Биореактивы

DusQ 2 фосфорамидит подходит для синтеза олигонуклеотидов с тушителем DusQ 2 на 5’-, 3’-конце, а также в середине цепи. Данный фосфорамидит имеет DMT-защиту, что дает возможность проведения очистки синтезированного 5’-меченого олигонуклеотида на картридже. Данный фосфорамидит чаще всего используется для синтеза дважды меченых зондов для количественной ПЦР с тушителем DusQ 2 на 5’-конце. DusQ 2 — тушитель флуоресценции с максимальным поглощением в диапазоне 560–670 нм, подходит для эффективного тушения по механизму FRET флуорофоров с эмиссией в указанном диапазоне. Кроме того, он используется в гибридизационных зондах на основе статического и смешанного тушения. Поскольку для DusQ 2 эффективность тушения в незначительной степени зависит от перекрытия спектров флуорофора и тушителя, он подходит для широкого спектра флуорофоров, в том числе с эмиссией в оранжевом и красном диапазонах. Список флуорофоров для использования с DusQ 2 включает, но не ограничивается Cyanine3, TAMRA, ROX, Cyanine3.5, Cyanine5, Cyanine5.5.

ДНК-поли­ме­раза «ALZYME Pfu» предназначена для синтеза молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) путём комплементарного копирования родительских цепей ДНК в процессе полимеразной цепной реакции (ПЦР). Фер­мент пред­наз­на­чен для при­ме­не­ния в науч­но-ис­сле­­до­­ва­­тель­­ских целях. ДНК-по­ли­ме­ра­за «ALZYME Pfu» яв­ля­ет­ся ана­ло­гом Phusion High-Fidelity по­ли­ме­ра­зы. Источ­ник: Фер­мент по­лу­чен из ре­­ком­­би­­нант­­но­­го шта­м­ма Е. coli, не­­су­­ще­го мо­­ди­­фи­ци­­ро­­ван­­ный ген Pfu-полимеразы. Область применения: - Проведение высокоточной ПЦР. - Клонирование генов. - Синтез ДНК для секвенирования. - Амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей. - ПЦР длинных фрагментов.

Представляет собой смесь случайных гексануклеотидов, используется для инициирования синтеза ДНК in vitro по нескольким сайтам денатурированной матричной ДНК. Обеспечивает наличие практически всех комбинаций последовательностей гексамерных праймеров Используется для скрининга библиотек генов Используется для определения northern and southern blots Используется для гибридизации in situ Фасовка: 1.5 нмоль Условия хранения: Хранить при -20°C Последовательность: d(N)6 Примечание: Поставляются в сухом виде.

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду, содержащую модифицированный ген ДНК полимеразы Pyrococcus furiosus. Описание: PfuSE ДНК полимераза является улучшенным (более стабильным) вариантом Pfu ДНК полимеразы. PfuSE ДНК полимераза обладает 3`-5` экзонуклеазной корректирующей активностью (proof-reading activity), что позволяет ферменту, в отличие от Taq ДНК полимеразы, вести точный синтез ДНК. PfuSE ДНК полимераза образует продукты ПЦР с тупыми концами. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию ДНК за 30 мин при 72°C. Оптимальный буфер: SE-буфер PfuSE ДНК полимераза Условия хранения: 10 mM калий-фосфат (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 0.1 mM DTT, 0.1% Тритон Х-100, 0.5 % Tween-20, 50% глицерин. Хранить при -20°С. Примечание: Не используйте dUTP в ПЦР.

Применение: Набор предназначен для выделения геномной ДНК из лёгкой фракции клеток крови. Набор рассчитан на 50 выделений Состав (в варианте 1.3): Раствор №1 (Лизирующий) – 2 х 45 мл. Раствор №2 (Солевой) – 1 х 36 мл. Раствор №3 (Осаждающий) – 2 х 48 мл. Раствор №4 (Для элюции и хранения) – 1 х 30 мл. Раствор №5 (Для подготовки спин-колонки) – 1 х 32 мл. Раствор №6 (Для уравновешивания) – 2 х 32 мл. Раствор №7 (Для подготовки образца) – 1 х 43 мл. Раствор №8 (Промывочный) – 3 х 40 мл. Спин-колонки (только для K008S) – 50 шт. Условия хранения: Набор хранить при комнатной температуре (20-25°C). Растворы №2, 4 и 5 после вскрытия хранить в холодильнике при +4 – +8°C Для работы потребуются: – вакутейнеры для забора крови на 9 мл (EDTA K2 или EDTA K3); – физиологический раствор аптечный стерильный комнатной температуры; – 70% этанол; – вода очищенная, стерильная; – центрифуга типа ELMI CM-6MT (Латвия), ротор 6M или 6M.02; – набор автоматических пипеток и наконечники к ним; – пробирки с крышками пластиковые мерные на 15 мл; – микропробирки с крышками пластиковые типа Eppendorf на 1,5 и 2 мл; – штативы для пробирок; – спин-колонки; – центрифуга для микропробирок на 1,5-2 мл (типа MiniSpin, Eppendorf, 13,000 об/мин); – термостаты на 55 и 65°С; – морозильная камера на -20°С.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GDGCHC GDGCH↑C CHCGDG C↓HCGDG Источник: Micrococcus halobius SD Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 25 75 100 10 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W. Примечание: Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GTAC GT↑AC CATG CA↓TG Источник: Rhodopseudomonas sphaeroides Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 50 75 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CMGCKG CMG↑CKG GKCGMC GKC↓GMC Источник: Moraxella species A1 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 10 75 10 25 100 100 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6); 300 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 10 mM MgCl2; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Для периода более 30 дней рекомендуется хранить при -70°С. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: ACATGT A↑CATGT TGTACA TGTAC↓A Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Pci I из Planococcus citreus SE-F45 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага Т7 Оптимальный буфер: SE-буфер O Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 50 75 100 75 50 50 \Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Не блокируется метилированием ACmATGT. Блокируется метилированием mACATGT. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCTCCN GCTCCN↑ CGAGGN CGAG↓GN Источник: Lysinibacillus manganicus An22 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 50 50 75 80 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 100 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 3-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CACGTG CAC↑GTG GTGCAC GTG↓CAC Источник: Pseudomonas species C Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 50 5 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Для периода более 30 дней рекомендуется хранить при -70°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Сшивка лучше с 10% ПЭГ Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер B+. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GAGTC(N)4 GAGTC(N)4↑ CTCAG(N)5 CTCAG(N)5↓ Источник: Pseudomonas pseudoalcaligenes Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 50 10 25 100 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 2-кратным избытком фермента 20% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 1 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.