بوليمر لتسلسل حمض ديكسيريبونوكليك «PDMA-6»

Genta-RT kit представляет собой набор реагентов для проведения синтеза первой цепи кДНК на матрице РНК. Набор включает в себя: in silico модифицированный гомолог обратной транскриптазы вируса лейкемии мышей Молони (MMLV) – Genta REV M ревертазу; Олиго(dT)18 праймер; воду для ПЦР и 2 вида 5-кратного реакционного буфера (включающего в себя дНТФ и ДТТ): 5х ОТ-буфер R – наличие Random-праймеров в реакционном буфере позволяет проводить синтез тотальной кДНК. 5х ОТ-буфер – требуется добавление специфических праймеров для синтеза целевого фрагмента кДНК; или добавление Олиго(dT)18 праймера для полиаденилированной РНК.

Genta-ALP щелочная фосфатаза термолабильная катализирует отщепление 5’- и 3’-фосфатных групп от ДНК, РНК, олигонуклеотидов, нуклеозидтрифосфатов, а также дефосфорилирование белков. Активна в ПЦР-буфере. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген щелочной фосфатазы из Gadus morua.

5Х Genta Single-tube RT-qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения реакции синтеза кДНК с последующей количественной и/или качественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). 5Х Genta Single-tube RT-qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ОТ-ПЦР компоненты, включая обратную транскриптазу Genta REV М, ДНК-полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ОТ-ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Genta-T4 ДНК-лигаза представляет собой рекомбинантный фермент, который катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5`-фосфатной и 3`-гидроксильными концевыми группами двухцепочечной ДНК. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген ДНК-лигазы бактериофага Т4. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, может восстанавливать однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК.

ExoGen представляет собой готовую для использования смесь ферментов Genta-ExoI экзонуклеазы I и термолабильной щелочной фосфатазы Genta-ALP в реакционном буфере. Смесь ExoGen применяется для ферментативного гидролиза избыточного количества праймеров и нуклеотидов в продуктах ПЦР (ампликонах). Очищенные таким образом ПЦР-продукты пригодны для дальнейшего использования в различных биологических приложениях, таких как клонирование и ДНК-секвенирование.

Genta бензонуклеаза представляет собой нуклеазу, которая расщепляет все виды как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые) с образованием олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований. Эффективна в широком диапазоне рабочих условий. Не имеет протеолитической активности. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген нуклеазы из микроорганизма Serratia marcescens. Условия проведения реакции: 20 - 37°С, оптимальный буфер: 50 мM Трис-HCl (рН 8,0 при 25°С); 100 -150 мM NaCl; 1 мМ MgCl2.

Genta RevM ревертаза (обратная транскриптаза) — генетически модифицированная обратная транскриптаза вируса мышиной лейкемии Молони (MMLV), предназначенная для синтеза комплементарной цепи ДНК (кДНК) на матрице одноцепочечной РНК. Genta RevM выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего модифицированный ген обратной транскриптазы MMLV. По сравнению с обратной транскриптазой «дикого типа» Genta REV M ревертаза обладает повышенной термостабильностью: оптимальная температура для работы фермента — 50°С, фермент сохраняет активность при температуре до 65°С. Обратная транскриптаза Genta RevM ревертаза обеспечивает более высокий выход кДНК, позволяет синтезировать более длинные фрагменты, имеет улучшенную эффективность при использовании GC-богатых РНК-матриц, а также имеет более высокую продуктивность. Обратная транскриптаза Genta RevM ревертаза подходит для ОТ-ПЦР в формате «one-step».

Genta TaqF ДНК-полимераза — химически модифицированный рекомбинантный аналог ДНК-полимеразы из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Фермент обладает 5’-3’ полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью, но не имеет 3’-5’ корректирующую экзонуклеазную активность. Рекомбинантный фермент Genta TaqF ДНК-полимераза подходит для использования в рутинных ПЦР, включая ПЦР в режиме реального времени. Genta TaqF ДНК-полимераза инактивирована с помощью химической модификации, что позволяет проводить приготовление реакционной смеси при комнатной температуре. Наличие «горячего старта» повышает специфичность и чувствительность амплификации. Активация полимеразы происходит при её прогревании до 95°C в течение 15 минут.

5-кратный реакционный буфер, не содержащий сульфат магния.

Смесь дНТФ представляет собой водный раствор четырех высокоочищенных ,2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфатов (дАТФ, дТТФ, дГТФ, дЦТФ) в эквимолярной концентрации.

Genta-ExoI экзонуклеаза I гидролизует одноцепочечную ДНК в 3 '→ 5' направлении, высвобождая дезоксирибонуклеозид 5'-монофосфат. Не расщепляет цепи ДНК, 3’-конец которых блокирован фосфорильной или ацетильной группой. Активна в ПЦР-буфере. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген экзонуклеазы I E.coli.

5х Genta ТЕ-буфер для разведения нуклеиновых кислот. Состав: 10 мМ Трис*НCl, 1 мМ ЭДТА, pH 8,0. Приготовлен на сверхчистой воде.

Флуоресцентные зонды представляет собой олигонуклеотид с флуоресцентной меткой и гасителем, который может связываться с цепью ДНК во процессе амплификации. Когда зонд находится в свободном состоянии, оба красителя расположены близко друг к другу, поэтому происходит гашение флуоресценции. В ходе ПЦР на этапе удлинения цепи гибридизовавшийся зонд расщепляется полимеразой, которая обладает 5’-экзонуклеазной активностью, красители разъединяются, и наблюдается флуоресцентный сигнал, пропорциональный количеству амплифицированного продукта. Интенсивность флуоресценции увеличивается в каждом цикле пропорционально скорости расщепления зонда. Использование зондов в ПЦР позволяет повысить точность и селективность реакции. Широкий спектр флуоресцентных красителей: FAM, R6G, VIC, HEX, JOE, TAMRA, ROX, Cy 5 и Cy5.5 Возможность мультиплексного анализа нескольких ДНК-мишеней в одной пробирке. Высокая эффективность ПЦР-РВ. Контроль качества зондов: очистка ВЭЖХ и проверка масс-спектрометрией

5Х Genta Taq-AB qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени. 5Х Genta Taq-AB qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta Taq-AB, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Инактивация полимеразы Genta Taq-AB помощью антител позволяет проводить подготовку смесей при комнатной температуре. «Горячий» старт обеспечивает повышение специфичности амплификации. Диссоциация комплекса и высвобождение Genta Taq-AB ДНК-полимеразы обеспечивается прогреванием выше 70°C.

5Х Genta Single-tube RT-PCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения реакции синтеза кДНК с последующей количественной и/или качественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ). 5Х Genta Single-tube RT-PCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ОТ-ПЦР компоненты, включая обратную транскриптазу Genta REV М, ДНК-полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+ и реакционный буфер. Для постановки реакции ОТ-ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

5X Genta qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени. Мастер-микс обеспечивает надежную работу ПЦР в широком спектре приложений. Мастер-микс позволяет проводить ПЦР-РВ в мультиплексном формате. 5X Genta qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.