Abs I
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCTCGAGG CC↑TCGAGG
GGAGCTCC GGAGCT↓CC
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Abs Iиз Arthrobacter species 7М06.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг ДНК pUC19SE/DriI в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере AbsI при 37°С за 1 час
Субстрат для определения активности:
pUC19SE/DriI
Оптимальный буфер: SE-буфер AbsI
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10-25 10-25 0-10 25-50 10-25 25
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 0.05% Triton X-100, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер AbsI
Примечание: Длительная инкубация может привести к появлению звездчатой активности.