Поиск

Флуоресцеин (чистый 5-изомер) в виде производного тетразина (метилтетразина). Тетразины - реакционноспособные гетеродиеновые компоненты для реакции [4+2] циклоприсоединения с обращенными электронными требованиями. Второй компонент реакции - напряженные циклоалкены (транс-циклооктены и циклопропены). Эта реакция также называется ТЦО (транс-циклооктеновым) лигированием. Эта реакция - одна из наиболее быстрых реакций биоконъюгации.

Аннексин V (или Аннексин A5) принадлежит семейству аннексинов, внутриклеточных белков, связывающих фосфолипиды. Аннексин V обычно используется в проточной цитометрии и флуоресцентной микроскопии для определения апоптотических клеток, благодаря его способности специфически связываться с фосфатидилсерином (ФС) кальций-зависимым образом. Метод был впервые описан Koopman с соавт. (1994) [1]. В здоровых клетках ФС содержится только с внутренней стороны плазматической мембраны. Во время апоптоза мембранная асимметрия исчезает, ФС перемещается на наружную сторону мембраны и становится доступным для связывания флуоресцентно меченным Аннексином V. В сочетании с другими прижизненными красителями, такими как йодистый пропидий (PI), метод позволяет различать популяции здоровых (Annexin−PI−), апоптотических (Annexin+PI−) и некротических (Annexin+PI+) клеток [2].Готовый набор содержит все необходимые реагенты для мечения апоптотических клеток с помощью Аннексина V, конъюгированного с AF 647, и PI. AF 647 — яркий флуоресцентный краситель, излучающий в дальнем красном канале, с высоким квантовым выходом флуоресценции и высокой фотостабильностью. Спектр AF 647 сильно отстоит от зелено-желтых длин волн, что делает этот флуорофор незаменимым для мечения клеток, обладающих высокой автофлуоресценцией. Максимум поглощения красителя — 655 нм. Максимум эмиссии — 680 нм. PI — непроницаемый сквозь плазматическую мембрану ДНК-краситель, позволяющий различать популяции некротических, апоптотических и здоровых клеток на основе целостности мембраны. После связывания с ДНК краситель излучает в оранжево-красном канале. Максимум поглощения — 535 нм. Максимум эмиссии — 617 нм.

Активированный N-гидроксисукцинимидный (NHS) эфир красителя AMCA (ацетат аминометилкумарина). Активированные эфиры обладают реакционной способностью в отношении первичных и вторичных аминогрупп. С их помощью можно метить аминогруппы в белках, пептидах, амино-модифицированных олигонуклеотидах и других целевых молекулах. AMCA — один из самых ярких синих флуоресцентных красителей. Этот флуорофор имеет относительно большой стоксов сдвиг, высокую устойчивость к фотовыгоранию и рН-независимую флуоресценцию в диапазоне рН от 4 до 10. АМСА широко используется для многоцветного мечения из-за минимального перекрытия его флуоресценции с зелеными и более длинноволновыми флуоресцентными красителями.

 Преимущества набора: • ДНК из любых реакционных смесей, фрагменты длины от 70 до 20000 п. о. • Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,0 • Выделенный ПЦР-продукт пригоден для проведения лигирования, рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР.

Cyanine3B один из самых ярких флуорофоров, обладающий высокой чувствительностью. Малеимид производное используют для приготовления тиол-малеимидных конъюгатов посредством мечения по тиоловым группам антител, пептидов и других биомолекул Cyanine3B флуорофором с высокими квантовым выходом и фотостабильностью. Способ присоединения по Михаэлю тиолов к малеимидам позволяет метить антитела с высокой селективностью. Этот сульфонированный цианиновый краситель можно использовать для проведения реакции в водных буферных системах после предварительного приготовления раствора Cyanine3B малеимида в полярном растворителе (ДМФА, ДМСО).

Флуоресцеин (FAM) — один из наиболее известных флуоресцентных красителей. Это производное FAM содержит циклооктиновый фрагмент (дибензоциклооктин, ДБЦО). Чистый 6-изомер. ДБЦО быстро и эффективно реагирует с азидами при простом смешении компонентов, без необходимости использования медного катализатора (т.н. стерически промотированная реакция циклоприсоединения, или SPAAC). FAM ДБЦО можно использовать для мечения белков, пептидов, нуклеиновых кислот и других молекул с азидогруппами. Флуоресценцию FAM можно детектировать с помощью множества различных приборов.

BDP R6G — яркий и фотостабильный краситель для замены родамина 6G (R6G). BDP — сокращение от borondipyrromethene (бордипиррометен); этот флуорофор можно подстроить под необходимые длины волн поглощения и эмиссии путем введения заместителей. ДБЦО (азодибензоциклооктин) — напряженный циклический алкин, вступающий в быструю реакцию с азидогруппами с образованием стабильных триазолов. Эта реакция не требует применения катализаторов и совместима практически с любыми биологически значимыми функциональными группами. BDP R6G ДБЦО используется для синтеза флуоресцентных конъюгатов и визуализации азидогрупп, связанных с биомолекулами и поверхностями.

Инфракрасный флуорофор sulfo-Cyanine7 в виде свободной карбоновой кислоты. Этот реагент можно использовать в качестве флуоресцентного маркера в ИК-диапазоне в тех случаях, когда его присоединение к другим молекулам не требуется. Он гидрофилен, обладает хорошей растворимостью в воде, улучшенным квантовым выходом в ИК-диапазоне в сравнении с Cy7® и индоцианиновым зеленым (ICG), и очень высоким коэффициентом экстинкции. Для мечения биомолекул по аминогруппам предлагаем активированный эфир sulfo-Cyanine7.

Малеимид Cyanine7.5 - реакционноспособный краситель для мечения сульфгидрильных групп, аналог Cy7.5® малеимида. Большинство белков содержат сульфгидрильные группы, которые можно эффективно пометить малеимидными производными флуоресцентных красителей. Этот реагент позволяет конъюгировать белки с красителем Cyanine7.5, обладающим флуоресценцией в ближней ИК-области. Этот краситель, похожий по своим флуоресцентным свойствам на ICG (indocyanine green), но имеющий более высокий квантовый выход флуоресценции, хорошо подходит для проведения имэджинга в живых организмах с целью изучения распределения и фармакокинетики меченых белков и пептидов.

BDP TMR - это альтернативный флуорофор для канала TAMRA. Благодаря высокому квантовому выходу, он значительно ярче, чем TAMRA. Данный продукт - производное красителя, терминальный алкин. Он может сочетаться с азидами посредством реакций клик-химии катализируемых солями меди (I).

BDP 581/591 - бордипиррометеновый краситель с сопряженной олефиновой системой. Он может использоваться для флуоресцентного мечения биомолекул и детекции активных форм кислорода (ROS); при взаимодействии с ними его флуоресценция смещается в зеленую область. Это производное содержит фрагмент циклоалкина. Этот фрагмент вступает в реакцию с азидами с образованием стабильных триазольных конъюгатов.

BDP 581/591 гидразид - краситель для модификации карбонильных групп. BDP 581/591 - бордипиррометеновый флуорофор, обладающий яркой эмиссией и отличной фотостабильностью. Карбонильные группы для модификации гидразидами могут быть получены путем окисления 1,2-диольных фрагментов в углеводах; они также присутствуют в белках, подвергавшихся окислительному стрессу, и многих малых молекулах.