Поиск

Описание фермента. InnovaHeliх использует энергию гидролиза нуклеотидтрифосфатов (АТФ, ГТФ) для движения вдоль сахарофосфатного остова нуклеиновых кислот (ДНК, РНК, гибридов ДНК/РНК) и разрыва внутри- или межмолекулярных водородных связей между основаниями, обладает способностью расплетать двухцепочечные ДНК-субстраты. Подходит для использования в составе смесей для LAMP (петлевая изотермическая амплификация) и ОТ-LAMP (петлевая изотермическая амплификация с обратной транскрипцией) в качестве дополнительного фермента, повышает специфичность изотермической реакции. Применение: полимеразная цепная реакция; полимеразная цепная реакция с этапом обратной транскрипции; петлевая изотермическая амплификация; одношаговая петлевая изотермическая амплификация с этапом обратной транскрипции (OT-LAMP); секвенирование. Происхождение фермента. Фермент получен из рекомбинантного штамма Еscherichia coli. Особенности фермента: термостабильность до 65 °С. Условия реакции: в 1-кратном реакционном буфере для изотермической амплификации, обогащенном АТФ и ГТФ. Инкубирование при температуре плюс 60-65 °C. Инактивация проходит при температуре плюс 85 °С в течение 5 мин. Буфер для хранения: 10 мМ Трис рН 7,5, 0,1 М KCl, 0,001 ДТТ, 0,1 мМ ЭДТА. Условия хранения: 1 год при температуре минус 20 °С. Цена указана за 1 мкг фермента при концентрации 20 мкг/мл.

Применение: петлевая изотермическая амплификация (LAMP); петлевая изотермическая амплификация с этапом обратной транскрипции (OT-LAMP); полногеномная амплификация (whole genome amplification, WGA); амплификация с вытеснением цепи (strand displacement amplification, SDA); подготовка библиотек для NGS секвенирования. Активность / единица активности: 8 ед. акт./ мкл. За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для включения 10 нмоль дНТФ в кислотонерастворимую фракцию в течение 30 минут при температуре плюс 65 °C. Происхождение фермента. Фермент получают из штамма Escherichia coli, содержащего модифицированный ген ДНК-полимеразы Bacillus stearothermophilus. Преимущества фермента. На основе данного фермента производится более 8 наборов реагентов для детекции различных заболеваний методами колориметрической изотермической петлевой амплификации, ОТ-LAMP, изотермической петлевой амплификации в режиме реального времени. Условия реакции: 1Х реакционный буфер, инкубировать при температуре от плюс 60 ⁰С до плюс 65 ⁰С. Инактивация происходит при плюс 80 ⁰С в течение 20 мин. Буфер для хранения: 10 мМ Трис рН 7,5, 0,1 М KCl, 0,001 мДТТ, 0,1 мМ ЭДТА, 0,1% Triton X100. Условия хранения: 1 год при минус 20 ⁰С. Цена указана за 8000 ед. акт. фермента. Поставляется с 10-кратным реакционным буфером.