Каталог
Вернуться к результатам поиска
X-Gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид)
Вернуться к результатам поиска
X-Gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид)
от
2 300 ₽
Компания:
SibEnzyme
Особенности:
от
2 300 ₽
Описание: X-Gal используется совместно с IPTG для определения lac-фенотипа при отборе белых/синих колоний E.coli. X-Gal представляет собой инертный хромогенный субстрат для β-галактозидазы – фермента, расщепляющего лактозу. β-галактозидаза гидролизует X-Gal с образованием бесцветной галактозы и 4-хлор-3-бром-индиго, который имеет синюю окраску. Индукция гена lacZ путем добавления IPTG приводит к расщеплению X-Gal и появлению синих колоний E.coli. В случае нарушения структуры гена lacZ за счет встройки генетического материала (или делеции) цвет колоний будет белым.
Стоковый раствор X-Gal следует готовить в необходимом количестве непосредственно перед его добавлением в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C. В качестве растворителя для X-Gal используется
диметилсульфоксид (DMSO). Рекомендуется приготовить стоковый раствор X-Gal в DMSO с концентрацией 40-100 мг/мл. Конечная концентрация X-Gal в среде LB может быть 40-100 мкг/мл (для получения белых/синих колоний E.coli).
Вариант применения:
На 100 мл расплавленного LB-агара (50-55 o C) взять:
100 мкл стокового раствора X-Gal (10 мг сухого X-Gal растворить в 100 мкл DMSO в отдельной стерильной микропробирке);
40 мкл 0,5 М водного раствора IPTG;
необходимое количество антибиотика (например, ампициллина до 50 мкг/мл).
Все тщательно перемешать, разлить по чашкам Петри. Подсушить в стерильном боксе под УФ в течение 20-30 мин.
Стоковый раствор X-Gal следует готовить в необходимом количестве непосредственно перед его добавлением в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C. В качестве растворителя для X-Gal используется
диметилсульфоксид (DMSO). Рекомендуется приготовить стоковый раствор X-Gal в DMSO с концентрацией 40-100 мг/мл. Конечная концентрация X-Gal в среде LB может быть 40-100 мкг/мл (для получения белых/синих колоний E.coli).
Вариант применения:
На 100 мл расплавленного LB-агара (50-55 o C) взять:
100 мкл стокового раствора X-Gal (10 мг сухого X-Gal растворить в 100 мкл DMSO в отдельной стерильной микропробирке);
40 мкл 0,5 М водного раствора IPTG;
необходимое количество антибиотика (например, ампициллина до 50 мкг/мл).
Все тщательно перемешать, разлить по чашкам Петри. Подсушить в стерильном боксе под УФ в течение 20-30 мин.
IPTG (изопропил-бета-D-тиогалактопиранозид)
от
550 ₽
Описание: IPTG является высоко стабильным синтетическим аналогом лактозы. Он инактивирует lac-репрессор и запускает синтез β-галактозидазы – фермента, расщепляющего лактозу. IPTG используется для индукции экспрессии клонированных генов, находящихся под контролем lac-промотора. Он так же применяется совместно с X-Gal для определения lac-фенотипа при отборе белых/синих колоний E.coli.
При использовании рекомендуется приготовить стоковый раствор IPTG в воде (0,5 М или 1 М). Конечная концентрация IPTG в среде LB может быть 0,1-0,2 мМ (для получения белых/синих колоний E.coli) или 0,3-1 мМ при индукции экспрессии клонированных генов (время индукции, как правило, 2-5 часов, иногда до 16 часов). Стоковый раствор можно хранить при +4-8 o C в течение 1 месяца или при -20 o C в течение 1 года (при размораживании раствор встряхнуть для перемешивания). Стоковый раствор IPTG добавлять в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C.
Формула: C9H18O5S
Молекулярный вес: 238,31
Температура плавления: 121-124°С
Внешний вид: белый или слегка желтоватый порошок.
Хроматографическая однородность: наличие одного пятна C RF =0.66-0.76.
Чистота: 99.5%, для биохимии.
ТСХ на силикагеле DC-ALUFOLIEN KIESELGEL 60Fв системе: н-бутанол/уксусная кислота/вода – 5/2/3.
Условия хранения: при -20°С, в сухом темном месте.
Перед вскрытием фасовку нагреть при комнатной температуре.
SibEnzyme
Новосибирск