5x Genta PCR عازلة

Обратная транскриптаза (ревертаза) Mint предназначена для синтеза первой цепи комплементарной ДНК с одноцепочечной матрицы РНК. Обратная транскриптаза Mint — модифицированная ревертаза MMLV. Особенностью Mint является отсутствие активности РНКазы H и способность нематрично присоединять к 3’-концу первой цепи кДНК несколько дезоксинуклеотидов (преимущественно G или C) после завершения синтеза, что позволяет использовать первую цепь для синтеза полноразмерных кДНК библиотек и клонирования 5’-концов кДНК (5’-RACE). Область применения: • Синтез первой цепи кДНК для дальнейшего получения полноразмерных кДНК библиотек. • Синтез первой цепи кДНК с дальнейшей возможностью амплификации, клонирования и экспрессии. • Синтез первой цепи кДНК с последующим анализом с помощью ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ).

Набор дезоксинуклеотидов (dNTP) состоит из четырех высокоочищенных 2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфатов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Набор dNTP предназначен для использования с ДНК-полимеразами в различных приложениях, в т.ч. в ПЦР, обратной транскрипции и других реакциях синтеза ДНК.

ExoGen представляет собой готовую для использования смесь ферментов Genta-ExoI экзонуклеазы I и термолабильной щелочной фосфатазы Genta-ALP в реакционном буфере. Смесь ExoGen применяется для ферментативного гидролиза избыточного количества праймеров и нуклеотидов в продуктах ПЦР (ампликонах). Очищенные таким образом ПЦР-продукты пригодны для дальнейшего использования в различных биологических приложениях, таких как клонирование и ДНК-секвенирование.

5-кратный реакционный буфер, не содержащий сульфат магния.

5х Genta ТЕ-буфер для разведения нуклеиновых кислот. Состав: 10 мМ Трис*НCl, 1 мМ ЭДТА, pH 8,0. Приготовлен на сверхчистой воде.

Стандартный праймеркомплементарен к внутренним транскрибируемым спейсерным участкам рибосомальной ДНК. Нуклеотидные последовательности: ITS4: 5’-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3’

Обратная транскриптаза (ревертаза) MMLV предназначена для синтеза первой цепи комплементарной ДНК с одноцепочечной матрицы РНК. Ревертаза получена из штамма E. coli, экспрессирующего ген pol вируса лейкемии мышей MMLV. Особенностью транскриптазы MMLV является наличие слабой активности РНКазы H. Обратная транскриптаза MMLV поставляется с буфером для синтеза первой цепи кДНК и раствором DTT. Область применения: • Синтез первой цепи кДНК с дальнейшей возможностью амплификации, клонирования и экспрессии. • Синтез первой цепи кДНК с последующим анализом с помощью ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ).

Стандартный праймер комплементарен промотору цитомегаловируса человека (CMV). Нуклеотидная последовательность: CMV Forward: 5’-CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTG-3’

Стандартные праймеры для векторов pGEX. pGEX Reverse праймер комплементарен участку вектора за полилинкером и стоп-кодоном. Нуклеотидная последовательность: pGEX Reverse: 5’-CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG-3’

KeepRNA — нетоксичный водный раствор, быстро проникающий в клетки и ткани, и защищающий РНК от деградации. Раствор является полным аналогом RNAlater™. KeepRNA используется для быстрой стабилизации и хранения клеточной РНК в тканях и клеточных культурах. Раствор позволяет хранить и транспортировать образцы до 7 дней при комнатной температуре, или около 1 месяца при 4°C, не прибегая к трудоемким процедурам быстрого выделения РНК или предварительному замораживанию ткани. Клетки и ткани после хранения в KeepRNA можно использовать для дальнейшего выделения из них мРНК и тотальной РНК, а также для гистологических и иммунохимических методик. РНК, выделенная из фрагментов ткани после хранения в KeepRNA, сохраняет свой качественный и количественный состав и может быть использована в дальнейшем для любых молекулярно-биологических задач. При хранении реагента возможно образование осадка, в таком случае необходимо инкубировать его при 37°C, перемешивая до полного растворения осадка.

Данный набор предназначен для измерения концентрации двухцепочечной ДНК в широком диапазоне на флуориметре (подходит любая версия флуориметра). Набор включает в себя 200× концентрат флуоресцентного красителя QuDye dsDNA BR, буфер для приготовления рабочего раствора красителя и стандарты концентрации ДНК (0 и 100 нг/мкл). Краситель QuDye dsDNA BR обладает селективностью по отношению к двухцепочечной ДНК, поэтому на результаты измерения не влияют примеси РНК, нуклеотидов и белков. Другие примеси в незначительном количестве, такие как соли, детергенты и растворители, оказывают несущественное влияние на результаты измерений. Данный набор позволяет точно измерять концентрацию дцДНК в диапазоне от 100 пг/мкл до 1000 нг/мкл для исходного образца (диапазон количества ДНК для измерения на флуориметре: 2–1000 нг ДНК в 200 мкл образца для измерения). Основной компонент набора — флуоресцентный краситель QuDye dsDNA BR, селективно связывающий ДНК и проявляющий выраженную флуоресценцию в составе комплекса с молекулой ДНК. Использование данного набора является удобным способом квантификации дцДНК в широком диапазоне концентраций, он не требует большого объема исходного образца (1–20 мкл), все измерения проводятся при комнатной температуре и занимают, в среднем, 15-20 минут (в зависимости от количества образцов); флуоресценция образцов стабильна в течение 3 часов. Для проведения измерения необходимо приготовить рабочий раствор красителя, развести в нем в отдельных пробирках стандарты концентрации ДНК и экспериментальные образцы и провести измерения интенсивности флуоресценции на флуориметре. Для удобства мы предлагаем фасовки набора, включающие совместимые с флуориметром тонкостенные пробирки. Кроме этого, данный набор можно использовать в сочетании с набором QuDye Protein Quantification Kit для определения примеси белка в образце ДНК. Для количественного анализа образцов с меньшей концентрацией дцДНК воспользуйтесь набором QuDye dsDNA HS Assay Kit с диапазоном измеряемых концентраций 10 пг/мкл—100 нг/мкл для исходного образца.

Смесь дНТФ представляет собой водный раствор четырех высокоочищенных ,2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфатов (дАТФ, дТТФ, дГТФ, дЦТФ) в эквимолярной концентрации.

Магнитный сорбент ExtraGen® представляет собой водную суспензию твердофазных магнитных частиц на основе оксида железа и оксида кремния. Он предназначен для выделения нуклеиновых кислот из клинических и биологических образцов. Суспензия магнитного сорбента обладает «промежуточной» седиментационной устойчивостью, что особенно важно при использовании материала в автоматических системах выделения ДНК. Частицы ExtraGen® устойчивы к нагреву, сильным окислителям и интенсивным механическим воздей­ствиям (центрифугирование, дисперги­рование и т.п.). Использование фирменного буферного раствора позволяет хранить частицы при комнатной температуре в течение года без ухудшения их сорбционных свойств. Как показали испытания, сорбент ExtraGen® проявляет высокую эффективность при выделении нуклеиновых кислот как в ручном режиме, так и с использованием автоматических станций.

Ингибитор РНКаз RiboCare предназначен для защиты РНК от деградации РНКазами. Ингибитор РНКаз RiboCare формирует комплексы с РНКазами, тем самым эффективно предотвращая деградацию РНК. Ингибитор РНКаз RiboCare представляет собой рекомбинантный белок, выделенный из штамма-продуцента E.coli. Защита РНК от деградации РНКазами в реакциях: – синтез кДНК, – синтез кДНК и ПЦР в одной пробирке, – in vitro транскрипция, – при обработке РНК ДНКазами

Oligo(dT)15 предназначен для синтеза первой цепи тотальной кДНК на РНК-матрице при помощи MMLV ревертазы. Рекомендуемая концентрация праймеров в реакционной смеси: 1–3 мкМ. Oligo(dT)15 праймер используют только для полиаденилированной РНК. • Количественный анализ 3’-концевых фрагментов РНК методом ОТ-ПЦР. • Амплификация полноразмерных транскриптов или синтез второй цепи кДНК для приготовления кДНКбиблиотек, обогащенных полноразмерными последовательностями.

5Х Genta Taq-AB qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени. 5Х Genta Taq-AB qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta Taq-AB, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Инактивация полимеразы Genta Taq-AB помощью антител позволяет проводить подготовку смесей при комнатной температуре. «Горячий» старт обеспечивает повышение специфичности амплификации. Диссоциация комплекса и высвобождение Genta Taq-AB ДНК-полимеразы обеспечивается прогреванием выше 70°C.

Краситель QuDye dsDNA HS, 200× — реагент для количественного анализа, высокоселективен в отношении дцДНК по сравнению с оцДНК и РНК. Для приготовления рабочего раствора концентрированный реагент QuDye dsDNA HS необходимо развести в соотношении 1:200. Использование реагента QuDye dsDNA HS является более чувствительным методом по сравнению с другими традиционными методами количественного анализа ДНК и предназначен для использования со всеми моделями флуорометров. Концентрированный раствор 200× также является компонентом набора QuDye dsDNA HS для измерения количества двухцепочечной ДНК.