بوليميراز حمض ديكسيريبونوكليك الاندماجي (Pfu-Sso7d) 100 e.a.

 Преимущества набора: • ДНК из любых реакционных смесей, фрагменты длины от 70 до 20000 п. о. • Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,0 • Выделенный ПЦР-продукт пригоден для проведения лигирования, рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР.

Genta-RT kit представляет собой набор реагентов для проведения синтеза первой цепи кДНК на матрице РНК. Набор включает в себя: in silico модифицированный гомолог обратной транскриптазы вируса лейкемии мышей Молони (MMLV) – Genta REV M ревертазу; Олиго(dT)18 праймер; воду для ПЦР и 2 вида 5-кратного реакционного буфера (включающего в себя дНТФ и ДТТ): 5х ОТ-буфер R – наличие Random-праймеров в реакционном буфере позволяет проводить синтез тотальной кДНК. 5х ОТ-буфер – требуется добавление специфических праймеров для синтеза целевого фрагмента кДНК; или добавление Олиго(dT)18 праймера для полиаденилированной РНК.

Продукт представляет собой стерильный 10 мМ раствор аналога структуры кэпа ARCA в виде аммонийной соли в воде. Продукт протестирован на присутствие эндо- и экзонуклеазной активности и свободен от примесей ДНКаз и РНКаз. Чистота нуклеотида по данным ВЭЖХ не менее 96%. Функциональная активность подтверждена in vitro в реакции транскрипции.

Набор представляет собой систему из 2 реагентов на основе D-люциферина, использующуюся для количественного определения люциферазы светлячка (Firefly luciferase), которая является одним из наиболее чувствительных инструментов для анализа экспрессии генов. Характеристики Данный продукт представлен в виде 2 отдельных реагентов: 1) буфер для анализа (реагент #1), 2) субстрат люциферазы светлячка – Firefly luciferase (реагент #2). Параметр Значение Назначение Детекция люциферазы светлячка (Firefly Luciferase) Принцип Биолюминесценция Анализ Люминометрический

Лучший субстрат для люциферазы NanoLuc. Масса Цена, руб Каталожный номер Срок изготовления 1 мг 9 000 LUX-02-5-1MG 2 недели 10 мг 72 000 LUX-02-5-10MG 4 недели 50 мг 288 000 LUX-02-5-50MG 4 недели Характеристики Параметр Значение CAS номер 1374040-24-0 Химическая формула C24H19N3O2 Молекулярная масса 381.4 г/моль Специфичность NanoLuc Применение Люминесцентный субстрат Возможность применения in vivo Да Хранение -80 ОС

Протеиназа К — сериновая протеаза, обладающая широким спектром специфичности. Фермент гидролизует пептидные связи со стороны карбоксильной группы ароматических, алифатических и гидрофобных аминокислот. Используется для очистки ферментативных смесей и клеточных лизатов от белковых примесей различной природы, для инактивации нуклеаз, а также для повышения эффективности лизиса тканей при выделении нуклеиновых кислот.

Источник: Proteus vulgaris 84 Описание: Расщепляет нативную и денатурированную ДНК и РНК до олигонуклеотидов длиной 3-5 нуклеотидных остатков с 5`-фосфатом на конце Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента необходимое для гидролиза 1 мкг данного олигонуклеотидного дуплекса за 30 мин при 37°С в 20 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: Олигонуклеотидный дуплекс 5’-AGCAAATATTGCTCGATATC-3’ 3’-TCGTTTATAACGAGCTATAG-5’ Оптимальный буфер: SE буфер Эндонуклеаза I Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.4); 250 mM NaCl; 0,2 mM EDTA; 100 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.

Термолабильная щелочная фосфатаза удаляет фосфаты с 5`- и 3`-концов ДНК, РНК и ДНТФ. Может быть использована вместо антарктической фосфатазы Источник: Выделена из штамма E.coli несущего клонированный ген щелочной фосфатазы из Alteromonas undina P2 Описание: Термолабильная щелочная фосфатаза (англ. TAP) катализирует дефосфорилирование 5`- и 3`-концов ДНК и РНК. Также гидролизует рибо- и дезоксирибонуклеозидтрифосфаты. Определение единицы активности: За единицу активности принимали количество фермента, необходимое для гидролиза 1 μмоля пара-нитрофенилфосфат (PNPP) в 0,5 мл реакционной смеси за 15 мин при 16°C. Реакционная смесь содержала 1Х SE-буфер W, 10 mM пара-нитрофенилфосфат. Оптимальный буфер: SE-буфер W Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°:C); 0.1 mM ZnCl2; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Примечание: Термолабильную щелочную фосфатазу не рекомендуется разбавлять ввиду возможной потери активности. Функциональный тест: В результате обработки 1 мкг ДНК плазмиды pUC19/HindIII в 20 мкл реакционной смеси, содержащей 1Х SE -буфер W и 1 мкл препарата фермента, в течение 30 мин при 16°C и последующей сшивки с помощью Т4 ДНК лигазы и трансформации клеток E.coli,получали >10-кратное уменьшение числа выросших колоний по сравнению с использованием необработанной ДНК pUC19/Hind III. Протокол дефосфорилирования 5′-концов ДНК с помощью ТАР после гидролиза эндонуклеазой рестрикции (ЭР): На 20 мкл реакционной смеси: 10Х SE буфер ЭР (или буфер “W”) – 2 мкл, ДНК – 0,5-1мкг, деионизованная вода – до 20 мкл. Добавить 1 мкл эндонуклеазы рестрикции, перемешать пипетированием. Инкубировать в течении 0,5-1 часа при оптимальной температуре. Охладить реакционную смесь во льду в течение 1-2 мин!!! Добавить 1 мкл (5 ед.) щелочной фосфатазы (Е365/Е366), перемешать пипетированием. Инкубировать в течение 0,5-1 часа при 16°C(при 25°C активность фермента составляет 75-100%). Прогреть реакционную смесь при 65°C в течение 20 мин. Можно использовать обработанную ДНК для дальнейших экспериментов. Если требуется, очистить ДНК гель-фильтрацией, на спин-колонках или высадить 96%-ным этанолом.

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего рекомбинантный ген Taq-ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus.. Описание: Катализирует матричный синтез ДНК путем переноса нуклеотида от dNTP на 3` конец ДНК Определение единицы активности: За одну единицу активности Taq ДНК полимеразы принимали количество фермента,необходимое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 72°С. Оптимальный буфер: SE-буфер AS (Ammonium Sulfate) Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 0,5 % Тритон Х-100; 50% глицерин. Хранить при -20°С

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего клонированный ген I фага T7. Описание: Катализирует синтез РНК, используя в качестве матрицы ДНК, содержащую промотор фага Т7. T7 РНК полимераза используется для приготовления меченого РНК зонда и для проведения транскрипции in vitro. Определение единицы активности: За одну единицу активности T7 РНК полимеразы принимали количество фермента необходимое для включения 1 нмоля NTP в кислотонерастворимую фракцию за 60 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер Т7 РНК полимераза Условия хранения: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 1 mM EDTA; 20 mM 2-меркаптоэтанол; 0,1% Тритон Х-100; 50% глицерин. Хранить при -20°C.

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду. Описание: Катализирует синтез ДНК в 5` -> 3` направлении и требует присутствия матрицы и праймера. Имеет 3` -> 5` экзонуклеазную активность. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер ДНК полимераза T4 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 10 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°C.

Источник: Выделена из рекомбинантного штамма E.coli экспрессирующего ген ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus YT1 Описание: Hot Start Taq ДНК-полимераза является сложной смесью термостабильной Taq ДНК-полимеразы молекулярной массой 94 kDa и специфических моноклональных антител из мыши. Hot Start Taq неактивна в условиях приготовления реакции амплификации. Это позволяет исключать такие артефакты амплификации как образование димеров праймеров и ошибочное праймирование на протяжении стадии преамплификации и таким образом может улучшать специфичность по сравнению со стандартными ДНК полимеразами. Преимуществом Hot Start Taq является отсутствие дополнительного нагрева для активации полимеразы. Тепловая активация фермента происходит в течение первой денатурации. Неактивный комплекс Hot Start Taq диссоциирует автоматически при повышении температуры выше + 70 °C, приводя к активации ДНК-полимеразы. Катализирует матричный синтез ДНК путем переноса нуклеотида от dNTP на 3`конец ДНК. Применение: Высокоспецифичная PCR Мультиплексная PCR (особенно рекомендуется) Высокочувствительные применения Определение единицы активности: За одну единицу активности принимается количество фермента требуемое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 минут при 74 °C Оптимальный буфер: SE-буфер ДНК полимераза Hot Start Taq Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0); 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 % глицерин; 0.5 % Nonidet P-40, 0.5 % Tween-20. Хранить при -20°С. С ферментом поставляется: 10 x SE-буфер Hot Start Taq ДНК полимераза, MgCl2.

Источник: Из штамма E.coli, несущего рекомбинантный ген Описание: Урацил-ДНК-гликозилаза катализирует высвобождение свободного урацила из урацил-содержащих ДНК. UDG эффективно гидролизует урацил из одно- и двуцепочечных ДНК, но не из олигомеров (6 или менее оснований) Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для высвобождения 60 пмолей урацила за 1 мин из двуцепочечной урацил-содержащей ДНК при 37°С. Активность измеряется по высвобождению меченого[3Н]–урацила в 50 мкл рекционной смеси, содержащей 0,2 мкг ДНК (8.7 х 104cpm/μg) за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер Урацил ДНК гликозилаза Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 1 mM EDTA; 1mM DTT; 50% глицерин. Хранить при -20°С.

Источник: Выделен из штамма E.coli, содержащего ген ДНК-полимеразы (Фрагмент Кленова) Описание: Продукт протеолиза ДНК Полимеразы I (E.coli), у которого сохраняется полимеразная и экзонуклеазная активность в направлении 3`->5`, но отсутствует экзонуклеазная активность в направлении 5`->3`. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для перевода 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер Фрагмент Кленова Условия хранения: 10 mM KH2PO4(pH 7.5); 50 mM KCl; 0.5 mM EDTA; 10 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°C.

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду. Описание: TaqSE ДНК полимераза является сложной смесью термостабильных ДНК-полимераз. Катализирует матричный синтез ДНК путем переноса нуклеотида от dNTP на 3` конец ДНК. Препарат TaqSE ДНК полимеразы обеспечивает более высокую точность копирования ДНК, уменьшает количество побочных продуктов. Может образовывать продукты с тупыми концами благодаря наличию 3`->5` экзонуклеазной активности. Выход продукта может быть выше по сравнению с Taq ДНК полимеразой. Определение единицы активности: За одну единицу активности TaqSE ДНК полимеразы принимали количество фермента,необходимое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 72°С. Оптимальный буфер: SE-буфер ДНК полимераза Taq Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 0,5 % Тритон Х-100; 50% глицерин. Хранить при -20°С Примечание: Не для рутинного использования, для специального применения! Протокол для проведения ПЦР с TaqSE ДНК полимеразой отличается от протокола проведения ПЦР с Taq ДНК полимеразой. TaqSE ДНК полимераза при использовании ферментативно синтезированных трифосфатов (Смесь dNTP(ферм.) для ПЦР 2.5mM каждого, кат.номер N026) тестирована в ПЦР при амплификации фрагмента ДНК фага Т7 длиной 15 тыс. пар нуклеотидов.

Источник: Выделена из штамма E.coli, несущего рекомбинантный ген Taq-ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus.. Описание: SP-Taq ДНК полимераза представляет собой фракцию Taq ДНК полимеразы, подвергнутую специальной обработке и дополнительной очистке. Не содержит примесей ДНК, выявляемых ПЦР. Пригодна для различных работ в области ПЦР-диагностики. Определение единицы активности: За одну единицу активности SP-Taq ДНК полимеразы принимали количество фермента, необходимое для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 72°С. Условия определения активности:60 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25° C), 25 mM KCl, 1.5 mM MgCl2 , 10 mM 2-меркаптоэтанол, 0.1 % Тритон Х-100, 200 mkM dATP, dCTP, dGTP, 50 mkM H-TTP, 12.5 mkg активированной ДНК тимуса теленка в 50 мкл реакционной смеси. Оптимальный буфер: SE-буфер ДНК полимераза Taq Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 0,5 % Тритон Х-100; 50% глицерин. Хранить при -20°С