Лактат-ВИТАЛ

Описание: IPTG является высоко стабильным синтетическим аналогом лактозы. Он инактивирует lac-репрессор и запускает синтез β-галактозидазы – фермента, расщепляющего лактозу. IPTG используется для индукции экспрессии клонированных генов, находящихся под контролем lac-промотора. Он так же применяется совместно с X-Gal для определения lac-фенотипа при отборе белых/синих колоний E.coli. При использовании рекомендуется приготовить стоковый раствор IPTG в воде (0,5 М или 1 М). Конечная концентрация IPTG в среде LB может быть 0,1-0,2 мМ (для получения белых/синих колоний E.coli) или 0,3-1 мМ при индукции экспрессии клонированных генов (время индукции, как правило, 2-5 часов, иногда до 16 часов). Стоковый раствор можно хранить при +4-8 o C в течение 1 месяца или при -20 o C в течение 1 года (при размораживании раствор встряхнуть для перемешивания). Стоковый раствор IPTG добавлять в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C. Формула: C9H18O5S Молекулярный вес: 238,31 Температура плавления: 121-124°С Внешний вид: белый или слегка желтоватый порошок. Хроматографическая однородность: наличие одного пятна C RF =0.66-0.76. Чистота: 99.5%, для биохимии. ТСХ на силикагеле DC-ALUFOLIEN KIESELGEL 60Fв системе: н-бутанол/уксусная кислота/вода – 5/2/3. Условия хранения: при -20°С, в сухом темном месте. Перед вскрытием фасовку нагреть при комнатной температуре.

Описание: X-Gal используется совместно с IPTG для определения lac-фенотипа при отборе белых/синих колоний E.coli. X-Gal представляет собой инертный хромогенный субстрат для β-галактозидазы – фермента, расщепляющего лактозу. β-галактозидаза гидролизует X-Gal с образованием бесцветной галактозы и 4-хлор-3-бром-индиго, который имеет синюю окраску. Индукция гена lacZ путем добавления IPTG приводит к расщеплению X-Gal и появлению синих колоний E.coli. В случае нарушения структуры гена lacZ за счет встройки генетического материала (или делеции) цвет колоний будет белым. Стоковый раствор X-Gal следует готовить в необходимом количестве непосредственно перед его добавлением в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C. В качестве растворителя для X-Gal используется диметилсульфоксид (DMSO). Рекомендуется приготовить стоковый раствор X-Gal в DMSO с концентрацией 40-100 мг/мл. Конечная концентрация X-Gal в среде LB может быть 40-100 мкг/мл (для получения белых/синих колоний E.coli). Вариант применения: На 100 мл расплавленного LB-агара (50-55 o C) взять: 100 мкл стокового раствора X-Gal (10 мг сухого X-Gal растворить в 100 мкл DMSO в отдельной стерильной микропробирке); 40 мкл 0,5 М водного раствора IPTG; необходимое количество антибиотика (например, ампициллина до 50 мкг/мл). Все тщательно перемешать, разлить по чашкам Петри. Подсушить в стерильном боксе под УФ в течение 20-30 мин.

Аналитические растворы «АЛМАСС Нео» для определения врожденных заболеваний обмена веществ у новорожденных методом ВЭЖХ-МС/МС предназначены для экстракции целевых аналитов из образцов периферической крови младенцев на стандартных бумажных тест-бланках и переноса их в систему тандемной масс-спектрометрии. Аналитические растворы «АЛМАСС Нео» применяются совместно с набором реагентов «АЛМАСС Нео» для определения врожденных заболеваний обмена веществ у новорожденных методом ВЭЖХ-МС/МС.

Липофильные карбоцианиновые трейсеры представляют собой цианиновые флуоресцентные красители, несущие длинные гидрофобные углеводородные хвосты. Данные красители обладают низкой флуоресценцией в водной среде, но демонстрируют ее значительное увеличение при включении в липидные бислои. Они эффективно и прочно маркируют цитоплазматические мембраны и внутриклеточные мембранные структуры различных типов клеток [1]. Карбоцианиновые красители используются в исследованиях, изучающих слияние клеток [2], клеточную адгезию [3] и миграцию [4], из-за их минимальной токсичности и отсутствию переносу красителя между клетками. Многоцветное окрашивание разных популяций клеток используют для последующей их идентификации после смешивания клеточных культур. Двойное мечение позволяет точно определить клетки, которые слились друг с другом, либо сформировали кластеры [5]. Кроме того, эти красители широко используются в качестве антероградных и ретроградных аксональных трейсеров в живых [1,6] и фиксированных [7,8] нервных тканях и клетках. Данный набор содержит образцы восьми карбоцианиновых красителей, обладающих различной скоростью мембранной диффузии, растворимостью и флуоресцентными свойствами: DiI (DiIC18(3); 1,1’-диоктадецил-3,3,3’,3’-тетраметилиндокарбоцианин) — яркий и фотостабильный оранжево-красный флуоресцентный липофильный краситель, широко используемый для мечения мембран, трассировки клеток и аксонов, а также для визуализации методом микроскопии сверхвысокого разрешения STORM [9]. DiO (DiOC18(3); 3,3’-диоктадецилоксакарбоцианин) — широко используемый зеленый флуоресцентный липофильный краситель с меньшей скоростью латеральной диффузии в мембранах, чем у DiI. DiO часто используется вместе с DiI для двухцветного мечения. DiA (4-Di-16-ASP; 4-(4-(дигексадециламино)стирил)-N-метилпиридиния йодид) — желто-зеленый флуоресцентный липофильный краситель, который диффундирует гораздо быстрее, чем DiO, в клеточных мембранах. Он часто используется вместе с DiI для двухцветного мечения. DiD (DiIC18(5); 1,1’-диоктадецил-3,3,3’,3’-тетраметилиндодикарбоцианин) — аналог DiI со смещенными в красную область спектрами возбуждения и испускания флуоресценции, что позволяет избегать автофлуоресценции и фототоксических эффектов при визуализации. Краситель широко используется для многоцветного мечения и визуализации методом микроскопии сверхвысокого разрешения STORM [9]. DiR (DiIC18(7); 1,1’-диоктадецил-3,3,3’,3’-тетраметилиндотрикарбоцианин) — флуоресцентный липофильный краситель ближнего инфракрасного диапазона (NIR). Инфракрасная область спектра оптически прозрачна для многих тканей, поэтому DiR можно использовать для визуализации мелких животных in vivo [10] и микроскопии сверхвысокого разрешения STORM [9]. Neuro-DiO — зеленый флуоресцентный липофильный карбоцианиновый краситель. В отличие от DiO, Neuro-DiO обладает лучшей растворимостью в мембранах и менее склонен к образованию нефлуоресцентных агрегатов, снижающих скорость диффузии красителя. RAPID DiI (дилинолеил DiI; FAST DiI™; 1,1’-дилинолеил-3,3,3’,3’-тетраметилиндокарбоцинанин) — ненасыщенный аналог DiI с более высокой скоростью латеральной диффузии в клеточных мембранах, чем у исходного DiI. Данное свойство делает краситель особенно полезным для маркирования нейронов как в живых, так и в фиксированных тканях. RAPID DiO (дилинолеил DiO; FAST DiO™; 1,1’-дилинолеил-3,3’-оксакарбоцинанин) представляет собой ненасыщенный аналог DiO с более высокой скоростью латеральной диффузии в клеточных мембранах, чем у исходного DiO. Данное свойство делает краситель особенно полезным для маркирования нейронов как в живых, так и в фиксированных тканях.