Поиск

LUCS 13 — проникающий в клетки ядерный краситель, имеющий яркую зеленую флуоресценцию при связывании с нуклеиновыми кислотами. LUCS 13 является полным структурным аналогом SYTO®13. LUCS 13 используют для окрашивания РНК и ДНК как в живых, так и в мертвых эукариотических клетках, а также грамположительных и грамотрицательных бактерий. Краситель возбуждается при 488 нм, эмиссия регистрируется во флуоресцеиновом канале с пиком 509 нм после связывания с ДНК и 514 нм после связывания с РНК. Краситель может использоваться совместно с непроникающими в живые клетки ядерными маркерами, такими как YoDi-3, для оценки клеточной выживаемости методами флуоресцентной микроскопии и проточной цитометрии.

Условия хранения: Хранить при -20°C Последовательность: GTTTTCCCAGTCACGAC Примечание: Поставляются в сухом виде.

Аннексин V (или Аннексин A5) принадлежит семейству аннексинов, внутриклеточных белков, связывающих фосфолипиды. Аннексин V обычно используется в проточной цитометрии и флуоресцентной микроскопии для определения апоптотических клеток, благодаря его способности специфически связываться с фосфатидилсерином, который на ранних стадиях апоптоза перемещается со внутренней стороны клеточной мембраны во внешнюю. Данный аннексин V представлен в форме лиофилизированного конъюгата с AF 647 — ярким, фотостабильным, гидрофильным дальне-красным флуорофором, спектральные характеристики которого сходны с Cyanine5 (максимум поглощения — 655 нм, максимум эмиссии — 680 нм). Красители с максимумом флуоресценции в дальнем красном диапазоне (более 650 нм) широко используются в различных методах визуализации благодаря низкому уровню фоновой флуоресценции в данной области спектра. Окрашивание на аннексин V-AF 647 не позволяет разделять популяции апоптотических и некротических клеток. Для этого требуется дополнительное окрашивание клеток непроникающими в живые клетки ядерными красителями — йодистым пропидием или YODi-3. Для этого также можно использовать готовый набор для определения апоптотических клеток с помощью аннексина V-AF 647.

BDP 650/665 — яркий флуорофор, обладающий эмиссией в красной области спектра (канал Cyanine5 или Cy5). Этот краситель характеризуется высоким мольным коэффициентом экстинкции и хорошим квантовым выходом флуоресценции. Он умеренно гидрофобный, но позволяет проводить мечение биомолекул в водной среде. Поэтому этот флуорофор представляет собой хорошую альтернативу красителю Cy5. Малеимидная группа предназначена для осуществления конъюгации с тиолами. Данное соединение можно использовать для мечения цистеиновых остатков в белках и пептидах, а также для модификации других соединений, имеющих SH-группу.

Амино-11-dUTP - трифосфат с аминогруппой, обеспечивающий более высокую эффективность мечения ДНК в сравнении с традиционным аминоаллил-dUTP. Удлиненный линкер этого трифосфата обеспечивает как более эффективное ферментативное включение трифосфата, так и более высокую степень мечения амино-модифицированной ДНК активированными эфирами. Амино-11-dUTP совместим с ПЦР, обратной транскрипцией и ник-трансляцией. Нуклеотид эффективно включается Taq-полимеразой, фрагментом Кленова и обратными транскриптазами. Последующая реакция амино-ДНК с активированными эфирами позволяет получать меченые ДНК.

Набор ExtractDNA Blood & Cells предназначен для удобного и надежного выделения тотальной ДНК из: – цельной крови человека или животных (в т.ч. замороженной и тромбированной), – лейкоцитарной фракции, – культуры клеток человека или животных, – ткани человека или животных, – слюны, – буккального эпителия, – ночной культуры E.coli. Очищенные образцы ДНК могут использоваться для всех видов анализов и молекулярных задач (ПЦР, ПЦР-РВ, секвенирование по Сэнгеру и NGS, анализ метилирования ДНК и т.д.).

Азид-ПЭГ3-тетразин — бифункциональный линкер, содержащий ПЭГ3 (триэтиленгликоль) в качестве спейсера и концевые азидную и тетразиновую группы. ПЭГ увеличивает растворимость соединения в водной среде. Азидная группа легко реагирует с терминальными алкинами, BCN и DBCO посредством медь-катализируемой и безмедной клик-реакций. Тетразины крайне быстро взаимодействуют с терминальными алкенами и транс-циклооктенами в реакциях Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями (Inverse electron demand Diels-Alder ligation, IEDDA). Тетразины также могут реагировать с некоторыми напряженными циклоалкинами.

ROX ДБЦО - конъюгат яркого родаминового красителя родамина X с ДБЦО (дибензоциклооктином) - напряженным циклоалкином, обладающим высокой реакционной способностью в отношении аздов. Этот реагент позволяет легко пометить различные азиды красителем ROX. На основе чистого 5-изомера ROX.

5Х Genta Single-tube RT-PCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения реакции синтеза кДНК с последующей количественной и/или качественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). 5Х Genta Single-tube RT-PCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ОТ-ПЦР компоненты, включая обратную транскриптазу Genta REV М, ДНК-полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+ и реакционный буфер. Для постановки реакции ОТ-ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CAATTG C↑AATTG GTTAAC GTTAA↓C Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Mfe I из Mycoplasma fermentans. Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 10 25 75 25 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE +. Примечание: Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

L-Азидогомоаланин (AHA) представляет собой неканонический аминокислотный аналог метионина, который содержит азидную группу. Мечение с помощью AHA является быстрой, чувствительной, нетоксичной и нерадиоактивной альтернативой традиционному методу обнаружения синтеза белка de novo. AHA — проникающее в клетку соединение, включающееся случайным образом в синтезирующийся белок вместо метионина во время трансляции. Полученные таким образом меченые азидом полноразмерные белки могут быть обнаружены с помощью катализируемой медью клик-реакции с флуоресцентными или биотинилированными алкинами, либо безмедной клик-реакции с циклоалкинами, и использованы для последующей визуализации или очистки.

Амин-ПЭГ2-карбоновая кислота представляет собой бифункциональное производное полиэтиленгликоля с тремя мономерными звеньями (ПЭГ2), содержащее терминальные карбоксильную и аминогруппы. Благодаря гидрофильности ПЭГ3 спейсера, получаемые конъюгаты обладают большей растворимостью в воде. Терминальная аминогруппа способна взаимодействовать с активированными эфирами, различными карбонильными соединениями (например, альдегидами и кетонами) и карбоновыми кислотами, например, в реакциях восстановительного аминирования. Входящая в состав Амин-ПЭГ2-карбоновой кислоты карбоксильная группа в присутствии активаторов (карбодиимидов или HATU) может реагировать с первичными аминогруппами с образованием стабильной амидной связи.