресцентными зондами. Благодаря усовершенствованному составу 10X Taq Turbo буфер обеспечивает значительно более высокую эффективность ПЦР, чем большинство стандартных буферов для Taq ДНК полимераз. Буфер без магния предназначен для постановки реакций, требующих индивидуального побдора концентрации Mg2+. При 25 °C буфер имеет pH=8.6.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCGGCCGC GC↑GGCCGC CGCCGGCG CGCCGG↓CG Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген CciN I из Curtobacterium citreus N. Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: Плазмидная ДНК pUC-AD Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25 50 75 75 100 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo (E203T и E204T) прикладывается только буфер ROSE.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CTCTTCN CTCTTCN↑ GAGAAG(N)4 GAGAAG(N)4↓ Источник: Bacillus stearothermophilus 6 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 75 50 75 100 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Для периода более 30 дней рекомендуется хранить при -70°C. Лигирование: После гидролиза 2-кратным избытком фермента 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и около 80% из них могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 65°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Описание: 100 mM раствор литиевой соли 2`-дезоксиаденозин-5`трифосфорной кислоты в воде. Используется в массовых рутинных ПЦР с небольшой, главным образом до 3 тыс. пар нуклеотидов, длиной продуктов. Тестировано в ПЦР для получения продуктов длиной более 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы. Способ получения: Химический синтез Условия хранения: Хранить при -20°C Хроматографическая чистота не менее 96%. Определяется на HPLC (Column ProntoSIL-120-5-C18AQ) Коэффициент экстинкции: 15200 M-1 X см-1 при λmax = 259 нм Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Описание: 2`-дезоксиаденозин-5`трифосфорной кислоты натриевая соль. Тестирован в ПЦР для получения продуктов длиной 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы. Используется в молекулярной биологии и биотехнологии, включая ПЦР, в т.ч. для получения длинных продуктов, реакции мечения и секвенирования ДНК, а также в медицинской ПЦР-диагностике. Способ получения: Ферментативный синтез Условия хранения: Хранить при -20°C Коэффициент экстинкции: 15200 M-1 X см-1 при λmax = 259 нм Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации dATP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации dATP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Описание: 2`-дезоксицитидин-5`трифосфорной кислоты натриевая соль. Тестирован в ПЦР для получения продуктов длиной 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы. Используется в молекулярной биологии и биотехнологии, включая ПЦР, в т.ч. для получения длинных продуктов, реакции мечения и секвенирования ДНК, а также в медицинской ПЦР-диагностике. Способ получения: Ферментативный синтез Условия хранения: Хранить при -20°C Коэффициент экстинкции: 9300 M-1 X см-1 при λmax = 271 нм Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации dCTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации dCTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Применение: Набор рассчитан на проведение 20 реакций и позволяет сшивать липкие и тупые концы фрагментов ДНК в течении 5 минут при комнатной температуре (25°C). Состав: Высокоактивная Т4 ДНК лигаза, 2х буфер для реакции (132mM Tris-HCl, 20mM MgCl2, 2mM DTT, 2mM ATP, 15% PEG 6000). Условия хранения: Набор хранить при -20°C. Буфер для реакции перед первым использованием рекомендуется разделить на порции и не замораживать более 2-3 раз. Допускается хранение буфера при +4°C в течение 7 дней.

BDP 650/665 алкин — производное красителя BDP, обладающего эмиссией в красной области спектра. Данное производное содержит терминальную этинильную группу для конъюгации с азидами посредством клик-реакции. Спектры поглощения и эмиссии BDP 650/665 идеально подходят для канала Cy5 большинства приборов.

Источник: Выделена из штамма E.coli, инфицированного фагом Т4. Описание: Применяется преимущественно для сшивки тупых концов. Катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5`-фосфатной и 3`-гидроксильными концевыми группами ДНК (РНК). Определение единицы активности: За одну единицу активности Т4 ДНК лигазы принимали количество фермента, необходимое для 50% сшивки HindIII-фрагментов ДНК фага лямбда за 30 мин при 16°С в 20 мкл реакционной смеси при концентрации ДНК 300 mkg/ml. Оптимальный буфер: SE-буфер ДНК лигаза T4 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Примечание: В буфере для Т4 ДНК лигазы допускается выпадение осадка. В этом случае необходимо перед использованием нагреть буфер до 37°С и встряхнуть его несколько раз до исчезновения осадка.Кроме того, стоит избегать многократного замораживания/оттаивания буфера.Поэтому после первой разморозки рекомендуется расфасовать буфер небольшими объемами в отдельные пробирки, хранить при -20°C,и не размораживать аликвоты более 2-3 раз. Допускается хранение размороженного буфера при +4°С в течение 7 дней.

BDP FL - яркий и фотостабильный краситель для канала FAM. Обладает высокой фотостабильностью и квантовым выходом, близким к единице. Этот краситель хорошо подходит для микроскопии и измерений поляризации флуоресценции. Гидразидная группа позволяет легко конъюгировать этот флуорофор с карбонильными соединениями (альдегидами и кетонами).

Готовый набор для мечения антител красителем AF 594, эквивалентом Alexa Fluor® 594. Этот набор содержит все необходимые компоненты (реагенты и расходные материалы) для того, чтобы провести 10 реакций мечения (до 100 мкг антитела на реакцию). Очистка продукта осуществляется с помощью гель-фильтрации на спин-колонках, включенных в набор. Точное измерение количества красителя гарантирует воспроизводимый результат мечения и оптимальное число молекул красителя на молекулу антитела. Очищенные меченые антитела в буфере PBS будут готовы через 40 минут (из них только 10 минут работы руками). Набор совместим с Трис-буфером, азидом натрия, глицерином.

Алкин-ПЭГ4-Амин - это бифункциональный олигоэтинильный линкер, содержащий как аминную группу, легко реагирующую с различными электрофильными агентами (NHS-эфиры, эпоксиды), так и алкинильную группу для реакций клик-химии. Это позволяет легко конъюгировать различные биомолекулы. Достаточно протяженный и высоко гидрофильный ПЭГ4 обеспечивает эффективную конъюгацию и возможность выделения продукта в водных условиях.