Биореактивы

Алкин-ПЭГ3-амин - гетеробифункциональный линкер на основе триэтиленгликоля (ПЭГ3). Эта молекула содержит аминогруппу и терминальную алкиновую группу. Аминогруппа вступает в реакции с различными электрофильными реагентами. Алкиновый фрагмент можно вовлечь в реакцию CuAAC (медь-катализируемое алкин-азидное циклоприсоединение) и реакцию Соногаширы. Выбор линкеров на основе ПЭГ, как правило, является оптимальным для конъюгации биомолекул.

Лиофилизированные шарики для кПЦР — предварительно приготовленная и расфасованная форма реакционной смеси для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР). Каждый лиофилизированный шарик для кПЦР представляет собой сухую гранулу, содержащую готовую реакционную смесь со всеми необходимыми компонентами, для проведения ПЦР и кПЦР объёмом 25 мкл: Taq-полимераза с горячим стартом; смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (dNTP); оптимизированный буфер для ПЦР (содержит Mg2+ с концентрацией 3 мМ в 1х реакционной смеси); протекторы для лиофилизации. Состав реакционной смеси оптимизирован для получения идеальных результатов по процессивности и специфичности амплификации. Шарики обеспечивают большую воспроизводимость между реакциями за счет минимизации этапов пипетирования и снижения вероятности ошибок при пипетировании и контаминации образцов. Каждая партия шариков для кПЦР проходит функциональное тестирование для обеспечения воспроизводимости от партии к партии. Шарики подходят для проведения ПЦР с детекцией в режиме реального времени, в том числе для количественного анализа (с флуоресцентными зондами или интеркалирующим красителем, например, Eva488); а также для амплификации ДНК с последующей детекцией результатов методом электрофореза. Шарики также подходят для рутинных задач по клонированию и других применений, требующих дальнейшей работы с продуктом ПЦР после амплификации. Лиофилизированные шарики для кПЦР совместимы с амплификаторами любого типа и могут быть использованы как для постановки ПЦР в амплификаторах с классическими термоблоками для ПЦР-пробирок, так и в амплификаторах с картриджами. Лиофилизированный формат позволяет хранить готовую ПЦР-смесь до 12 месяцев при температуре до +4°С. Мы предлагаем лиофилизированные шарики для кПЦР во флаконах по 10 шт. (11534), флаконах по 50 шт. (21534) и ПЦР-пробирках в стрипах по 8 шт. (31534).

Тетразин-транс-циклооктеновое (ТЦО) лигирование - одна из самых быстрых реакций биоконъюгации. Чтобы использовать ее для флуоресцентного мечения, необходимо получить конъюгат флуорофора с одной из этих реакционноспособных групп. Cyanine5 тетразин содержит флуорофор Cyanine5, конъюгированный с тетразиновым фрагментом. Cyanine5 - очень популярный флуорофор, совместимый с различными приборами для детекции флуоресценции.

LUCS 13 — проникающий в клетки ядерный краситель, имеющий яркую зеленую флуоресценцию при связывании с нуклеиновыми кислотами. LUCS 13 является полным структурным аналогом SYTO®13. LUCS 13 используют для окрашивания РНК и ДНК как в живых, так и в мертвых эукариотических клетках, а также грамположительных и грамотрицательных бактерий. Краситель возбуждается при 488 нм, эмиссия регистрируется во флуоресцеиновом канале с пиком 509 нм после связывания с ДНК и 514 нм после связывания с РНК. Краситель может использоваться совместно с непроникающими в живые клетки ядерными маркерами, такими как YoDi-3, для оценки клеточной выживаемости методами флуоресцентной микроскопии и проточной цитометрии.

Условия хранения: Хранить при -20°C Последовательность: GTTTTCCCAGTCACGAC Примечание: Поставляются в сухом виде.

Аннексин V (или Аннексин A5) принадлежит семейству аннексинов, внутриклеточных белков, связывающих фосфолипиды. Аннексин V обычно используется в проточной цитометрии и флуоресцентной микроскопии для определения апоптотических клеток, благодаря его способности специфически связываться с фосфатидилсерином, который на ранних стадиях апоптоза перемещается со внутренней стороны клеточной мембраны во внешнюю. Данный аннексин V представлен в форме лиофилизированного конъюгата с AF 647 — ярким, фотостабильным, гидрофильным дальне-красным флуорофором, спектральные характеристики которого сходны с Cyanine5 (максимум поглощения — 655 нм, максимум эмиссии — 680 нм). Красители с максимумом флуоресценции в дальнем красном диапазоне (более 650 нм) широко используются в различных методах визуализации благодаря низкому уровню фоновой флуоресценции в данной области спектра. Окрашивание на аннексин V-AF 647 не позволяет разделять популяции апоптотических и некротических клеток. Для этого требуется дополнительное окрашивание клеток непроникающими в живые клетки ядерными красителями — йодистым пропидием или YODi-3. Для этого также можно использовать готовый набор для определения апоптотических клеток с помощью аннексина V-AF 647.

BDP 650/665 — яркий флуорофор, обладающий эмиссией в красной области спектра (канал Cyanine5 или Cy5). Этот краситель характеризуется высоким мольным коэффициентом экстинкции и хорошим квантовым выходом флуоресценции. Он умеренно гидрофобный, но позволяет проводить мечение биомолекул в водной среде. Поэтому этот флуорофор представляет собой хорошую альтернативу красителю Cy5. Малеимидная группа предназначена для осуществления конъюгации с тиолами. Данное соединение можно использовать для мечения цистеиновых остатков в белках и пептидах, а также для модификации других соединений, имеющих SH-группу.

Амино-11-dUTP - трифосфат с аминогруппой, обеспечивающий более высокую эффективность мечения ДНК в сравнении с традиционным аминоаллил-dUTP. Удлиненный линкер этого трифосфата обеспечивает как более эффективное ферментативное включение трифосфата, так и более высокую степень мечения амино-модифицированной ДНК активированными эфирами. Амино-11-dUTP совместим с ПЦР, обратной транскрипцией и ник-трансляцией. Нуклеотид эффективно включается Taq-полимеразой, фрагментом Кленова и обратными транскриптазами. Последующая реакция амино-ДНК с активированными эфирами позволяет получать меченые ДНК.

Набор ExtractDNA Blood & Cells предназначен для удобного и надежного выделения тотальной ДНК из: – цельной крови человека или животных (в т.ч. замороженной и тромбированной), – лейкоцитарной фракции, – культуры клеток человека или животных, – ткани человека или животных, – слюны, – буккального эпителия, – ночной культуры E.coli. Очищенные образцы ДНК могут использоваться для всех видов анализов и молекулярных задач (ПЦР, ПЦР-РВ, секвенирование по Сэнгеру и NGS, анализ метилирования ДНК и т.д.).

Азид-ПЭГ3-тетразин — бифункциональный линкер, содержащий ПЭГ3 (триэтиленгликоль) в качестве спейсера и концевые азидную и тетразиновую группы. ПЭГ увеличивает растворимость соединения в водной среде. Азидная группа легко реагирует с терминальными алкинами, BCN и DBCO посредством медь-катализируемой и безмедной клик-реакций. Тетразины крайне быстро взаимодействуют с терминальными алкенами и транс-циклооктенами в реакциях Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями (Inverse electron demand Diels-Alder ligation, IEDDA). Тетразины также могут реагировать с некоторыми напряженными циклоалкинами.

ROX ДБЦО - конъюгат яркого родаминового красителя родамина X с ДБЦО (дибензоциклооктином) - напряженным циклоалкином, обладающим высокой реакционной способностью в отношении аздов. Этот реагент позволяет легко пометить различные азиды красителем ROX. На основе чистого 5-изомера ROX.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CAATTG C↑AATTG GTTAAC GTTAA↓C Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Mfe I из Mycoplasma fermentans. Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 10 25 75 25 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE +. Примечание: Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.