Биореактивы

Иммуноглобулины IgM человека (H Imm), могут быть использованы в качестве высокоочищенного антигена для иммунизации, рефернс-стандарта, антигена для покрытия пластиковых поверхностей в ИФА и других иммунологических тестах, лиганда для приготовления иммуносорбентов. По данным SDS-Page электрофореза в препарате H Imm содержится: IgM человека > 95 % IgG, IgA человека 2 % Прочие сывороточные белки человека 2 % Молекула IgM обычно существует в пентамерной форме (молекулярная масса около 900 кДа), изредка - в виде других полимерных комплексов и весьма редко - как мономер. IgM представляют собой классические поверхностные иммуноглобулины, связанные с клеточной мембраной зрелых B-лимфоцитов. Они имеют четыре консервативных домена. Пентамерные молекулы IgM удерживаются с помощью J-цепей. IgM имеет высокое сродство к комплементу.

TAMRA (тетраметилродамин) — ксантеновый краситель с максимум флуоресценции при 567 нм. Данный продукт представляет собой чистый 6-изомер N-гидроксисукцинимидного эфира красителя TAMRA. Активированный эфир TAMRA легко реагирует с различными аминами и используется для получения флуоресцентно-меченых белков, пептидов, антител и других биомолекул.

Источник: Выделена из культуры клеток человека линии Raji, мужских лимфобластоподобных клеток из лимфомы Беркитта. Описание: Геномная ДНК из культуры клеток человека линии Raji. Клетки выращивались в питательной среде RPMI-1640 – 90%, сыворотка крови плода коровы – 10%. Способ культивирования – суспензионный. Геномная ДНК выделялась по стандартной методике. Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA. Хранить при – 20°С. Контроль качества: Препарат ДНК не содержит примесей белков и РНК. Примечание: Следует избегать многократного замораживания-оттаивания.

Описание: Набор dNTP (ферментативно синтезированных) состоит из четырех индивидуальных растворов dATP, dCTP, dGTP, dTTP. Концентрация каждого dNTP 40 mM. Тестировано в ПЦР для получения продуктов длиной более 15 тыс. пар нуклеотидов с ДНК фага Т7 в качестве матрицы. . Способ получения: Ферментативный синтез Условия хранения: Хранить при -20°С Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Cyanine2 - активированный эфир красителя для двумерного электрофореза, аналог Cy2® NHS ester minimal dye. Этот реагент расфасован с высокой точностью. Каждая пробирка содержит указанное количество активированного эфира с допуском 10%. Cyanine2 обычно используется в протеомике в качестве внутреннего стандарта в двумерных электрофоретических экспериментах с Cyanine3 и Cyanine5.

Cyanine3B — цианиновый краситель с желтой эмиссией, являющийся улучшенной версией флуорофора Cyanine3, обладающий значительно более высокими квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью. Данный краситель содержит аминогруппу, отделенную от ядра флуорофора длинным линкером, что облегчает его конъюгацию. Алифатическая первичная аминогруппа вступает в реакции сочетания с различными электрофилами (активированными эфирами, эпоксидами и др.). Краситель также может использоваться в мечении с помощью катализируемого ферментами трансаминирования.

MD ДНК эндонуклеаза Kro I. Метилзависимая ДНК эндонуклеаза отличается от эндонуклеаз рестрикции тем, что режет ДНК исключительно при наличии метильных групп в сайте узнавании. При отсутствии метилирования гидролиз отсутствует. Сайт узнавания и позиция гидролиза: GC(5mC)GGC G↑C(5mC)GGC CGG(5mC)CG CGG(5mC)C↓G Источник: Kocurea rosea 307 Определение единицы активности: За одну единицу активности принимается количество фермента, необходимое дляполного гидролиза 1 мкг линейной формы плазмиды pMHpaII1/DriI за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: Субстрат pMHpaII1/DriI представляет собой ДНК плазмиды pMHpaII1, линеаризованной эндонуклеазой рестрикции DriI. Плазмида pMHpaII1 содержит ген ДНК-метилтрасферазы M.HpaII, которая модифицирует сайт узнавания 5`-CCGG-3` с образованием 5`-C(5mC)GG-3`/3`-GG(5mC)C-5`, и три сайта узнавания KroI 5`-GC(5mC)GGC-3`/3`-CGG(5mC)CG-5`. Оптимальный буфер: SE-буфер G Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 50 100 25 50 75 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин, 200 мкг/мл BSA. Хранить при -20°С. Лигирование: Неспецифический гидролиз: Не наблюдается неспецифического гидролиза при инкубации 1 ед фермента Kro I с 1 мкг ДНК фага лямбда в течение 16 часов при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Чувствительность к метилированию: Фермент расщепляет только С5-метилированную ДНК. Не расщепляет немодифицированную ДНК и ДНК, метилированную MspI ДНК-метилтрансферазой. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G.

Описание: Представляет собой смесь специальных плазмид гидролизованных определенными ферментами с образованием 13 фрагментов пригодных для использования в качестве стандарта молекулярных весов в агарозном гель-электрофорезе.Длины фрагментов Длина фрагмента, п.н. Масса ДНК, нг Длина фрагмента, п.н. Масса ДНК, нг 10000 60 2000 60 8000 60 1500 50 6000 60 1000 210 5000 60 750 60 4000 60 500 30 3000 200 250 20 2500 70 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA; 50 mM NaCl. Хранить при – 20°С. Примечание: ДНК маркер не предназначен для определения количества ДНК, однако может быть использован для приблизительной оценки путем сравнения интенсивности фрагментов одинакового размера. Мы рекомендуем наносить 0,5-1 мкг ДНК маркера на дорожку. Перед использованием в ДНК маркер добавить1/10 объема SE-буфера для нанесения с красителем. Маркер с красителем может храниться при 4-8°С в течение 6 месяцев.

Обратная транскриптаза (ревертаза) Magnus предназначена для синтеза первой цепи комплементарной ДНК с одноцепочечной матрицы РНК. Обратная транскриптаза Magnus — модифицированная ревертаза MMLV. Особенностью Magnus является повышенная термостойкость и отсутствие активности РНКазы H, что позволяет: – Увеличить температуру обратной транскрипции для повышения специфичности реакции. – Проводить синтез кДНК на GC-богатых областях и на матрицах со сложной вторичной структурой. – Получать кДНК длиной до 12 000 п.о. Область применения: • Синтез первой цепи кДНК с дальнейшей возможностью амплификации, клонирования и экспрессии. • Синтез первой цепи кДНК с последующим анализом с помощью ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ). Частные случаи применения: синтез первой цепи кДНК-копии РНКвирусов для последующей качественной или количественной оценки.

Родамин 6G (R6G) - ксантеновый краситель родаминового ряда, в течение длительного времени использующийся для мечения олигонуклеотидов. Как и другие ксантеновые красители, R6G доступен в виде двух изомеров, 5- и 6-. Несмотря на то, что их спектры поглощения и эмиссии практически неразличимы, изомеры все же следует разделять для того, чтобы меченые молекулы не разделялись при очистке методами хроматографии и электрофореза. Активированный эфир 5-R6G - производное для мечения аминогрупп биомолекул, полученное из чистого 5-изомера карбокси-R6G. Родамин 6G - очень яркий краситель. Его используют в качестве стандарта квантового выхода (0.95 в этаноле). Этот флуорофор растворим в органических растворителях, таких как ДМФА и ДМСО. Их следует спользовать в качестве сорастворителей в реакциях мечения.

Азидопроизводное красителя Cyanine3 для реакций клик-химии, аналог Cy3® азида. Cy3® - один из наиболее широко используемых флуорофоров, который совместим с различными флуориметрами, флуоресцентными микроскопами и системами имиджинга. Благодаря высокому коэффициенту экстинкции, Cyanine3 также очень хорошо детектируется в гелях невооруженным глазом. Этот краситель - несульфированное производное, требующее добавления органического растворителя (DMF, DMSO, ацетонитрила) для конъюгации в водных растворах. Водорастворимый вариант этого красителя - sulfo-Cyanine3 азид. Этот реагент поставляется как в твердом виде, так и в виде 10 мМ раствора в DMSO, готовом для использования в нашем рекомендованном протоколе. Cyanine3 по своим спектральным свойствам идентичен Cy3® и похож на DyLight 549.

Иммуноглобулины IgG человека (H Igg), могут быть использованы в качестве высокоочищенного антигена для иммунизации, рефернс-стандарта, антигена для покрытия пластиковых поверхностей в ИФА и других иммунологических тестах, лиганда для приготовления иммуносорбентов. По данным SDS-Page электрофореза в препарате H Igg содержится: IgG человека > 95 % IgA, IgM человека 2 % Прочие сывороточные белки человека 2 % Иммуноглобулин IgG - основной вид сывороточных иммуноглобулинов, участвующих в иммунном ответе. Молекула IgG состоит из двух тяжелых и двух легких цепей и имеет молекулярную массу около 150 кДа. Биологическая роль IgG разнообразна. Это и антибактериальная защита через механизм комплементзависимого лизиса микробной клетки, и проникновение через плаценту с той же защитной для зародыша функцией, и «армирование» макрофагов, в результате чего они становятся цитотоксическим для трансплантатов и опухолей, и участие в повышенной реактивности аллергического типа.