Буфер для синтеза первой цепи кДНК

ТРИС-гидрохлорид трис(гидроксиметил)аминометана гидрохлорид Для молекулярной биологии в качестве буферного раствора. Данный продукт предназначен для исследовательских целей. Хранить при комнатной температуре. Фасовка: 5 кг

Набор содержит концентрированный раствор флуоресцентного красителя QuDye HS reagent, буфер для разведения и стандарты концентрации ДНК (0 и 10 нг/мкл). При смешивании с образцом, краситель селективно связывается с двухцепочечной ДНК, но не с РНК, обеспечивая точное измерение концентрации от 10 пг/мкл до 100 нг/мкл (начальная концентрация образца). Анализ выполняется при комнатной температуре, уровень флуоресценции остается стабильным в течение 3 часов. На измерение концентрации не оказывают влияния примеси (белки, отдельные нуклеотиды, соли, детергенты и др.) Флуориметр позволяет проводить измерения в 200 мкл (при объеме исходного образца 1-20 мкл). Кроме того, краситель QuDye HS reagent обладает очень широким линейным диапазоном зависимости уровня сигнала от концентрации dsDNA. Эти два фактора делают данный набор быстрым и удобным средством количественного определения двухцепочечной ДНК.

50Х TAE электродный буфер предназначен для приготовления агарозных и полиакриламидных гелей. Использование 50Х TAE рекомендовано для: – разделения длинных фрагментов нуклеиновых кислот (более 2 000 п.о.), – электрофореза с последующим выделением ДНК из геля. В состав буфера входит: 2М Трис-(гидроксиметил) аминометан, 50мМ ЭДТА, 1М уксусная кислота, вода высокой степени очистки, pH 8.3. Буфер профильтрован через мембрану с размером пор 0.45 мкм.

Окрашенный 5X Taq Red буфер для Taq и HS Taq ДНК полимераз (кат. ## PK113S/L/H, PK114, PK017S/L/H, PK018) является модификацией ПЦР буфера 10X Taq Turbo (кат. # PB001, Евроген). Помимо стандартных компонентов буфера для ПЦР 5X Taq Red буфер содержит красный и желтый красители и вещества, повышающие плотность образца. Продукты ПЦР, полученные с использованием 5X Taq Red буфера, можно наносить на гель без добавления отдельного буфера для нанесения проб. В 1% агарозном геле с 1X ТАЕ буфером электрофоретическая подвижность красного красителя соответствует фрагменту ДНК размером 1000 п.о., желтый краситель мигрирует с фронтом на уровне фрагментов 20–30 п.о. 5X Taq Red буфер может использоваться для любых приложений ПЦР, не требующих измерения абсорбции или флуоресценции. Буфер без магния предназначен для постановки реакций, требующих индивидуального подбора концентрации Mg2+. При 25 °C буфер имеет pH=8.6

 Преимущества набора: • ДНК из любых реакционных смесей, фрагменты длины от 70 до 20000 п. о. • Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,0 • Выделенный ПЦР-продукт пригоден для проведения лигирования, рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР.

10X SNPdetect буфер не содержит ионы магния. Для оптимизации концентрации ионов магния в реакционной смеси используйте 50 мМ раствор MgCl2. При концентрации 2.5 мМ, как правило, достигается наиболее эффективная дискриминация аллелей. Поскольку магний является кофактором полимеразы, увеличение концентрации ионов Mg2+ увеличивает выход реакции. Однако, одновременно снижается её специфичность и растет неспецифическая (фоновая) амплификация. В связи с тем, что ионы магния являются кофактором полимеразы, увеличение концентрации ионов Mg2+ увеличивает выход реакции, одновременно понижая ее специфичность и повышая фоновую амплификацию.

10 мМ Трис-НCl, 1 мМ EDTA (pH 8.0). Для приготовления используется сверхчистая деионизованная вода. Не содержит нуклеаз и примесей нуклеиновых кислот. Применение: Буфер TE готов к использованию. Применяется в молекулярной биологии: • для элюции с колонок и магнитных частиц, приготовления препаратов нуклеиновых кислот (ДНК, РНК, кДНК); • для приготовления растворов. Буфер ТЕ способствует длительному хранению нуклеиновых кислот в замороженном виде.

10X Overnight ligation buffer применяется для стандартного лигирования (14–16 часов при 14 °C). Буферы оптимизированы для использования с Quick-TA и T4 ДНК лигазами. В состав обоих буферов входят АТФ и ДТТ, которые плохо сохраняются в водных растворах, поэтому буфер не следует оставлять при комнатной температуре после окончания работы.

10 мМ Трис-НCl, 1 мМ EDTA (pH 8.0). Для приготовления используется сверхчистая деионизованная вода. Не содержит нуклеаз и примесей нуклеиновых кислот. Применение: Буфер TE готов к использованию. Применяется в молекулярной биологии: • для элюции с колонок и магнитных частиц, приготовления препаратов нуклеиновых кислот (ДНК, РНК, кДНК); • для приготовления растворов. Буфер ТЕ способствует длительному хранению нуклеиновых кислот в замороженном виде.

Краситель QuDye dsDNA BR высокоселективен в отношении двухцепочечной ДНК (дцДНК), что позволяет определять количественно двухцепочечную ДНК в широком диапазоне концентраций, и присутствие одноцепочечной ДНК, РНК, белков или свободных нуклеотидов не оказывает влияния на результаты измерений. Концентрированный раствор 200× также является компонентом набора QuDye dsDNA BR для измерения количества двухцепочечной ДНК, который может использоваться с самыми распространенными моделями ридеров.

50Х TAE электродный буфер предназначен для приготовления агарозных и полиакриламидных гелей. Использование 50Х TAE рекомендовано для: – разделения длинных фрагментов нуклеиновых кислот (более 2 000 п.о.), – электрофореза с последующим выделением ДНК из геля. В состав буфера входит: 2М Трис-(гидроксиметил) аминометан, 50мМ ЭДТА, 1М уксусная кислота, вода высокой степени очистки, pH 8.3. Буфер профильтрован через мембрану с размером пор 0.45 мкм.

Буферы 5X Encyclo Red предназначен для работы со смесью полимераз Encyclo. Концентрация ионов магния в 5X Encyclo Red буфере составляет 17,5 мM. При использовании в рекомендованных разведениях каждый буфер обеспечивает 3,5 мM концентрацию ионов магния в ПЦР реакции. 5Х Encyclo Red буфер содержит красный и желтый красители, не влияющие на работу полимеразы, и компоненты, увеличивающие плотность пробы для удобства нанесения на гель. Буфер удобно использовать для постановки реакций, продукты которых впоследствии анализируются с помощью гель-электрофореза. Продукт ПЦР сразу наносится в гель без добавления буфера для нанесения проб. В 1% агарозном геле с 1X ТАЕ буфером электрофоретическая подвижность красного красителя соответствует фрагменту ДНК размером 1000 п.о., желтый краситель мигрирует с фронтом на уровне фрагментов 20-30 п.о.

Буферы 10X Tersus Plus без Mg2+ предназначен для работы со смесью полимераз Tersus. Концентрация ионов магния в 10X Tersus Plus буфере составляет 25 мM. При использовании в рекомендованных разведениях каждый буфер обеспечивает 2,5 мM концентрацию ионов магния в ПЦР реакции. 10X Tersus Plus буфер (без Mg) предназначен для постановки реакций, требующих индивидуального подбора концентрации Mg;

5X Quick ligation buffer предназначен для быстрого лигирования (5–15 минут при комнатной температуре). Буферы оптимизированы для использования с Quick-TA и T4 ДНК лигазами. В состав обоих буферов входят АТФ и ДТТ, которые плохо сохраняются в водных растворах, поэтому буфер не следует оставлять при комнатной температуре после окончания работы.

10 мМ Трис-HCl, 0.1 мМ ЭДТА, pH 8.0. Для приготовления использована деионизованная вода для ПЦР. Применение: Буфер используется для разведения ДНК перед постановкой ПЦР (или иных ферментативных реакций). Может использоваться для элюции ДНК с колонок и магнитных частиц. Растворенная в буфере ДНК может длительно храниться в замороженном виде. При добавлении буфера в реакционную смесь при постановке ПЦР практически не изменяется рН раствора и концентрация ионов магния, поэтому эффективность амплификации не снижается. При использовании для разведения ДНК стандартного ТЕ-буфера относительно высокая концентрация ЭДТА в растворе ДНК (1 мМ ЭДТА) может быть причиной снижения эффективности ПЦР вследствие хелатирования ионов магния. Не содержит нуклеаз.

10Х TBE электродный буфер предназначен для приготовления агарозных и полиакриламидных гелей. Использование 10Х TBE рекомендовано для: – разделения коротких фрагментов нуклеиновых кислот (менее 1500 п.о.), – продолжительных электрофорезов. В состав буфера входит: 890 мМ Трис-(гидроксиметил) аминометан, 890 мМ борная кислота, 20мМ ЭДТА, вода высокой степени очистки, pH 8.3. Буфер профильтрован через мембрану с размером пор 0.45 мкм.