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荧光标记的探针和探测器

荧光探针是一种带有荧光标记和淬灭剂的寡核苷酸,能够与扩增过程中的 DNA 链结合。当探针处于游离状态时,荧光标记和淬灭剂彼此靠近,发生荧光淬灭。在 qPCR 反应中,当探针与目标 DNA 序列杂交后,5’ 外切酶活性聚合酶会裂解探针,分离荧光标记和淬灭剂,从而产生与扩增产物数量成比例的荧光信号。荧光信号强度在每个循环中与探针分裂速率成比例地增加。在 qPCR 中使用探针可以提高反应的准确性和选择性。

荧光染料种类广泛,包括 FAM、R6G、VIC、HEX、JOE、TAMRA、ROX、Cy5 和 Cy5.5 等。

荧光探针可以用于在一个试管中多重分析多个 DNA 靶标。

荧光探针具有高 qPCR 效率。

荧光探针的质量控制包括 HPLC 纯化和质谱验证。