Биореактивы

Геномная ДНК выделена из культуры клеток человека линии Raji (мужские лимфобластоподобные клетки из лимфомы Беркитта), фрагментирована ультразвуком и растворена в концентрации 100 мкг/мл в 10 мM Tрис-HCl буфере (pH 8,0), содержащем 1 мM ЭДTA. Препарат не содержит нуклеаз и ДНК из микоплазмы. Рекомендуется в качестве контроля при проведении ПЦР с детекцией в реальном времени.

Реагент предназначен для синтеза олигонуклеотидов, модифицированных фосфатной группой по 5’-положению. Желтоватое масло. Хорошо растворим в ацетонитриле и хлористом метилене.

Набор предназначен для очистки фрагментов двухцепочечной ДНК из агарозного геля и ферментативных реакционных смесей (ПЦР, рестрикция, лигирование и т.д.). Очищенная ДНК пригодна для ПЦР, секвенирования, рестрикции, лигирования, трансформации, трансфекции и других молекулярно-биологических приложений.

В набор входят реактивы для синтеза кДНК на основе тотальной или полиА+ РНК и последующей амплификации 5' и 3’ концевых фрагментов кДНК интересующих генов: Набор для синтеза кДНК Mint Набор для ПЦР Encyclo Plus PCR kit Набор адаптеров Mint RACE primer set Вектор pAL2-T для быстрого клонирования продуктов ПЦР. Набор предназначен для быстрой амплификации 5’- и 3’-концевых фрагментов транскриптов с помощью технологии Step-Out RACE. В настоящий момент этот метод является самым быстрым и надежным способом получить данные о структуре полноразмерного транскрипта, основываясь на минимальной информации о его последовательности (30-50 нуклеотидов). В технологии Step-Out RACE нет сложного процесса лигирования адаптеров и трудоемких процедур клонирования и скрининга полноразмерных библиотек кДНК.

Спецификация Наименование показателя Норма Чистота (ГХ): ≥ 99,8 % Содержание воды по Фишеру, ppm 100 Кислотность: ≤ 0,00050 мэкв/г Щелочность: ≤ 0,00050 мэкв/г Содержание метанола, % < 0,1 Содержание этанола, % < 0,01 Содержание н-пропанола, % < 0,05 В кювете 1 см: оптическая плотность (% пропускания) Пропускание (при 207 нм): <1,000 (≥ 10,0 %) Пропускание (при 210 нм): <0,398 (≥ 40,0 %) Пропускание (при 215 нм): <0,301 (≥ 50,0 %) Пропускание (при 220 нм): <0,155 (≥ 70,0 %) Пропускание (при 230 нм): <0,071 (≥ 85,0 %) Пропускание (при 240 нм): <0,046 (≥ 90,0 %) Пропускание (от 250-400 нм): <0,009 (≥ 98,0 %) Содержание металлов, мг/кг Серебро ≤ 0,05 мг/кг (ПО*) Алюминий ≤ 0,1 мг/кг (ПО) Барий ≤ 0,1 мг/кг (ПО) Кальций ≤ 0,1 мг/кг (ПО) Кадмий ≤ 0,4 мг/кг (ПО) Кобальт ≤ 0,4 мг/кг (ПО) Хром ≤ 0,05 мг/кг (ПО) Медь ≤ 0,1 мг/кг (ПО) Железо ≤ 0,4 мг/кг (ПО) Калий ≤ 1 мг/кг (ПО) Магний ≤ 0,1 мг/кг (ПО) Марганец ≤ 0,02 мг/кг (ПО) Натрий ≤ 0,2 мг/кг (ПО) Никель ≤ 0,1 мг/кг (ПО) Свинец ≤ 0,2 мг/кг (ПО) Олово ≤ 2,0 мг/кг (ПО) Цинк ≤ 0,5 мг/кг (ПО) *ПО- предел обнаружения для атомно-абсорбционного спектрометра Отфильтрован 0,2 мкм. фильтром и закупорен в атмосфере аргона.

Наименование показателя Норма Внешний вид Бесцветные кристаллы Температура плавления, °C 117-122 Потери при высушивании, %, не более 0.3 Массовая доля основного вещества в пересчете на абсолютно сухое вещество, % 99-101 (реакция с нитратом серебра). Содержание железа (Fe), не более 5 ppm Пропускание(1 см/6 M в воде ВЭЖХ класса) при 280 нм, не более 0.6 Пропускание(1 см/6 M в воде ВЭЖХ класса) при 300 нм, не более 0.1 pH (1 M) 4.7 – 7.0 ДНКазы и РНКазы, Не обнаруживаются.

Реакционная смесь 5Х qPCRmix-HS (UDG) предназначена для ПЦР и ПЦР-РВ с защитой от контаминации полученными ранее ПЦР-продуктами. ПЦР в реальном времени возможна с интеркалирующими красителями (SYBR Green, EVA Green) и флуоресцентными зондами (TaqMan пробы), в том числе с целью генотипирования. В состав смеси входят UDG (урацил-ДНК-гликозилаза) и нуклеотиды dUTP. На первом этапе фермент UDG разрушает все ранее амплифицированные ПЦР-продукты по включенным остаткам dUTP. Это помогает предотвратить кроссконтаминацию, не влияя на эффективность ПЦР и последующие анализы (например, анализ кривой плавления или гель-электрофорез ПЦРпродукта). 5Х qPCRmix-HS (UDG) содержит все необходимые компоненты ПЦР: Taq ДНК-полимеразу с «горячим стартом», UDG, смесь dNTP (включая dUTP в оптимальной пропорции), ионы Mg2+, ПЦР буфер. Для выполнения ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, ДНКматрицу и воду. При использовании для ПЦР в реальном времени в смесь добавляются компоненты для детекции ДНК в зависимости от применяемого метода.

Обратная транскриптаза (ревертаза) Mint предназначена для синтеза первой цепи комплементарной ДНК с одноцепочечной матрицы РНК. Обратная транскриптаза Mint — модифицированная ревертаза MMLV. Особенностью Mint является отсутствие активности РНКазы H и способность нематрично присоединять к 3’-концу первой цепи кДНК несколько дезоксинуклеотидов (преимущественно G или C) после завершения синтеза, что позволяет использовать первую цепь для синтеза полноразмерных кДНК библиотек и клонирования 5’-концов кДНК (5’-RACE). Область применения: • Синтез первой цепи кДНК для дальнейшего получения полноразмерных кДНК библиотек. • Синтез первой цепи кДНК с дальнейшей возможностью амплификации, клонирования и экспрессии. • Синтез первой цепи кДНК с последующим анализом с помощью ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ).

Набор предназначен для быстрого выделения плазмидной ДНК высокой степени очистки из культуры клеток E. coli. Выделенная ДНК пригодна для ПЦР, секвенирования, рестрикции, трансформации, трансфекции и других молекулярно-биологических приложений.

Окрашенная реакционная смесь 5X ScreenMix-HS (UDG) предназначена для проведения ПЦР с последующим электрофоретическим анализом продукта в агарозном геле. В состав смеси входят UDG (урацил-ДНКгликозилаза) и нуклеотиды dUTP. На первом этапе фермент UDG разрушает все ранее амплифицированные ПЦР-продукты по включенным остаткам dUTP, что предотвращает кросс-контаминацию. В состав 5X ScreenMix-HS (UDG) входят все необходимые компоненты ПЦР: Taq ДНК-полимераза с «горячим стартом», UDG, смесь dNTP (включая dUTP в оптимальной пропорции), ионы Mg2+, ПЦР буфер, глицерин, красители (красный и желтый). Красители и глицерин позволяют после прохождения ПЦР напрямую наносить реакционную смесь на гель для проведения электрофореза. Для постановки реакции ПЦР в смесь требуется добавить только праймеры, ДНК-матрицу и воду.