Поиск

Фьюжн ДНК-полимераза является рекомбинантным полипептидом, состоящим из слитых термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК- связывающего белка термофильных архей вида Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Белок Sso7d связывается с малой бороздкой двухцепочечной ДНК и дополнительно стабилизирует комплекс полимеразы с матрицей. Благодаря этому Фьюжн ДНК-полимераза, обладает повышенной процессивностью, точностью синтеза, скоростью амплификации фрагментов и повышенной устойчивостью к ингибиторам ПЦР по сравнению с нативной Pfu ДНК- полимеразой [1]. Фьюжн ДНК-полимераза обладает 5’→3’ полимеразной активностью, 3’→5’ экзонуклеазной активностью и синтезирует продукты с тупыми концами. Фьюжн ДНК-полимераза является хорошим выбором для рутинного клонирования и может использоваться для получения методом ПЦР длинных или сложных ампликонов. Примеры использования Фьюжн ДНК-полимеразы представлены в конце описания. Фьюжн ДНК-полимераза выделена из штамма E.coli, содержащего плазмиду с клонированным фрагментом ДНК, состоящим из слитых генов термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК-связывающего белка Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Одна единица активности соответствует количеству фермента, необходимому для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию ДНК за 30 мин при 74°С.

5-кратный реакционный буфер, подходящий для использования в большинстве приложений ПЦР, включая ПЦР в режиме реального времени. При необходимости подбора концентрации ионов Mg2+ в реакционной смеси рекомендуется использовать ПЦР-буферы, не содержащие солей магния. Стандартный 5х ПЦР-буфер содержит 10 мМ MgSO4, что соответствует 2 мМ MgSO4 в реакционной смеси.

5х Genta ТЕ-буфер для разведения нуклеиновых кислот. Состав: 10 мМ Трис*НCl, 1 мМ ЭДТА, pH 8,0. Приготовлен на сверхчистой воде.

«ALPREP Plasmid Magnetic» предназначен для выделения плазмидной ДНК из жидких культур бактериальных клеток методом магнитной сорбции. Выделенная плазмидная ДНК пригодна для ПЦР, ПЦР-РВ, рестрикции, лигирования, трансформации, трансфекции, а также в иных генно-инженерных приложениях. Набор предназначен для применения в научно-исследовательских целях. Характеристики: - с помощью набора проводится выделение плазмидной ДНК из жидкой бактериальной культуры; - компоненты набора обеспечивают полное удаление солей, белков, РНК и других клеточных компонентов; - полученная ДНК отличается высокой степенью чистоты; - набор позволяет элюировать плазмидную ДНК в объеме от 30 до 100 мкл; - эффективность выделения плазмидной ДНК данным набором составляет >85%; - выход плазмидной ДНК до 20 мкг; - время выполнения протокола составляет 30 минут.

Буфер для хранения и разведения обратной транскриптазы.

Genta TaqF ДНК-полимераза — химически модифицированный рекомбинантный аналог ДНК-полимеразы из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Фермент обладает 5’-3’ полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью, но не имеет 3’-5’ корректирующую экзонуклеазную активность. Рекомбинантный фермент Genta TaqF ДНК-полимераза подходит для использования в рутинных ПЦР, включая ПЦР в режиме реального времени. Genta TaqF ДНК-полимераза инактивирована с помощью химической модификации, что позволяет проводить приготовление реакционной смеси при комнатной температуре. Наличие «горячего старта» повышает специфичность и чувствительность амплификации. Активация полимеразы происходит при её прогревании до 95°C в течение 15 минут.

5-кратный реакционный буфер, подходящий для использования в реакции изотермической амплификации нуклеиновых кислот в форматах LAMP и ОТ-LAMP. Стандартный 5х Genta LAMP-буфер содержит 25 мМ MgSO4, что соответствует 5 мМ MgSO4 в реакционной смеси.

Буфер для хранения и разведения ДНК-полимеразы.

Genta бензонуклеаза представляет собой нуклеазу, которая расщепляет все виды как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые) с образованием олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований. Эффективна в широком диапазоне рабочих условий. Не имеет протеолитической активности. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген нуклеазы из микроорганизма Serratia marcescens. Условия проведения реакции: 20 - 37°С, оптимальный буфер: 50 мM Трис-HCl (рН 8,0 при 25°С); 100 -150 мM NaCl; 1 мМ MgCl2.

Экспресс-тест предназначен для быстрого определения антигена (нуклеокапсидного белка) вируса SARS-CoV‑2 в клинических образцах (мазки из носоглотки, назофаренгиальные мазки в транспортной среде) с целью диагностики коронавирусной инфекции (КВИ), дифференциальной диагностики этиологии острой респираторной инфекции. Тест позволяет быстро и надежно получить результат о наличии коронавирусной инфекции у широких слоёв населения и является ценной альтернативой молекулярным методам диагностики.

5Х Genta Single-tube RT-PCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения реакции синтеза кДНК с последующей количественной и/или качественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). 5Х Genta Single-tube RT-PCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ОТ-ПЦР компоненты, включая обратную транскриптазу Genta REV М, ДНК-полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+ и реакционный буфер. Для постановки реакции ОТ-ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

В основе протокола лежит модифицированный метод щелочного лизиса бактериальной культуры без предварительного осаждения бактерий с последующим селективным связыванием ДНК из осветленного лизата на силиконизированной мембране колонки. Технология позволяет ускорить процесс выделения за счет быстрого лизиса напрямую из биомассы с обработкой РНКазой А лизата и дальнейшего центрифугирования. Преимущества набора: Выход до 10 мкг из 0,6 мл бактериальной культуры Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,1 Проверено, что плазмидная ДНК пригодна для реакции рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР