Реакционная смесь ProbeMaster® ROX, 5×

Genta бензонуклеаза представляет собой нуклеазу, которая расщепляет все виды как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые) с образованием олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований. Эффективна в широком диапазоне рабочих условий. Не имеет протеолитической активности. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген нуклеазы из микроорганизма Serratia marcescens. Условия проведения реакции: 20 - 37°С, оптимальный буфер: 50 мM Трис-HCl (рН 8,0 при 25°С); 100 -150 мM NaCl; 1 мМ MgCl2.

Референсный краситель для ПЦР реального времени (реалтайм-ПЦР). Рекомендуется использовать этот реагент для нормализации интенсивности флуоресценции зондов и интеркалирующих красителей типа dsGreen. Реагент содержит 25 μM родамина 101 в 10 мМ Tris-HCl (pH 8.6), 0.1 мМ EDTA и 0.01% Tween®-20. Референсный краситель ROX совместим со всеми амплификаторами, имеющими канал ROX. Большинство приборов рассчитаны на конечную концентрацию ROX от 50 до 500 нМ.

Набор для тестирования наличия ДНКаз Genta DNAseAlarm содержит оптимизированные реагенты для быстрого и высокочувствительного анализа присутствия ДНКаз в растворе или смывах с поверхностей. Набор позволяет обнаруживать до 0.001 U ДНКазы I. Набор основан на флуоресцентном зонде с FAM, обладающим минимальной фоновой флуоресценцией, но демонстрирующем сильное увеличение флуоресценции в присутствии ДНКаз, детектируемое как на флуориметре, так и в ПЦР-амплификаторе.

5х Genta ТЕ-буфер для разведения нуклеиновых кислот. Состав: 10 мМ Трис*НCl, 1 мМ ЭДТА, pH 8,0. Приготовлен на сверхчистой воде.

Genta-RT kit представляет собой набор реагентов для проведения синтеза первой цепи кДНК на матрице РНК. Набор включает в себя: in silico модифицированный гомолог обратной транскриптазы вируса лейкемии мышей Молони (MMLV) – Genta REV M ревертазу; Олиго(dT)18 праймер; воду для ПЦР и 2 вида 5-кратного реакционного буфера (включающего в себя дНТФ и ДТТ): 5х ОТ-буфер R – наличие Random-праймеров в реакционном буфере позволяет проводить синтез тотальной кДНК. 5х ОТ-буфер – требуется добавление специфических праймеров для синтеза целевого фрагмента кДНК; или добавление Олиго(dT)18 праймера для полиаденилированной РНК.

 Преимущества набора: • ДНК из любых реакционных смесей, фрагменты длины от 70 до 20000 п. о. • Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,0 • Выделенный ПЦР-продукт пригоден для проведения лигирования, рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР.

Олигонуклеотид с 6 полностью вырожденными нуклеотидами, может быть использован как универсальный праймер для синтеза кДНК методом обратной транскрипции и ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Один из самых популярных стоковых олигонуклеотидов.

Референсный краситель ROX предназначен для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Референсный краситель ROX: – используется для нормирования интенсивности флуоресцентного сигнала при проведении количественной ПЦР-РВ. – позволяет скорректировать погрешности, связанные с ошибкой автоматического дозатора и флуктуацией флуоресценции.

Азидопроизводное красителя TR (Техасский Красный, или сульфородамин 101 хлорангидрид) для конъюгации с терминальными алкинами посредством медь-катализируемой клик-реакции или с напряженными алкинами посредством безмедной клик-реакции. TR — красный флуоресцентный краситель, используемый для окрашивания клеток, их сортировки с помощью флуоресцентно-активируемых сортировочных машин, флуоресцентной микроскопии. Техасский Красный также широко используется в молекулярной биологии, в основном для количественной ОТ-ПЦР и других методов клеточного анализа.

Eva488 - краситель для ПЦР реального времени, не ингибирующий реакцию и характеризующийся ярким разгоранием. Это аналог Eva Green, димерный акридин, флуоресцирующий при связывании с двухцепочечной ДНК. Флуоресценция красителя Eva488 попадает в канал флуоресцеина. Краситель поставляется в виде раствора в воде концентрации 20×.

Родамин 6G (R6G) - ксантеновый краситель родаминового ряда, в течение длительного времени использующийся для мечения олигонуклеотидов. Как и другие ксантеновые красители, R6G доступен в виде двух изомеров, 5- и 6-. Несмотря на то, что их спектры поглощения и эмиссии практически неразличимы, изомеры все же следует разделять для того, чтобы меченые молекулы не разделялись при очистке методами хроматографии и электрофореза. Активированный эфир 5-R6G - производное для мечения аминогрупп биомолекул, полученное из чистого 5-изомера карбокси-R6G. Родамин 6G - очень яркий краситель. Его используют в качестве стандарта квантового выхода (0.95 в этаноле). Этот флуорофор растворим в органических растворителях, таких как ДМФА и ДМСО. Их следует спользовать в качестве сорастворителей в реакциях мечения.

ROX (родамин X или R101) - родаминовый краситель, обладающий высоким квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью, пригодный для различных применений. Олигонуклеотиды, меченые красителем ROX, часто используются в ПЦР режима реального времени, и многие приборы для реалтайм-ПЦР имеют канал ROX. Этот продукт - реакционноспособный краситель для мечения аминогрупп в белках, пептидах, и амино-олигонуклеотидах. Чистый изомер.

SYBR Green I – интеркалирующий краситель, специфичный к двухцепочечной ДНК. Раствор SYBR Green I оптимизирован для применения в ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Рекомендуется использовать как 50X раствор, при оптимизации условий ПЦР допускается двухкратное увеличение или двухкратное уменьшение (25Х – 100Х) концентрации красителя в реакционной смеси.

SYBR Green I – интеркалирующий краситель, специфичный к двухцепочечной ДНК. Раствор SYBR Green I оптимизирован для применения в ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Рекомендуется использовать как 50X раствор, при оптимизации условий ПЦР допускается двухкратное увеличение или двухкратное уменьшение (25Х – 100Х) концентрации красителя в реакционной смеси.

Референсный краситель ROX предназначен для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Референсный краситель ROX: – используется для нормирования интенсивности флуоресцентного сигнала при проведении количественной ПЦР-РВ. – позволяет скорректировать погрешности, связанные с ошибкой автоматического дозатора и флуктуацией флуоресценции.

В основе протокола лежит модифицированный метод щелочного лизиса бактериальной культуры без предварительного осаждения бактерий с последующим селективным связыванием ДНК из осветленного лизата на силиконизированной мембране колонки. Технология позволяет ускорить процесс выделения за счет быстрого лизиса напрямую из биомассы с обработкой РНКазой А лизата и дальнейшего центрифугирования. Преимущества набора: Выход до 10 мкг из 0,6 мл бактериальной культуры Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,1 Проверено, что плазмидная ДНК пригодна для реакции рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР