融合DNA聚合酶是一种重组多肽,由融合的热稳定DNA聚合酶Pyrococcus furiosus(Pfu)和物种Sulfolobus solfataricus(Sso7d)的嗜热古菌的DNA结合蛋白组成。 Sso7d蛋白与双链DNA的小沟结合并另外稳定与基质的聚合酶复合物。 因此,与天然Pfu DNA聚合酶相比,融合DNA聚合酶具有增加的可加工性,合成准确性,片段扩增率和增加的对PCR抑制剂的抗性[1]。 融合DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性,3'→5'核酸外切酶活性并合成具有钝端的产物。
融合DNA聚合酶是常规克隆的良好选择,可用于通过PCR产生长或复杂的扩增子。
使用融合DNA聚合酶的实例呈现在描述的末尾。
融合DNA聚合酶从大肠杆菌菌株中分离,该菌株含有克隆的DNA片段,该片段由热稳定的Pyrococcus furiosus DNA聚合酶(Pfu)和DNA结合蛋白Sulfolobus solfataricus(Sso7d)的融合基因组成。
一个活性单位对应于在74°C下在30分钟内将10nmol dNTP掺入酸不溶性DNA级分所需的酶量。