Биореактивы

Источник: Выделена из культуры клеток человека линии Raji, мужских лимфобластоподобных клеток из лимфомы Беркитта. Описание: Геномная ДНК из культуры клеток человека линии Raji. Клетки выращивались в питательной среде RPMI-1640 – 90%, сыворотка крови плода коровы – 10%. Способ культивирования – суспензионный. Геномная ДНК выделялась по стандартной методике. Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA. Хранить при – 20°С. Контроль качества: Препарат ДНК не содержит примесей белков и РНК. Примечание: Следует избегать многократного замораживания-оттаивания.

Модифицирующий носитель с размером пор 500 Å предназначен для синтеза олигонуклеотидов длиной до 50 оснований, модифицированных нефлуоресцирующим тушителем DusQ 1 на 3’-конце. Тушитель флуоресценции DusQ 1 характеризуется наиболее эффективным поглощением в диапазоне 480-580 нм, максимум поглощения находится при 534 нм. Подходит для смешанного тушения (сочетание статического и динамического тушения) большого числа флуорофоров, включая Biosearch Blue™, Marina Blue™, Edans, Bothell Blue, FAM™, JOE™, VIC™, R6G, HEX™, TET™, CAL Fluor™ Gold 540, Yakima Yellow™. Может использоваться для создания гибридизационных зондов типа TaqMan, Molecular Beacon, Scorpion.

Азид-ПЭГ2-амин — бифункциональный кросслинкер с терминальными азидо- и аминогруппой. Аминогруппа реагента может быть конъюгирована с карбоксильной группой в составе пептидов, белков или антител после активации последней карбидиимидом (EDC). В свою очередь, терминальная азидная группа легко взаимодействует с различными алкинами в клик-реакциях. Диэтиленгликоль (ПЭГ2) представляет собой короткий гидрофильный линкер с минимальным пространственным разделением биомолекул в составе получаемого конъюгата.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(10 mM Tris-HCl (pH 8.3 при 25°C); 20 mM NaCl, 3 mM MgCl2, 1 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(67 mM Tris-HCl (pH 8.8 при 25°C); 16.6 mM (NH4)2SO4; 0.01% Tween-20.) Отдельно поставляется 50mM MgCl2 Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM KCl; 1 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Реакционная смесь 5X qPCRmix-HS HighROX предназначена для постановки ПЦР в присутствии референсного красителя ROX, и позволяет получать результаты со значительным превышением уровня сигнала над фоновой флуоресценцией и низким порогом насыщения реакции (cycle threshold, Ct). В состав 5X qPCRmix-HS HighROX входят следующие компоненты: высокопроцессивная HS Taq ДНК полимераза, референсный краситель ROX, смесь dNTP, Mg2+, ПЦР буфер. Для постановки ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, матрицу ДНК, воду и краситель/зонд для детекции продукта. 5X qPCRmix-HS HighROX подходит для Real-Time амплификаторов, требующих высокой концентрации красителя ROX в реакции (например, StepOne, StepOne Plus).

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GGTCTCN GGTCTCN↑ CCAGAG(N)5 CCAGAG(N)5↓ Источник: Bacillus stearothermophilus 31 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага T7 Оптимальный буфер: SE-буфер O Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25 75 100 75 25 40 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и около 80% из них могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 55°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется Dcm-метилированием (CmCWGG): GAGACCWGG Не блокируется GGTCT(5mC) метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O, BSA Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE+. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Описание: Набор dNTP (химически синтезированных) состоит из четырех индивидуальных растворов dATP, dCTP, dGTP, dTTP. Концентрация каждого dNTP 100 mM. Тестировано в ПЦР для получения продуктов длиной более 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы. Способ получения: Химический синтез Условия хранения: Хранить при -20°С Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Сайт узнавания: (5mC)G Источник: из штамма E.coli, содержащего клонированный ген ДНК метилтрансферазы SssI из Spiroplasma species strain MQ1. Описание: Модифицирует остатки цитозина (C5) в последовательности узнавания 5’-CG- 3’. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимают количество фермента, необходимое для защиты 1 мкг ДНК фага Лямбда за 1 час при 37ºC в 20 мкл реакционной смеси от гидролиза эндонуклеазой рестрикции BstFNI (5’-CGCG- 3’). Реакционный буфер: SE-буфер O + SAM Условия хранения: 10 mМ Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mМ EDTA, 10 mМ 2-меркаптоэтанол, 100 mМ NaCl и 50% глицерин. Хранить при -20°С. Примечание: Для достижения 100% активности SAM следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 160 μM.

Описание: 100 mM раствор литиевой соли 2`-дезоксигуанозин-5`трифосфорной кислоты в воде. Используется в массовых рутинных ПЦР с небольшой, главным образом до 3 тыс. пар нуклеотидов, длиной продуктов. Тестировано в ПЦР для получения продуктов длиной более 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы Способ получения: Химический синтез Условия хранения: Хранить при -20°С Хроматографическая чистота не менее 96%. Определяется на HPLC (Column ProntoSIL-120-5-C18AQ) Коэффициент экстинкции: 13700 M-1 X см-1 при λmax = 253 нм Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Описание: Представляет собой смесь специальных плазмид гидролизованных определенными ферментами с образованием 12 фрагментов пригодных для использования в качестве стандарта молекулярных весов в агарозном гель-электрофорезе. Длины фрагментов Длина фрагмента, п.н. Масса ДНК, нг Длина фрагмента, п.н. Масса ДНК, нг 3000 120 600 80 2000 120 500 100 1000 160 400 50 900 120 300 30 800 110 200 20 700 70 100 20 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA; 50mM NaCl. Хранить при – 20°С. Примечание: ДНК маркер не предназначен для определения количества ДНК, однако может быть использован для приблизительной оценки путем сравнения интенсивности фрагментов одинакового размера. Мы рекомендуем наносить 1 мкг ДНК маркера на дорожку. Перед использованием в ДНК маркер добавить1/10 объема SE-буфера для нанесения с красителем. Маркер с красителем может храниться при 4-8°С в течение 6 месяцев.