Поиск

Набор предназначен для проведения колориметрической обратной транскрипции (RT) и петлевой изотермической амплификации (LAMP) в одной пробирке. Набор БиоМастер RT-LAMP-Color (2×) содержит 2× буфер для RT-LAMP- Color; 25× БиоМастер RT-LAMP-микс, Воду и обработанную ДЭПК. В состав 2× буфер для RT-LAMP-Color входят все необходимые компоненты реакции (исключая ферменты, ДНК-матрицу и праймеры): буферный компонент с низкой емкостью; смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов; ионы Mg2+ (6 мМ), индикаторный краситель. В состав 25× БиоМастер RT-LAMP-микс входит ревертаза RNAscribe RT и LF Bst ДНК-полимераза в оптимальном соотношении для протекания обеих реакций. RNAscribe RT – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Фермент проявляет РНК- и ДНК- зависимую полимеразную активность и проявляет оптимальную активность при 55 °С (активна до 65 °С).

Диглицидиловый эфир этиленгликоля

В набор входят отдельные компоненты такие как ионы магния, смесь дезоксинуклеотидтрифосфатов (dNTP) и диметилсульфоксид, что позволяет оптимизировать условия амплификации под задачи экспериментатора.

Фьюжн ДНК-полимераза является рекомбинантным полипептидом, состоящим из слитых термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК- связывающего белка термофильных архей вида Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Белок Sso7d связывается с малой бороздкой двухцепочечной ДНК и дополнительно стабилизирует комплекс полимеразы с матрицей. Благодаря этому Фьюжн ДНК-полимераза, обладает повышенной процессивностью, точностью синтеза, скоростью амплификации фрагментов и повышенной устойчивостью к ингибиторам ПЦР по сравнению с нативной Pfu ДНК- полимеразой [1]. Фьюжн ДНК-полимераза обладает 5’→3’ полимеразной активностью, 3’→5’ экзонуклеазной активностью и синтезирует продукты с тупыми концами.

M-MuLV –RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от M-MuLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. M-MuLV –RH проявляет оптимальную активность при 42°С (активна до 50°С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 7 т.о. и включать модифицированные основания. В набор также входит 5 × ОТ-буфер-mix который содержит все необходимые компоненты для работы ревертазы, кроме праймеров и РНК-матрицы. Состав буфера оптимизирован для проведения эффективной реакции обратной транскрипции с широкого набора РНК-матриц.

Набор предназначен для выделения и очистки ДНК и РНК (от 50 до 10000 нт) из реакционных смесей. Возможна очистка, например, от dNTP, ферментов, не включившихся низкомолеклярных радиоактивных и флуоресцентных меток и др. Принцип действия набора основан на селективной сорбции нуклеиновых кислот из предварительно лизированного образца на кремниевой мембране, последующей промывке и элюции очищенного продукта. Возможна очистка до 10-20 мкг ДНК или РНК. Объём образца реакционной смеси на 1 выделение до 100 мкл Выделенные ДНК и РНК могут быть использованы для ПЦР, транскрипции, ник- трансляции, секвенирования и других генно-инженерных приложениях. Набор не содержит фенола и хаотропных солей, таких как гуанидин тиоцианат и др.

Раствор бромистого этидия (3,8-диамино-5-этил-6-фенилфенантридиум бромид) для визуализации нуклеиновых кислот после проведения агарозного гель-электрофореза. Раствор приготовлен с использованием воды тип I и профильтрован через мембрану с размером пор 0.22 мкм.

Набор предназначен для выделения и очистки плазмидной ДНК из культур бактериальных клеток E. coli. Для выделения ДНК возможно использовать до 5 мл суспензии клеток (в зависимости от копийности и длины плазмиды). Протокол состоит из двух основных этапов: щелочной лизис бактериальных клеток и последующая сорбция плазмидной ДНК на центрифужной колонке, промывка и элюция очищенного продукта. Ёмкость колонки до 30 мкг. Буфер для лизиса содержит pH-индикатор синего цвета, для лучшего контроля на этапе нейтрализации. После этапа нейтрализации цвет смеси становится прозрачным. Выделенная ДНК может быть использована для ПЦР, рестрикции, секвенирования, трансформации, трансфекции и других приложений.

Якорный олиго d(T)18 – синтетический 20-мерный одноцепочечный ДНК олигонуклеотид, последовательность которого представляет собой 18 dT нуклеотидов за которыми следуют два дополнительных – VN, где V представляет собой dA, dC или dG, а N представляет собой dA, dC, dG или dT. Из-за вариабельной концевой последовательности праймер прикрепляется к 5’- концу поли(А)-хвоста мРНК и предотвращает связывание внутри поли(А)-хвоста, обеспечивая более эффективный синтез кДНК для мечения, синтеза первой цепи и применения ОТ-ПЦР.

Набор предназначен для выделения и очистки РНК из следующих образцов: 1. Культуры эукариотических клеток; 2. Культуры клеток грамотрицательных и грамположительных бактерий; 3. Мазки или соскобы эпителиальных клеток; 4. Вирусы. Принцип действия набора основан на селективной сорбции нуклеиновых кислот из предварительно лизированного образца на кремниевой мембране, последующей промывке и элюции очищенного продукта. В процессе выделения целостность РНК сохраняется. Возможно выделение до 50 мкг РНК.