Биореактивы

Реакционная смесь 5X qPCRmix-HS SYBR предназначена для ПЦР в реальном времени с интеркалирующим красителем SYBR Green I. В состав 5X qPCRmix-HS SYBR входят все необходимые компоненты для ПЦР: высокопроцессивная Taq ДНК полимераза со специфическими моноклональными антителами, краситель SYBR Green I, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, Mg2+, ПЦР буфер. Для постановки реакции ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, матрицу ДНК и воду. 5X qPCRmix-HS SYBR подходит для Real-Time амплификаторов любого типа.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(20 mМ Глицин-NaOH (pH 9.5 при 25°C); 25 mM MgCl2; 100mM NaCl; 1mM 2-меркаптоэтанол) Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Описание: Набор dNTP (ферментативно синтезированных) состоит из четырех индивидуальных растворов dATP, dCTP, dGTP, dTTP. Концентрация каждого dNTP 40 mM. Тестировано в ПЦР для получения продуктов длиной более 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы. . Способ получения: Ферментативный синтез Условия хранения: Хранить при -20°С Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Готовые к работе лентивирусные частицы LVT-TagRFP, несущие ген флуоресцентного белка TagRFP, предназначены для трансдукции клеток. Лентивирусный вектор эффективно встраивается в геном клеток-мишеней, вызывая стабильную экспрессию флуоресцентного белка TagRFP через 48-72 часа после добавления к клеточной культуре.

Реакционная смесь 5X qPCRmix-HS SYBR+LowROX предназначена для постановки ПЦР с SYBR Green I в присутствии референсного красителя ROX, и позволяет получать результаты со значительным превышением уровня сигнала над фоновой флуоресценцией и низким порогом насыщения реакции (cycle threshold, Ct). В состав 5X qPCRmix-HS SYBR+LowROX входят все необходимые компоненты для ПЦР: HS Taq ДНК полимераза, интеркалирующий краситель SYBR Green I, референсный краситель ROX, смесь dNTP, Mg2+, ПЦР буфер. Для постановки ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, ДНК и воду. 5X qPCRmix-HS SYBR+LowROX подходит для Real-Time амплификаторов, требующих низкой концентрации красителя ROX в реакции (например, ABI 7500).

5X Genta qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени. Мастер-микс обеспечивает надежную работу ПЦР в широком спектре приложений. Мастер-микс позволяет проводить ПЦР-РВ в мультиплексном формате. 5X Genta qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCTCCN GCTCCN↑ CGAGGN CGAG↓GN Источник: Lysinibacillus manganicus An22 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 50 50 75 80 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 100 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.

Магнитные частицы CleanMag DNA PCR предназначены для эффективной очистки фрагментов ДНК из ферментативных реакционных смесей. CleanMag DNA PCR оптимален для работы с редкими образцами и малым количеством исходного материала. Выделенная ДНК пригодна для ПЦР, рестрикции, лигирования и других молекулярно-биологических приложений.

SYBR Green I – интеркалирующий краситель, специфичный к двухцепочечной ДНК. Раствор SYBR Green I оптимизирован для применения в ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Рекомендуется использовать как 50X раствор, при оптимизации условий ПЦР допускается двухкратное увеличение или двухкратное уменьшение (25Х – 100Х) концентрации красителя в реакционной смеси.

Флуоресцентный краситель Тетраметилроданин (иначе TAMRA), содержащий азидную группу. Чистый 6-изомер. Предназначен для модификации с помощью click-реакций. Эмиссия в оранжевой области спектра. Кристаллическое вещество от светло-голубого до фиолетового цвета. Хорошо растворим в диметилсульфоксиде, диметилформамиде и других полярных растворителях.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCCAGC CCCAG↑C GGGTCG G↓GGTCG Источник: Geobacillus stearothermophilus Y Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 70°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 25 75 100 75 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 70°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA. Примечание: Для достижения 100% активности следует добавлять BSA в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Готовые к работе лентивирусные частицы LVT-FusionRed-H2B, несущие ген химерного флуоресцентного белка FusionRed-H2B, предназначены для трансдукции клеток. Лентивирусный вектор эффективно встраивается в геном клеток-мишеней, вызывая стабильную экспрессию химерного флуоресцентного белка FusionRed-H2B через 48-72 часа после добавления к клеточной культуре.