Поиск

Метод исследования цитотоксичности на основе резазурина базируется на способности живых клеток превращать синий нефлуоресцентный краситель, резазурин, в розовый флуоресцентный, резоруфин, что позволяет определять цитотоксичность клеток колориметрически или флуориметрически. Восстановление резазурина осуществляется широким спектром ферментов клеток (митихондриальными и цитоплазматическими дегидрогеназами, цитохромами и другими). Жизнеспособные клетки непрерывно превращают резазурин в резофурин, увеличивая общую флуоресценцию и цвет среды для культивирования клеток.

Трипановый синий является одним из наиболее часто используемых красителей для определения количества жизнеспособных клеток. Метод окрашивания трипановым синим основан на том, что жизнеспособные клетки с целостной клеточной мембраной не поглощают данный краситель. Нежизнеспособные клетки с повреждённой мембраной поглощают трипановый синий и их ядра окрашиваются в тёмный цвет. Также окрашивание трипановым синим облегчает визуализацию морфологии клеток.

Лизирующий буфер для красных кровяных клеток наиболее часто используется для лизиса эритроцитов периферической крови человека и мышей, а также суспензий мышиных гематопоэтических тканей (например, спленоциты селезенки). Данный буфер содержит хлорид аммония, благодаря чему при правильном использовании реагента лизируются преимущественно красные кровяные клетки с минимальным воздействием на лимфоциты. Ядерные эритроциты могут не разрушиться под воздействием хлорида аммония.