Поиск

Genta-ExoI экзонуклеаза I гидролизует одноцепочечную ДНК в 3 '→ 5' направлении, высвобождая дезоксирибонуклеозид 5'-монофосфат. Не расщепляет цепи ДНК, 3’-конец которых блокирован фосфорильной или ацетильной группой. Активна в ПЦР-буфере. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген экзонуклеазы I E.coli.

5Х Genta Single-tube RT-qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения реакции синтеза кДНК с последующей количественной и/или качественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). 5Х Genta Single-tube RT-qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ОТ-ПЦР компоненты, включая обратную транскриптазу Genta REV М, ДНК-полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ОТ-ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Флуоресцентные зонды представляет собой олигонуклеотид с флуоресцентной меткой и гасителем, который может связываться с цепью ДНК во процессе амплификации. Когда зонд находится в свободном состоянии, оба красителя расположены близко друг к другу, поэтому происходит гашение флуоресценции. В ходе ПЦР на этапе удлинения цепи гибридизовавшийся зонд расщепляется полимеразой, которая обладает 5’-экзонуклеазной активностью, красители разъединяются, и наблюдается флуоресцентный сигнал, пропорциональный количеству амплифицированного продукта. Интенсивность флуоресценции увеличивается в каждом цикле пропорционально скорости расщепления зонда. Использование зондов в ПЦР позволяет повысить точность и селективность реакции. Широкий спектр флуоресцентных красителей: FAM, R6G, VIC, HEX, JOE, TAMRA, ROX, Cy 5 и Cy5.5 Возможность мультиплексного анализа нескольких ДНК-мишеней в одной пробирке. Высокая эффективность ПЦР-РВ. Контроль качества зондов: очистка ВЭЖХ и проверка масс-спектрометрией

Genta Bst ДНК-полимераза — большой фрагмент ДНК-полимеразы Bacillus stearothermophilus (полипептид размером 67 кДа). Фермент обладает 5’-3’ полимеразной активностью, но не имеет 5’-3’ и 3’-5’ экзонуклеазную активность. Genta Bst ДНК-полимераза обладает вытесняющей активностью и может использоваться для изотермической амплификации ДНК в формате LAMP/RT-LAMP. Оптимальная температура активности фермента — 60-65°C.