5X Genta Single-Tube RT-PCR ماستر ميكس ، 250 ردود الفعل

Genta-RT kit представляет собой набор реагентов для проведения синтеза первой цепи кДНК на матрице РНК. Набор включает в себя: in silico модифицированный гомолог обратной транскриптазы вируса лейкемии мышей Молони (MMLV) – Genta REV M ревертазу; Олиго(dT)18 праймер; воду для ПЦР и 2 вида 5-кратного реакционного буфера (включающего в себя дНТФ и ДТТ): 5х ОТ-буфер R – наличие Random-праймеров в реакционном буфере позволяет проводить синтез тотальной кДНК. 5х ОТ-буфер – требуется добавление специфических праймеров для синтеза целевого фрагмента кДНК; или добавление Олиго(dT)18 праймера для полиаденилированной РНК.

5Х Genta Single-tube RT-qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения реакции синтеза кДНК с последующей количественной и/или качественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). 5Х Genta Single-tube RT-qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ОТ-ПЦР компоненты, включая обратную транскриптазу Genta REV М, ДНК-полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ОТ-ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Genta-T4 ДНК-лигаза представляет собой рекомбинантный фермент, который катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5`-фосфатной и 3`-гидроксильными концевыми группами двухцепочечной ДНК. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген ДНК-лигазы бактериофага Т4. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, может восстанавливать однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК.

Genta TaqF ДНК-полимераза — химически модифицированный рекомбинантный аналог ДНК-полимеразы из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Фермент обладает 5’-3’ полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью, но не имеет 3’-5’ корректирующую экзонуклеазную активность. Рекомбинантный фермент Genta TaqF ДНК-полимераза подходит для использования в рутинных ПЦР, включая ПЦР в режиме реального времени. Genta TaqF ДНК-полимераза инактивирована с помощью химической модификации, что позволяет проводить приготовление реакционной смеси при комнатной температуре. Наличие «горячего старта» повышает специфичность и чувствительность амплификации. Активация полимеразы происходит при её прогревании до 95°C в течение 15 минут.

5-кратный реакционный буфер, не содержащий сульфат магния.

Смесь дНТФ представляет собой водный раствор четырех высокоочищенных ,2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфатов (дАТФ, дТТФ, дГТФ, дЦТФ) в эквимолярной концентрации.

5X Genta qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени. Мастер-микс обеспечивает надежную работу ПЦР в широком спектре приложений. Мастер-микс позволяет проводить ПЦР-РВ в мультиплексном формате. 5X Genta qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Genta Taq-AB ДНК-полимераза — инактивированный специфическими моноклональными антителами рекомбинантный аналог ДНК-полимеразы из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Фермент обладает 5’-3’ полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью, но не имеет 3’-5’ корректирующую экзонуклеазную активность. Рекомбинантный фермент Genta Taq-AB ДНК-полимераза подходит для использования в рутинных ПЦР, включая ПЦР в режиме реального времени. Инактивация моноклональными антителами позволяет проводить приготовление реакционной смеси при комнатной температуре. Наличие «горячего старта» повышает специфичность и чувствительность амплификации. Диссоциация комплекса с антителами и активация Genta Taq-AB ДНК-полимеразы происходит при её нагревании выше 70°C.

Магнитный сорбент ExtraGen® представляет собой водную суспензию твердофазных магнитных частиц на основе оксида железа и оксида кремния. Он предназначен для выделения нуклеиновых кислот из клинических и биологических образцов. Суспензия магнитного сорбента обладает «промежуточной» седиментационной устойчивостью, что особенно важно при использовании материала в автоматических системах выделения ДНК. Частицы ExtraGen® устойчивы к нагреву, сильным окислителям и интенсивным механическим воздей­ствиям (центрифугирование, дисперги­рование и т.п.). Использование фирменного буферного раствора позволяет хранить частицы при комнатной температуре в течение года без ухудшения их сорбционных свойств. Как показали испытания, сорбент ExtraGen® проявляет высокую эффективность при выделении нуклеиновых кислот как в ручном режиме, так и с использованием автоматических станций.

 Преимущества набора: • ДНК из любых реакционных смесей, фрагменты длины от 70 до 20000 п. о. • Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,0 • Выделенный ПЦР-продукт пригоден для проведения лигирования, рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР.

Олигонуклеотиды – короткие фрагменты нуклеиновых кислот, которые широко используются в различных областях ДНК-диагностики (медицинская диагностика, криминалистический анализ, ветеринария, контроль качества продуктов питания и др.). В последнее время широкое распространение олигонуклеотиды получили в качестве лекарственных средств против различных генетических и других заболеваний. Компания ГенТерра производит ДНК- и РНК-олигонуклеотидов в масштабах от нескольких миллиграмм до граммовых количеств, в том числе и модифицированные олигонулеоитды, флуоресцентно-меченые олигонуклеотиды и зонды для ПЦР в реальном времени.

5-кратный реакционный буфер, подходящий для использования в реакции изотермической амплификации нуклеиновых кислот в форматах LAMP и ОТ-LAMP. Стандартный 5х Genta LAMP-буфер содержит 25 мМ MgSO4, что соответствует 5 мМ MgSO4 в реакционной смеси.

Genta Bst ДНК-полимераза — большой фрагмент ДНК-полимеразы Bacillus stearothermophilus (полипептид размером 67 кДа). Фермент обладает 5’-3’ полимеразной активностью, но не имеет 5’-3’ и 3’-5’ экзонуклеазную активность. Genta Bst ДНК-полимераза обладает вытесняющей активностью и может использоваться для изотермической амплификации ДНК в формате LAMP/RT-LAMP. Оптимальная температура активности фермента — 60-65°C.

Набор для тестирования наличия ДНКаз Genta DNAseAlarm содержит оптимизированные реагенты для быстрого и высокочувствительного анализа присутствия ДНКаз в растворе или смывах с поверхностей. Набор позволяет обнаруживать до 0.001 U ДНКазы I. Набор основан на флуоресцентном зонде с FAM, обладающим минимальной фоновой флуоресценцией, но демонстрирующем сильное увеличение флуоресценции в присутствии ДНКаз, детектируемое как на флуориметре, так и в ПЦР-амплификаторе.

ExoGen представляет собой готовую для использования смесь ферментов Genta-ExoI экзонуклеазы I и термолабильной щелочной фосфатазы Genta-ALP в реакционном буфере. Смесь ExoGen применяется для ферментативного гидролиза избыточного количества праймеров и нуклеотидов в продуктах ПЦР (ампликонах). Очищенные таким образом ПЦР-продукты пригодны для дальнейшего использования в различных биологических приложениях, таких как клонирование и ДНК-секвенирование.

Genta RevM ревертаза (обратная транскриптаза) — генетически модифицированная обратная транскриптаза вируса мышиной лейкемии Молони (MMLV), предназначенная для синтеза комплементарной цепи ДНК (кДНК) на матрице одноцепочечной РНК. Genta RevM выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего модифицированный ген обратной транскриптазы MMLV. По сравнению с обратной транскриптазой «дикого типа» Genta REV M ревертаза обладает повышенной термостабильностью: оптимальная температура для работы фермента — 50°С, фермент сохраняет активность при температуре до 65°С. Обратная транскриптаза Genta RevM ревертаза обеспечивает более высокий выход кДНК, позволяет синтезировать более длинные фрагменты, имеет улучшенную эффективность при использовании GC-богатых РНК-матриц, а также имеет более высокую продуктивность. Обратная транскриптаза Genta RevM ревертаза подходит для ОТ-ПЦР в формате «one-step».