Поиск

BDP 630/650 - это краситель дальней красной области, флуорофор на основе бордипиррометенового ядра, аналог BODIPY 630/650. Краситель специально разработан под канал Cy5, и поэтому может быть использован как альтернатива to Cyanine5 и sulfo-Cyanine5. По сравнению с цианинами у BDP 630/650 большее время жизни флуоресценции, что применяется во флуоресцентно-поляризационном анализе. Яркость BDP 630/650 сравнима с цианиновыми красителями, но при этом у него исключительная фотостабильность. Производное красителя с аминогруппой используется в реакциях с электрофилами, а также для мечения в процессах трансаминирования, каталируемого ферментами.

Биотин-ПЭГ4-тетразин— соединение для биотинилирования методом безмедной клик-химии. Тетразины крайне быстро взаимодействуют с терминальными алкенами и транс-циклооктенами в реакциях Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями (Inverse electron demand Diels-Alder ligation, IEDDA). Тетразины также могут реагировать с некоторыми напряженными циклоалкинами. Биотин-меченые соединения могут быть связаны с авидином или стрептавидином для дальнейшей их очистки или детекции. Биотиновая группа имеет относительно небольшие размеры и не влияет на биологическую активность биотинилированных белков. Данный реагент содержит длинный линкер PEG4, который отделяет остаток биотина от молекулы-мишени, обеспечивая эффективное его связывание с авидином или стрептавидином. Линкер также повышает растворимость соединения в воде, облегчая тем самым биоконъюгацию.

ROX-азид представляет собой алкин-реактивное производное красителя ROX (Rhodamine X, Rhodamine 101). ROX — флуорофор красной области спектра, обладающий высокой яркостью и квантовым выходом флуоресценции. Данный реагент представляет собой высокоочищенный 6-изомер. Он используется для мечения алкин- и циклоалкин-содержащих биомолекул, посредством катализируемых медью и безмедных клик-химических реакций.

AF 488 — яркий зеленый флуоресцентный краситель, благодаря своей фотостабильности часто применяемый в микроскопии, клеточных исследованиях. AF 488 может использоваться в паре с DAPI и хорошо подходит для мультиплексного анализа. AF 488 обладает высоким квантовым выходом и стабильной флуоресценцией в диапазоне pH от 4 до 10. Карбоновая кислота AF 488 — это нереактивная форма AF488, которую можно использовать в качестве референсного стандарта в экспериментах, где используются конъюгаты данного флуорофора. Кроме того, карбоновую кислоту можно использовать для синтеза активированных сложных эфиров, например, сульфо-NHS, TFP (2,3,5,6-тетрафторфенол) и STP (4-сульфо-2,3,5,6-тетрафторфенол) или модифицировать гидразинами, гидроксиламинами и аминами в водном растворе с использованием водорастворимых карбодиимидов. Таким способом данное производное можно конъюгировать с молекулами, содержащими аминогруппы, например белками, антителами, пептидами, и поэтому карбоновая кислота AF 488 используется во время твердофазного синтеза пептидов для их модификации in situ в присутствии активирующих агентов, таких как HATU.

DusQ 1 NHS активированный эфир используют для конъюгации с биомолекулами по первичным аминогруппам. DusQ 1 — нефлуоресцирующий тушитель, для которого наблюдается максимум поглощения при 522 нм. DusQ 1 применяют в мультиплексном анализе, для зондов в методах количественной ПЦР, методах исследования FRET в качестве акцептора в паре с флуорофорами, для которых характерно испускание в зелёной и жёлтой областях спектра, включая FAM, JOE, VIC, R6G, HEX и TET.

Методы количественной оценки пролиферации клеток широко используются при изучении цитотоксичности, в онкологических исследованиях и других областях клеточной биологии. Многие из них позволяют визуализировать пролиферирующие клетки с помощью флуоресцентных красителей и могут быть использованы для проведения скрининга с высокой пропускной способностью. Обнаружение реплицированной во время S-фазы клеточного цикла ДНК является одним из наиболее прямых способов выявления клеточной пролиферации. Обычно для этой цели используют 5-бромо-2’-дезоксиуридин (BrdU) — синтетический аналог тимидина, который включается в дочерние нити ДНК во время ее репликации. Содержащую BrdU ДНК выявляют затем иммунохимически с использованием антител, специфичных к этому нуклеозиду. Быстрой и простой альтернативой иммунохимическому методу является мечение делящихся клеток с помощью другого нуклеозида — 5-этинил-2’-дезоксиуридина (EdU). Как и BrdU, он может быть доставлен в клетку путем его добавления в питательную среду культуры или инъекции животным. EdU также является субстратом клеточных киназ и ДНК-полимераз, благодаря чему он включается в состав ДНК при ее репликации. После этого ДНК дочерних клеток, содержащую этинильные фрагменты, можно пометить с помощью клик-химической реакции с азидами флуоресцентных красителей в присутствии медного катализатора. Меченные таким образом клетки можно детектировать методами микроскопии и цитометрии или использовать для сортировки дочерних клеток и клеток, не претерпевших деления. Lumiprobe предлагает готовый к использованию набор для исследования пролиферации клеток методом клик-химии в пяти вариантах с разными флуоресцентными красителями.

ProteOrange — чувствительный к белкам флуоресцентный краситель, который практически не флуоресцирует в свободной форме, но начинает светиться при связывании с белками. Максимум возбуждения ProteOrange в комплексе с белком находится при ~485 нм, максимум эмиссии — при ~590 нм. Уникальная структура реагента ProteOrange позволяет точно обнаруживать белки в растворах с концентрацией от 10 нг/мл до 10 мкг/мл. Этот уровень чувствительности значительно лучше, чем тот, который достигается с помощью метода BCA, анализа Брэдфорда, анализа Лоури или измерений поглощения при 280 нм. Краситель демонстрирует минимальную вариабельность для разных белков. Краситель ProteOrange имеет низкую толерантность к неионным детергентам, поэтому его использование не рекомендуется для клеточных лизатов, содержащих Тритон Х-100 и дезоксихолат натрия, однако допускается содержание до 0,01% SDS (в конечной концентрации). Данный реагент представляет собой 500-кратный концентрат красителя ProteOrange. Данный продукт входит в состав готового Набора ProteOrange для определения количества белка.

Готовый набор, содержащий все необходимые реагенты для мечения мембран клеток красителем PKH2 с целью последующей оценки клеточной миграции или пролиферации. В наборе используется цианиновый краситель PKH2. В его структуре есть липофильные группы, позволяющие быстро и нековалентно встраиваться в клеточные мембраны практически любых клеток, не влияя на клеточные рецепторы или трансмембранные белки. При этом клетки сохраняют свои биологические свойства и способность к пролиферации, что делает PKH2 отличным флуорофором для изучения как растительных, так и животных клеток in vivo и in vitro. Он также подходит для изучения мембранных везикул. PKH2 испускает свет в зеленой области спектра, с максимумом флуоресценции 504 нм, его можно использовать наряду с другими красителями в многоцветных исследованиях. PKH2 менее стабилен, чем PKH26, и меченные им клетки могут быть исследованы с использованием микроскопии или проточной цитометрии в течение 10-11 дней после окрашивания. Количество измерений, на которое рассчитан набор, может отличаться в зависимости от количества клеток в образце: Набор, содержащий 100 µL красителя PKH2, позволяет проанализировать 25 образцов по 20 миллионов клеток в каждом, при использовании финальной концентрации красителя PKH2 равной 2×10-6 M. Набор, содержащий 500 µL красителя PKH2, позволяет проанализировать 125 образцов по 20 миллионов клеток в каждом, при использовании финальной концентрации красителя PKH2 равной 2×10-6 M. Рекомендуется определить оптимальные количество клеток и концентрацию красителя исходя из типа (ов) клеток и экспериментальных задач. LumiTrace PKH2, набор для мечения клеточных мембран, 14201.

Азидопроизводное водорастворимого красителя sulfo-Cyanine3 для клик-химии. Спектральные и фотофизические свойства красителя идентичны Cy3®. Благодаря высокой растворимости в воде и хорошим фотофизическим свойствам, этот краситель хорошо подходит для мечения биомолекул с помощью реакций клик-химии. Мечение не требует применения органического растворителя и может быть выполнено в водной среде, поэтому данный азид годится для мечения чувствительных белков и даже живых клеток.

Реагент Lumizol представляет собой раствор, содержащий фенол, изотиоционат гуанидина и другие компоненты, позволяющие получить высококачественную РНК. Фенол и изотиоционат гуанидина обеспечивают лизис клеток и эффективно ингибируют рибонуклеазы, тем самым сохраняя РНК интактной. После гомогенизации и добавления хлороформа образец разделится на верхнюю водную фазу, интерфазу и нижнюю органическую фазу. РНК может быть преципитирована из верхней фазы с помощью изопропанола, в то же время белки и ДНК могут быть выделены из интерфазы и органической фазы. ДНК может быть выделена из интерфазы и нижней органической фазы с помощью этанола, а белки могут быть выделены из супернатанта преципитацией с изопропанолом.

R6G фосфорамидит для олигонуклеотидного синтеза, чистый 6-изомер. R6G (родамин 6G) — ксантеновый краситель родаминового ряда. Обладает высоким квантовым выходом флуоресценции и высоким коэффициентом молярной экстинкции. Максимумы поглощения и испускания 6-R6G смещены относительно максимумов флуоресцеина в длинноволновую область и находятся на 518 нм и 542 нм соответственно. R6G может использоваться в качестве акцептора FRET-пары в ДНК-секвенировании и анализе коротких тандемных повторов (STR). Краситель часто используется для получения TaqMan зондов для количественной ПЦР. В сравнении с красителями HEX и JOE, R6G обладает более сильным тушением в зондах типа «молекулярный маяк» в комбинации с тушителем BHQ1, что значительно снижает фоновую флуоресценцию в ПЦР.

CPG с остатком биотина может быть использовано для введения биотина по 3′ положению в твердофазном синтезе. Модифицирующий агент Биотин (гидроксипролинол) CPG 1000 принадлежит к Pro-серии продуктов на основе гидроксипролинола в остове молекулы. Размер пор носителя 1000 Å рекомендуется для синтеза олигонуклеотидов длиной до 120 оснований. Молекула биотин (гидроксипролинол) CPG содержит диметокситритиловую защиту (DMT), что делает возможной последующую очистку.