Биореактивы

Назначение: Тест-система предназначена для качественного определения уровня аутоантител к коллагену II типа в плазме (сыворотке) человека. Метод основан на иммунологической реакции между аутоантителами к коллагену и коллагеном, иммобилизованным на внутренней поверхности лунок пластикового планшета с последующей детекцией образовавшегося комплекса с помощью пероксидазного конъюгата кроличьих антител к тотальным иммуноглобулинам человека, ферментативная активность которой определяется по изменению окраски субстратной смеси. Количество связавшейся пероксидазы пропорционально количеству аутоантител в образце. Клиническое значение: Сдвиги в синтезе и распаде коллагенов сопровождают многие распространенные заболевания, такие как: атеросклероз, гипертония, диабет, злокачественные опухоли, коллагенозы. Характерная особенность этих изменений такова, что наступают они на раннем этапе, еще до появления клинических признаков заболеваний. Поэтому выявление в плазме крови человека аутоантител к коллагенам разных типов может иметь диагностическое и прогностическое значение.

Белок А - белок с молекулярной массой 40-60 кДа. Белок А активно используется в биохимических исследованиях, благодаря своей способности связывать Fc-участок антител. Белок А взаимодействует со следующимим иммуноглобулинами: Хорошее связывание Слабое связывание Человек IgG1, IgG2, IgG4 IgM, IgA2 Мышь IgG2A, IgG2B, IgG3 IgG1 Крыса IgG1, IgG2C Морская свинка IgG1, IgG2 Кролик IgG Овца, Коза, Бык - IgG2 Собака IgGA, IgGB, IgGC, IgGD Данный продукт (E Paa) может быть использован в иммунохимических исследованиях, для окрашивания клеток в культуре, для синтеза сорбентов или для конъюгирования с ферментами, флуорохромами или с биотином.

Витронектин - многофункциональный гликопротеин, представленный в плазме крови и во внеклеточном матриксе. Он может связывать глюкозаминогликаны, коллаген, плазминоген и рецептор урокиназы, он также связывает и стабилизирует ингибитор активатора плазминогена-1. В дополнение, витронектин ингибирует мембраноатакующий цитолитический комплекс системы комплемента, связывается с гепарином и комплексом тромбин-антитробмин III. Таким образом, витронектин принимает участие в фибринолизе, формировании иммунного ответа. Благодаря тому, что витронектин содержит RGD-последовательность, он выступает в роли субстрата, обеспечивающего адгезию, распластывание и миграцию клеток. Витронектин широко применяют в исследовании нервных клеток, а также эмбриональных и индуцированных стволовых клеток.

Азидопроизводное красителя AMCA для конъюгации с терминальными алкинами посредством медь-катализируемой клик-реакции или с напряженными алкинами посредством безмедной клик-реакции. AMCA (ацетат аминометилкумарина) — один из самых ярких синих флуоресцентных красителей. Этот флуорофор имеет относительно большой стоксов сдвиг, высокую устойчивость к фотовыгоранию и рН-независимую флуоресценцию в диапазоне рН от 4 до 10. АМСА широко используется для многоцветного мечения из-за минимального перекрытия его флуоресценции с зелеными и более длинноволновыми флуоресцентными красителями.

Краситель QuDye для определения количества белка предназначен для определения концентрации белка на флуориметре в диапазоне исходной концентрации белка 12,5–5000 мкг/мл. Краситель может быть использован для определения концентрации белка как на планшетном ридере, так и кюветном флуориметре, при этом диапазон измерения может быть шире и зависит от характеристик используемого прибора. Краситель селективно связывается с мицеллами SDS-белок, поэтому нуклеотиды, ДНК, РНК, аминокислоты, соли, восстанавливающие агенты (2-меркаптоэтанол, ДТТ) и другие примеси (кроме детергентов), присутствующие в пробе, не оказывают влияния на результаты измерений. Краситель QuDye для определения количества белка достаточно универсален и позволяет измерять концентрацию различных белков с высокой чувствительностью. Данный продукт входит в состав готового Набора для определения количества белка на флуориметре, а также востребован как OEM-компонент для наборов других производителей.

Стрептавидин представляет собой тетрамерный биотин-связывающий белок, выделенный из бактерии Streptomyces avidinii. Стрептавидин способен с высокой аффинностью и селективностью связывать до четырех молекул биотина посредством множественных водородных связей и ван-дер-ваальсовых взаимодействий. Из-за отсутствия углеводных модификаций и близкого к нейтральному pI, стрептавидин демонстрирует меньшее неспецифическое связывание, в сравнении с другим биотин-связывающим белком — авидином. Стрептавидин обладает высокой термостабильностью и устойчивостью к экстремальным значениям pH, денатурирующим агентам и ферментативной деградации, что позволяет использовать его в широком спектре экспериментальных условий. Флуоресцентные конъюгаты стрептавидина обычно используют в качестве реагента второй ступени для специфического обнаружения различных биотин-меченых биомолекул, таких как белки (антитела и др.), нуклеиновые кислоты, липиды в протоколах непрямого иммунофлуоресцентного окрашивания, вестерн-блоттинге, проточной цитометрии, микропланшетном анализе и других методах детекции. Данный стрептавидин представлен в форме лиофилизированного конъюгата с AMCA — одним из самых ярких синих флуорофоров. Рекомендуемый диапазон концентраций для использования составляет 0,5-10 мкг/мл. Избегайте использования растворов, содержащих биотин (некоторые сыворотки, RPMI 1640 и т. д.) в качестве разбавителей.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CGRYCG CGRY↑CG GCYRGC GC↓YRGC Источник: Bacillus stearothermophilus MC Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 10 10 50 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 50°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Набор позволяет количественно определять содержание ДНК в образце в присутствии РНК, белков и других посторонних компонентов. В набор входит краситель PreciseGreen в виде 200x раствора в ДМСО, буфер и ДНК-стандарт для количественных измерений. Этот набор совместим с флуориметрами, планшетными и кюветными флуориметрами, микрофлуориметрами.

Антитела козы к иммуноглобулину IgM человека: пероксидаза идеально подходят для использования в методах иммуноферментного анализа. В ИФА имеют следующую специфичность: IgM человека 100% IgA человека <5% IgG человека <5% IgM представляют собой пентамер основной четырехцепочной единицы, ситезируемый плазматическими клетками и составляет 5 - 10% от общего количества иммуноглобулинов в сыворотке крови. Антитела IgM появляются при первичном иммунном ответе B-лимфоцитами на ранее неизвестный антиген. К биологической функции IgM можно отнести агглютинацию бактерий, нейтрализацию вирусов, активации комплемента. В дополнение IgM играют важную роль в выводе возбудителя из кровеносного русла. Повышенное содержание IgM в крови наблюдается при ряде инфекций, как у взрослых, так и у новорожденных.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: RAATTY R↑AATTY YTTAAR YTTAA↓R Источник: Arthrobacter citreus Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25 50 50 100 10 100 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 50°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

N-сукцинимидил-4-азидо-2,3,5,6-тетрафторбензоат (ATFB SE, ATFB-OSu) представляет собой фотоактивируемый линкер, используемый в качестве универсального маркирующего агента для исследования биологических рецепторов и для прямого покрытия поверхностей полимеров на углеродной и органической основе.. При фотолизе под воздействием света (максимальное поглощение при 258 нм) ATFB производит стабилизированные промежуточные соединения нитрена, которые легко вступают в реакции внедрения и присоединения с соседними молекулами, демонстрируя при этом выходы от умеренных до хороших. Данное соединение представляет собой производное активированного эфира N-гидроксисукцинимида (NHS-эфир, SE), которое может реагировать практически с любой первичной или вторичной аминной группой биомолекул, таких как белки, пептиды, а также с низкомолекулярными аминами.

Производное красителя Cyanine5, содержащее свободную карбоксильную группу. Это соединение имеет ограниченную растворимость в воде и хорошо растворяется в водно-органических смесях, содержащих диметилформамид или диметилсульфоксид. Доступен водорастворимый аналог - sulfo-Cyanine5 карбоновая кислота. Этот краситель можно использовать в качестве стандарта флуоресценции в канале Cy5, в качестве референсного красителя или для экспериментов с отрицательным контролем. Карбоновую кислоту при активации карбодиимидами можно конъюгировать посредством этерификации по Штеглиху или использовать ее для ацилирования аминогрупп. Для мечения аминогрупп доступны активированные карбоксильные производные - Cyanine5 активированный эфир и водорастворимый активированный эфир sulfo-Cyanine5.