Биореактивы

Производное красителя Cyanine 5.5, излучающего в дальнекрасном-ближнем ИК-диапазоне. Имеет реакционную способность по отношению к карбонильным группам альдегидов и кетонов. Гидразиды быстро реагируют с карбонильными соединениями, образуя стабильные гидразоны. Этой реакцией удобно пользоваться для приготовления меченых конъюгатов. Карбонильные группы образуются в биомолекулах после воздействия окислительного стресса или деаминирования белков. Кроме того, альдегидные группы можно ввести искусственно путем окисления углеводной части гликозилированных белков (в том числе антител) периодатом. Так, антитела можно пометить флуоресцентным красителем, окислив их периодатом натрия и затем введя в реакцию с гидразидом Cyanine5.5. Данный способ мечения антител особенно хорош тем, что углеводные остатки находятся в удалении от вариабельного сайта связывания эпитопа, поэтому мечение не оказывает большого влияния на аффинность. Сyanine 5.5 - флуорофор для дальнекрасной и ближней ИК-области, аналог Cy5.5®. Он особенно подходит для тех случаев, когда фоновая флуоресценция должна быть низкой. Длины волн поглощения и флуоресценции красителя достаточно хорошо проникают через ткани, поэтому Cyanine5.5 пригоден для имэджинга in vivo в ближнем ИК-диапазоне.

Реакционная смесь 5Х qPCRmix-HS (UDG) предназначена для ПЦР и ПЦР-РВ с защитой от контаминации полученными ранее ПЦР-продуктами. ПЦР в реальном времени возможна с интеркалирующими красителями (SYBR Green, EVA Green) и флуоресцентными зондами (TaqMan пробы), в том числе с целью генотипирования. В состав смеси входят UDG (урацил-ДНК-гликозилаза) и нуклеотиды dUTP. На первом этапе фермент UDG разрушает все ранее амплифицированные ПЦР-продукты по включенным остаткам dUTP. Это помогает предотвратить кроссконтаминацию, не влияя на эффективность ПЦР и последующие анализы (например, анализ кривой плавления или гель-электрофорез ПЦРпродукта). 5Х qPCRmix-HS (UDG) содержит все необходимые компоненты ПЦР: Taq ДНК-полимеразу с «горячим стартом», UDG, смесь dNTP (включая dUTP в оптимальной пропорции), ионы Mg2+, ПЦР буфер. Для выполнения ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, ДНКматрицу и воду. При использовании для ПЦР в реальном времени в смесь добавляются компоненты для детекции ДНК в зависимости от применяемого метода.

BDP R6G это краситель бордипиррометенового ряда. Благодаря наличию в своем в составе N-гидроксисукцинимидных (NHS) групп, способен к химическому присоединению к аминам. Его спектры абсорбции и эмиссии похожи на спектры красителя R6G. BDP R6G - яркий и фотостабильный краситель, с большим временем жизни флуоресценции, не показывающим сколь-нибудь заметной pH-зависимости. По причине относительно долгого времени жизни флуоресценции, краситель подходит для использования в экспериментах, связанных с анизотропией поляризации, и для двухфотонных экспериментов. N-cукцинимидная группа может вступать в конъюгацию с различными аминогруппами, присутствующими в белках и пептидах.

Азидопропанол - бифункциональный синтон с азидогруппой и гидроксильной группой. Он может использоваться для реакции азид-алкинового диполярного циклоприсоединения или лигирования по Штаудингеру. Гидроксильная группа может быть вовлечена в реакцию с N,N-карбонилдиимидазолом в неводной среде с последующей реакцией с аминами, ведущей к карбаматам. Существует много других способов использования этого линкера.

Краситель Cyanine5.5 со свободной карбоксильной группой. Этот краситель можно использовать в тех случаях, когда функциональная группа не нужна, например, в качестве отрицательного стандарта при экспериментах с активированным эфиром Cyanine5.5, а также для калибровки флуориметров в канале Cy5.5. Карбоксильное производное можно использовать в реакции этерификации по Штеглиху или для ацилирования аминов после активации (например, карбодиимидами). Мы также производим активированное производное этого красителя - гидроксисукцинимидный эфир Cyanine5.5.

Стрептавидин представляет собой тетрамерный биотин-связывающий белок, выделенный из бактерии Streptomyces avidinii. Стрептавидин способен с высокой аффинностью и селективностью связывать до четырех молекул биотина посредством множественных водородных связей и ван-дер-ваальсовых взаимодействий. Из-за отсутствия углеводных модификаций и близкого к нейтральному pI, стрептавидин демонстрирует меньшее неспецифическое связывание, в сравнении с другим биотин-связывающим белком — авидином. Стрептавидин обладает высокой термостабильностью и устойчивостью к экстремальным значениям pH, денатурирующим агентам и ферментативной деградации, что позволяет использовать его в широком спектре экспериментальных условий. Флуоресцентные конъюгаты стрептавидина обычно используют в качестве реагента второй ступени для специфического обнаружения различных биотин-меченых биомолекул, таких как белки (антитела и др.), нуклеиновые кислоты, липиды в протоколах непрямого иммунофлуоресцентного окрашивания, вестерн-блоттинге, проточной цитометрии, микропланшетном анализе и других методах детекции. Данный стрептавидин представлен в форме лиофилизированного конъюгата с AMCA — одним из самых ярких синих флуорофоров. Рекомендуемый диапазон концентраций для использования составляет 0,5-10 мкг/мл. Избегайте использования растворов, содержащих биотин (некоторые сыворотки, RPMI 1640 и т. д.) в качестве разбавителей.

Максимум флуоресценции BDP 558/568 лежит в желтой области спектра (569 нм). Данный краситель является аналогом такого флуорофора как Cy3™ по спектральным характеристикам. Он растворим в полярных органических растворителях, обладает хорошей фотостабильностью и высоким квантовым выходом. Краситель BDP 558/568 обладает гидрофобными свойствами и подходит для окрашивания липидов, мембран и других липофильных соединений. Введенная в молекулу BDP 558/568 циклооктиновая функциональная группа позволяет вступать в реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения с различными замещенными азидами. Подобные реакции промотируются напряжением цикла и не требуют медных катализаторов. Поэтому данный метод подходит для изучения различных процессов в живых клетках. BDP 558/568 ДБЦО используется для детекции целевых молекул, белков или нуклеиновых кислот, содержащих азидные группы, с помощью микроскопии и проточной цитометрии.

Cyanine5 гидразид - реакционноспособное производное красителя Cyanine5 для мечения альдегидов и кетонов. Аналог Cy5® гидразида. Этот краситель гладко и практически количественно реагирует с карбонильными группами в биомолекулах. Например, карбонильные группы образуются в белках, подвергнутых окислительному стрессу, в гликозилированных белках (в том числе антителах) после окисления их периодатом. Cyanine5 по своим флуоресцентным свойствам способен заменить Cy5®, DyLight 649.

Oligo(dT)15 предназначен для синтеза первой цепи тотальной кДНК на РНК-матрице при помощи MMLV ревертазы. Рекомендуемая концентрация праймеров в реакционной смеси: 1–3 мкМ. Oligo(dT)15 праймер используют только для полиаденилированной РНК. • Количественный анализ 3’-концевых фрагментов РНК методом ОТ-ПЦР. • Амплификация полноразмерных транскриптов или синтез второй цепи кДНК для приготовления кДНКбиблиотек, обогащенных полноразмерными последовательностями.

Антитела кролика к иммуноглобулинам козы: ФИТЦ идеально подходят для использования в методах иммунохимии. В ИФА имеют следующую специфичность: Иммуноглобулины козы 100 % Иммуноглобулины человека <5 %.

YODi-1 (гомодимер Оксазолового Желтого, также известный как YOYO®-1) — димерный краситель на основе карбоцианина с флуоресценцией в зеленой части спектра. YODi-1 — непроникающий в живые клетки ядерный краситель, который не флуоресцирует в отсутствие нуклеиновых кислот. Краситель значительно усиливает свою флуоресценцию при связывании с двуцепочечной ДНК. YODi-1 идеален для окрашивания нуклеиновых кислот на микрочипах, а также для контрастного окрашивания ядер и хромосом в экспериментах с многоцветным флуоресцентным мечением благодаря яркому сигналу и низкой фоновой флуоресценции. Краситель также подходит для анализа единичных молекул ДНК.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCCGGC GCC↑GGC CGGCCG CGG↓CCG Источник: Kocurea rosea56 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг ДНК pSXH7в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере B при 37°С за 1 час. Субстрат для определения активности: плазмидная ДНК pSXH7 (13092 п.н.). pSXH7 получена путем лигирования вектора pUC19/BamHIи BstX2I-фрагмент а геномной ДНК бактерии Sporosarcina species9 (GC-состав 70-76%). Содержит 42 сайта узнавания KroNI Оптимальный буфер: SE-буфер B (10 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 1 mM DTT.) Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 – 100 10 – 25 25 – 50 75 – 100 50 Условия хранения: 20mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 100 мкг/мл BSA, 7 mM 2-меркаптоэт анол, 50% глицерин Срок хранения фермента 2 года Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 4ед фермента в течение 16 часов при 37°С Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием 5′-GC(5mC)GGC-3’/3′-CGG(5mC)CG-5′. Примечание: После инкубации 2 ед фермент а в течение 3 часов неспецифического гидролиза одно- и двуцепочечного олигонуклеотидов не наблюдается. Для эффективного гидролиза ДНК ферментом требуется два или больше сайтов узнавания.